細(xì)胞轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)是生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室中常規(guī)的研究手段,，目的是把外源基因,、蛋白或者小分子導(dǎo)入到靶細(xì)胞內(nèi)。目前主要有三種主流方法：生物轉(zhuǎn)染,，物理轉(zhuǎn)染和化學(xué)轉(zhuǎn)染,。其中生物轉(zhuǎn)染主要是利用病毒等微生物作為基因?qū)胼d體，以慢病毒,、腺病毒和腺相關(guān)病毒等常見(jiàn),，其侵染效率可以達(dá)到90%以上，但常因安全性等問(wèn)題,，很多實(shí)驗(yàn)室對(duì)其敬而遠(yuǎn)之,。物理轉(zhuǎn)染主要包括顯微注射、電穿孔和基因,，無(wú)論哪一種都需要特定的設(shè)備,，且一分錢(qián)一分貨，性能好的價(jià)格也都相對(duì)較高,。如想申請(qǐng)?jiān)囉醚b,，請(qǐng)關(guān)注公眾號(hào)：Mine-bio，回復(fù)“申請(qǐng)PEI”,，即可參加,！PEI轉(zhuǎn)染試劑的主要分子量是多少呢？天津Kyfora Bio by PolysciencesPEI轉(zhuǎn)染試劑官方代理

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注意事項(xiàng)質(zhì)粒質(zhì)量：請(qǐng)務(wù)必使用高質(zhì)量轉(zhuǎn)染級(jí)無(wú)內(nèi)質(zhì)粒（推薦使用QIAGEN或者M(jìn)N公司去內(nèi)質(zhì)粒提取試劑盒）。通過(guò)260nm光吸收測(cè)定DNA濃度,，260nm/280nm比值確定DNA純度（比值應(yīng)該在1.8~2.0的范圍之內(nèi)）,。如有可能，請(qǐng)通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)質(zhì)粒的完整性,。細(xì)胞條件：使用適當(dāng)保存和經(jīng)常傳代的健康細(xì)胞。確保培養(yǎng)基沒(méi)有被細(xì)菌,、或支原體污染,。如果細(xì)胞是近期復(fù)蘇的液氮凍存細(xì)胞，請(qǐng)?jiān)谵D(zhuǎn)染前至少傳代兩次,。建議使用GIBCO或者78bio公司血清培養(yǎng)細(xì)胞,。更多Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑等相關(guān)產(chǎn)品信息，歡迎咨詢上海曼博生物,！近期還有PEI試用裝申請(qǐng)活動(dòng),，可關(guān)注我們的公眾號(hào)：Mine-bio

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產(chǎn)品特點(diǎn)：PEIMAX40K是線性聚乙烯亞胺鹽酸鹽形式（LinearPolyethylenimineHydrochloride）,，是線性化聚乙烯亞胺PEI25K的升級(jí)產(chǎn)品,。相比于PEI25K,，PEIMAX40K：1.完全水解（去乙酰化）,；2.鹽酸鹽形式,，具更高的水溶特性；3.含更長(zhǎng)連續(xù)性乙烯亞胺片段,，其質(zhì)子化氮水平比PEI25K提高11%以上,。應(yīng)用領(lǐng)域：PEIMAX40K（cat#24765）是一款非GMP等級(jí)的PEI轉(zhuǎn)染試劑，適用于基礎(chǔ)學(xué)術(shù)研究和藥物研發(fā)早期階段,，以固體粉末形式提供,，需用戶自行配置（詳情見(jiàn)使用方法）。更多關(guān)于KyforaBiobyPolysciencesPEI轉(zhuǎn)染試劑,，歡迎咨詢上海曼博生物,！PEI轉(zhuǎn)染試劑的使用方法是怎樣的,？支鏈PEI轉(zhuǎn)染試劑蛋白產(chǎn)量

配制PEI轉(zhuǎn)染試劑的注意事項(xiàng)有哪些,？天津Kyfora Bio by PolysciencesPEI轉(zhuǎn)染試劑官方代理

瞬時(shí)轉(zhuǎn)染方法：1.接種細(xì)胞：轉(zhuǎn)染前一晚,，用膠原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化細(xì)胞并計(jì)數(shù)（不建議用胰酶）。調(diào)整細(xì)胞濃度,，將細(xì)胞鋪入細(xì)胞培養(yǎng)的器皿,，每個(gè)孔置入的細(xì)胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞匯合度達(dá)到70~80%。2.準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物：DNA,、PEI試劑和稀釋劑在進(jìn)行以下步驟前需先使其升至室溫,。，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無(wú)蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA,。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑,。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,，一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中（注意：請(qǐng)勿顛倒添加順序）,。充分混勻后，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物,。當(dāng)溶液體積較大時(shí),，請(qǐng)用圓底聚丙烯管，例如NEST5mL/14mL離心管,。3.轉(zhuǎn)染細(xì)胞：直接向每個(gè)孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿,。在無(wú)血清條件下轉(zhuǎn)染時(shí)，去除生長(zhǎng)培養(yǎng)基,，替換成無(wú)血清培養(yǎng)基,，然后滴DNA-PEI復(fù)合物。轉(zhuǎn)染1.5h后,，添加?體積的包含30%血清的生長(zhǎng)培養(yǎng)基,。4.孵育細(xì)胞和分析結(jié)果：在CO2培養(yǎng)箱中37℃下孵育細(xì)胞至可以分析檢測(cè)。轉(zhuǎn)染后5h即可檢測(cè)到轉(zhuǎn)入基因的表達(dá),。請(qǐng)自行確定適合檢測(cè)時(shí)間,。如想申請(qǐng)?jiān)囉醚b，請(qǐng)關(guān)注公眾號(hào)：Mine-bio,，回復(fù)“申請(qǐng)PEI”,，即可參加！天津Kyfora Bio by PolysciencesPEI轉(zhuǎn)染試劑官方代理