在胰島細(xì)胞刺激中,，基礎(chǔ)和高D-葡萄糖條件之間的刺激指數(shù)為11.6±1.8。通過(guò)應(yīng)用不引起胰島素分泌的L-葡萄糖(20mM)或完全阻斷D-葡萄糖誘導(dǎo)的鉀通道開(kāi)放劑二氮嗪(100mM),，驗(yàn)證了胰島素分泌對(duì)D-葡萄糖的特異性,。胰島素分泌以D-葡萄糖濃度依賴(lài)性方式增加,，從0mMD-葡萄糖時(shí)的68.827.3增加到16.7mMD-葡萄糖時(shí)的679.2±39.5ng/h/106細(xì)胞。胰島素分泌增加Zui快的是5.5至8mMD-葡萄糖,，分別有204.7±51.3和414.9±94.8ng/h/106細(xì)胞,。Humancelldesign構(gòu)建了EndoC-BH1,En-doC-BH3,EndoC-βH5,GLTxEndoC-βH5,HLA-A2EndoC-βH5等一系列的胰島B細(xì)胞模型。通過(guò)多輪次優(yōu)化改良,，獲得的功能胰腺B細(xì)胞,，無(wú)限接近天然人源胰島B細(xì)胞，其胰島素分泌功能與天然細(xì)胞類(lèi)似，基于PDX1/NKX6.1關(guān)鍵基因驗(yàn)證的細(xì)胞均一性達(dá)到90%以上（左圖）,，在2.8mMand11mM葡萄糖劑量下表現(xiàn)出10倍的胰島素分泌反應(yīng)（右圖）,，對(duì)GLP-1R激動(dòng)劑，Exendin4刺激產(chǎn)生明細(xì)那反饋,，且可實(shí)現(xiàn)批量化生成,，實(shí)現(xiàn)穩(wěn)定供應(yīng).糖尿病細(xì)胞模型EndoC-BH5 細(xì)胞作為模型來(lái)在基因組篩選中鑒定胰島素分泌調(diào)節(jié)劑。Human cell design（HCD）糖尿病細(xì)胞模型高度穩(wěn)健且可重復(fù)

EndoC-βH1細(xì)胞移植到小鼠體內(nèi)可以逆轉(zhuǎn)化學(xué)誘導(dǎo)的糖尿病,，EndoC-βH1細(xì)胞每百萬(wàn)細(xì)胞含有0.48μg胰島素,，至少80代穩(wěn)定表達(dá)許多特異性β細(xì)胞標(biāo)記物，沒(méi)有任何其他胰腺細(xì)胞類(lèi)型標(biāo)記物的大量表達(dá),。EndoC-βH1有潛力成為深入研究人類(lèi)β細(xì)胞和藥物篩選的獨(dú)特工具,，同時(shí)也是測(cè)試糖尿病替代細(xì)胞療法的有用臨床前模型。糖尿病細(xì)胞模型,，EndoC-βH1,、EndoC-βH3、EndoC-βH5等細(xì)胞dai biao了大規(guī)模藥物發(fā)現(xiàn)的獨(dú)特工具,，為糖尿病細(xì)胞替代療法提供了臨床前模型,。更多關(guān)于Human Cell Design相關(guān)產(chǎn)品信息，歡迎咨詢(xún)AlibioBuy,！EndoC-BH1糖尿病細(xì)胞模型高度穩(wěn)健且可重復(fù)糖尿病細(xì)胞模型—EndoC-BH5 細(xì)胞響應(yīng)葡萄糖以動(dòng)態(tài)方式分泌胰島素,，并且 GIP 和 GLP-1 類(lèi)似物進(jìn)一步增強(qiáng)分泌。

Humancelldesign（HCD）開(kāi)發(fā)了一種用于在人類(lèi)胎兒組織中使用靶向Zhong Liu產(chǎn)生功能的人類(lèi)β細(xì)胞系,。在胰島素啟動(dòng)子的控制下,，用表達(dá)SV40LT的慢病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo)人類(lèi)胎兒胰腺芽。然后將轉(zhuǎn)導(dǎo)的芽移植到SCID小鼠體內(nèi),，使其發(fā)育成成熟的胰腺組織,。分化后，新形成的表達(dá)sv40lt的β細(xì)胞增殖并形成胰島素瘤,。然后用人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶(hTERT)轉(zhuǎn)導(dǎo)β細(xì)胞,，移植到其他SCID小鼠體內(nèi)，在體外擴(kuò)增生成細(xì)胞系,。其中一種細(xì)胞系,，EndoC-βH1，表達(dá)了許多β細(xì)胞特異性標(biāo)記,，而沒(méi)有任何其他胰腺細(xì)胞類(lèi)型標(biāo)記的實(shí)質(zhì)性表達(dá),。在葡萄糖或其他胰島素分泌劑的刺激下，細(xì)胞分泌胰島素,，細(xì)胞移植逆轉(zhuǎn)了化學(xué)誘導(dǎo)的小鼠糖尿病,。更多關(guān)于Human Cell Design胰島B細(xì)胞相關(guān)產(chǎn)品信息,，歡迎咨詢(xún)AlibioBuy！

HCD利用人胎兒胰腺組織中的靶向ZhongLiu發(fā)生開(kāi)發(fā)了永生化人β細(xì)胞系,，其中使用慢病毒載體整合了兩個(gè)轉(zhuǎn)基因,，SV40大T抗原(SV40-LT)和人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶(hTERT)兩種轉(zhuǎn)基因均在β細(xì)胞特異性大鼠胰島素啟動(dòng)子(RIP)的控制下表達(dá)。***代細(xì)胞,，名為EndoC-βH1,，以組成型方式表達(dá)SV40LT和hTERT，而在第二代EndoC-βH2和EndoC-βH3中,，這些轉(zhuǎn)基因可在loxP介導(dǎo)的CRE重組后被切除,，位點(diǎn)位于慢病毒骨架的3LTR。EndoC-βH5細(xì)胞是通過(guò)使用表達(dá)可切除的SV40LT和hTERT的慢病毒載體對(duì)人胎兒胰腺進(jìn)行靶向ZhongLiu發(fā)生而獲得的.與 EndoC-BH1 細(xì)胞相比,，EndoC-BH5 細(xì)胞與原代人 B 細(xì)胞更接近,。

Humancelldesign（HCD）通過(guò)將永生化轉(zhuǎn)基因hTERT和SV40大T以及單純皰疹病毒-1胸苷激酶整合基因轉(zhuǎn)移至人胎兒胰腺中，產(chǎn)生EndoC-βH5細(xì)胞,。擴(kuò)增后使用CREjihuo去除永生化轉(zhuǎn)基因,，并使用更昔洛韋消除剩余的未切除細(xì)胞，所得細(xì)胞作為可立即使用的EndoC-βH5細(xì)胞進(jìn)行分發(fā),。EndoC-βH5已經(jīng)成功進(jìn)行了轉(zhuǎn)錄組、免疫學(xué)和的功能測(cè)定,。即用型EndoC-βH5細(xì)胞顯示出高效的葡萄糖依賴(lài)性胰島素分泌,。歐洲四個(gè)duli實(shí)驗(yàn)室觀(guān)察并再現(xiàn)了強(qiáng)勁的10倍胰島素分泌指數(shù)。EndoC-βH5細(xì)胞響應(yīng)葡萄糖以動(dòng)態(tài)方式分泌胰島素,。GLP1R和GIPR介導(dǎo)的信號(hào)增強(qiáng)葡萄糖刺激EndoC-βH5細(xì)胞的胰島素分泌.EndoC-B h1是一種永生細(xì)胞系,，可進(jìn)行反復(fù)的復(fù)蘇凍融，有效節(jié)約成本,。Human cell design（HCD）糖尿病細(xì)胞模型高度穩(wěn)健且可重復(fù)

EndoC-B h1和EndoC-B h5哪個(gè)分泌效果好,？Human cell design（HCD）糖尿病細(xì)胞模型高度穩(wěn)健且可重復(fù)

在EndoC-βH5細(xì)胞中檢測(cè)到所有對(duì)β細(xì)胞身份和功能重要的轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá)。與成人b細(xì)胞相比,，EndoC-βH5細(xì)胞中的表達(dá)水平相似（FOXA2,、MNX1、NKX2.2）或更高（HOPX,、MAFB,、NEUROD1、PAX6,、PDX1）,。GLIS3、NKX6.1和MAFA在EndoC-βH5細(xì)胞中以較低水平表達(dá)EndoC-βH5細(xì)胞中表達(dá)與胰島素分泌相關(guān)的受體,，包括腎上腺素(ADRA2A),、脂肪酸(FFAR1,、FFAR3)、GABA(GABRB3),、胰haoxuetang素(GCGR),、生長(zhǎng)抑素(SSTR2)和腸jiangxuetang素受體，例如胰gaoxuetang素樣受體肽-1(GLP1R)和胃抑制多肽(GIPR),。重要的是,，EndoC-βH5細(xì)胞中的GLP1R、GIPR和GCGR比EndoC-bH1細(xì)胞中更豐富.
Human cell design（HCD）糖尿病細(xì)胞模型高度穩(wěn)健且可重復(fù)