接種細胞：轉染前,，用膠原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數(shù)（不建議用胰酶）。調整細胞濃度,，將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿,，每個孔置入的細胞量應能使轉染時細胞匯合度達到70~80%,。2.準備DNA-PEI復合物：DNA、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫,。依據(jù)表1所示,，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑,。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉染試劑(這個需要客戶自行摸索配比,，每一批轉染試劑和每一批DNA比例可能會稍有不同）。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,，一邊將稀釋的線性PEI轉染試劑滴加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）,。充分混勻后，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物,。當溶液體積較大時,，請用圓底聚丙烯管，例如NEST5mL/14mL離心管,。3.轉染細胞：直接向每個孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿,。在無血清條件下轉染時，去除生長培養(yǎng)基,，替換成無血清培養(yǎng)基,，然后滴DNA-PEI復合物。轉染1.5h后,，添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基,。更多關于Polysciences PEI轉染試劑相關問題，歡迎咨詢上海曼博生物,！PEI MAX 是一款高度濃縮的粉劑,，大量科學家選擇PEI MAX ，在內部自行制備低成本高效益的PEI轉染試劑,。山東PEI轉染試劑官方代理

1.對于某些類型的細胞如HEK-293,、HEK293T、NIH/3T3和COS細胞,，在轉染前兩天鋪板可顯著提高轉入基因的表達水平,。如果選擇轉染前兩天鋪板，可適當降低鋪板密度,，以確保轉染時細胞的匯合度仍為70~80%,。2.對于接觸抑制敏感的細胞，可適當降低鋪板密度,。3.即使在有蛋白（如10%的血清）存在的情況下,，DNA-PEI復合物仍能轉染細胞，但是DNA-PEI復合物必須在無蛋白存在的條件下形成。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達到*轉染效率,。其他的無蛋白培養(yǎng)基則需測試與線性PEI轉染試劑的兼容性,。4.對大多數(shù)細胞來而言，每1μgDNA使用3.0μLEndoFectinTM試劑都能獲得較高轉染效率,。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1~4μL體積線性PEI轉染試劑進行優(yōu)化,。歡迎關注公眾號：Mine-bio高性價比PEI轉染試劑轉染效率PEI轉染試劑是一種穩(wěn)定的具有較高的陽離子電荷密度的有機大分子。

產(chǎn)品特點：PEIMAX40K是線性聚乙烯亞胺鹽酸鹽形式（LinearPolyethylenimineHydrochloride）,，是線性化聚乙烯亞胺PEI25K的升級產(chǎn)品,。相比于PEI25K，PEIMAX40K：1.完全水解（去乙?；?；2.鹽酸鹽形式，具更高的水溶特性,；3.含更長連續(xù)性乙烯亞胺片段,，其質子化氮水平比PEI25K提高11%以上。應用領域：PEIMAX40K（cat#24765）是一款非GMP等級的PEI轉染試劑,，適用于基礎學術研究和藥物研發(fā)早期階段,，以固體粉末形式提供，需用戶自行配置（詳情見使用方法）,。歡迎關注曼博生物公眾號：Mine-bio

PEI在于可以應用于體內試驗,。當初試驗經(jīng)費很有限，被逼無奈只能放棄脂質體2000,，選擇PEI,，以至于相當長的時間內，轉染試驗都不順利,。下面是幾點關于PEI轉染的注意要點：1.PEI的使用量可以參照脂質體2000的說明書,，所用質粒盡量去內2.轉染時，一定要把PEI+DMEM加入到質粒+DMEM中,，順序不可錯,，輕微混勻，靜止20min3.轉染后4小時,，一定要換液,！換含有FBS的完全培養(yǎng)液！因為PEI對細胞毒性太大4.如果后續(xù)試驗涉及到穩(wěn)定篩選,，建議把血清濃度適當提高,。PS：事實證明,，PEI是可行的,，已經(jīng)做出穩(wěn)定細胞系了。更多關于PEI轉染試劑相關的信息，可咨詢上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司,！歡迎關注曼博生物公眾號：Mine-bioPEI轉染試劑如何溶解和配置,？

細胞轉染實驗是生物醫(yī)學實驗室中常規(guī)的研究手段，目的是把外源基因,、蛋白或者小分子導入到靶細胞內,。目前主要有三種主流方法：生物轉染，物理轉染和化學轉染,。其中生物轉染主要是利用病毒等微生物作為基因導入載體,，以慢病毒、腺病毒和腺相關病毒等常見,，其侵染效率可以達到90%以上,，但常因安全性等問題，很多實驗室對其敬而遠之,。物理轉染主要包括顯微注射,、電穿孔和基因，無論哪一種都需要特定的設備,，且一分錢一分貨,，性能好的價格也都相對較高。如想申請試用裝,，請關注公眾號：Mine-bio,，回復“申請PEI”，即可參加,！PEI轉染試劑主要包括25K和40K的分子量,？293細胞PEI轉染試劑價格多少

Polysciences的PEI轉染試劑品質如何？山東PEI轉染試劑官方代理

對于某些類型的細胞如HEK-293,、HEK293T,、NIH/3T3和COS細胞，在轉染前兩天鋪板可顯著提高轉入基因的表達水平,。如果選擇轉染前兩天鋪板,，可適當降低鋪板密度，以確保轉染時細胞的匯合度仍為70~80%,。2.對于接觸抑制敏感的細胞,，可適當降低鋪板密度。3.即使在有蛋白（如10%的血清）存在的情況下,，DNA-PEI復合物仍能轉染細胞,，但是DNA-PEI復合物必須在無蛋白存在的條件下形成。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達到*轉染效率,。其他的無蛋白培養(yǎng)基則需測試與線性PEI轉染試劑的兼容性,。4.對大多數(shù)細胞來而言,，每1μgDNA使用3.0μLEndoFectinTM試劑都能獲得較高轉染效率。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1~4μL體積線性PEI轉染試劑進行優(yōu)化,。Polysciences轉染與遞送相關產(chǎn)品已正式移交Kyfora Bio,，相關產(chǎn)品標簽將變更為Kyfora Bio by Polysciences，后續(xù)購買請認準備新品牌,。山東PEI轉染試劑官方代理