穩(wěn)定轉(zhuǎn)染方法：1.接種細胞：轉(zhuǎn)染前一晚，用膠原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數(shù)（不建議用胰酶）,。調(diào)整細胞濃度,，將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿，每個孔置入的細胞量應能使轉(zhuǎn)染時細胞匯合度達到70~80%,。2.準備DNA-PEI復合物：DNA,、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。依據(jù)表1所示,，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA,。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑(這個需要客戶自行摸索配比,，每一批轉(zhuǎn)染試劑和每一批DNA比例可能會稍有不同）,。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管，一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）,。充分混勻后,，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物。當溶液體積較大時,，請用圓底聚丙烯管,，例如NEST5mL/14mL離心管。3.轉(zhuǎn)染細胞：直接向每個孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿,。在無血清條件下轉(zhuǎn)染時,，去除生長培養(yǎng)基，替換成無血清培養(yǎng)基,，然后滴DNA-PEI復合物,。轉(zhuǎn)染1.5h后，添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基,。歡迎關注我們的公眾號：Mine-bio 想購買24765-1在哪里可以買,？國產(chǎn)PEI轉(zhuǎn)染試劑殘留檢測方法

產(chǎn)品特點：PEIMAX40K是線性聚乙烯亞胺鹽酸鹽形式（LinearPolyethylenimineHydrochloride），是線性化聚乙烯亞胺PEI25K的升級產(chǎn)品,。相比于PEI25K,，PEIMAX40K：1.完全水解（去乙酰化）,；2.鹽酸鹽形式,，具更高的水溶特性；3.含更長連續(xù)性乙烯亞胺片段,，其質(zhì)子化氮水平比PEI25K提高11%以上,。應用領域：PEIMAX40K（cat#24765）是一款非GMP等級的PEI轉(zhuǎn)染試劑，適用于基礎學術研究和藥物研發(fā)早期階段,，以固體粉末形式提供,，需用戶自行配置（詳情見使用方法）,。更多關于KyforaBiobyPolysciencesPEI轉(zhuǎn)染試劑，歡迎咨詢上海曼博生物,！國產(chǎn)PEI轉(zhuǎn)染試劑殘留檢測方法哪個品牌的PEI轉(zhuǎn)染試劑性價比高,？

PEIMAX-----高產(chǎn)工業(yè)化轉(zhuǎn)染試劑-高度濃縮,，可制備大量轉(zhuǎn)染試劑Polysciences轉(zhuǎn)染試劑系列是基于聚乙烯亞胺（Polyethylenimine，PEI）的產(chǎn)品,，因其較高的轉(zhuǎn)染效果,，已大量應用于工業(yè)化生產(chǎn)。聚乙烯亞胺是一種具有較高的陽離子電荷密度的有機大分子,，每相隔二個碳原子，即每“第三個原子都是質(zhì)子化的氨基氮原子,，使得聚合物網(wǎng)絡在任何pH下都能充當有效的“質(zhì)子海綿”(protonsponge)體,。PEI可用作轉(zhuǎn)染試劑，它可以縮聚DNA分子形成顆粒并轉(zhuǎn)染真核細胞,。PEIMAX40K是由Polysciences出品的全合成線性聚乙烯亞胺瞬時轉(zhuǎn)染試劑,。PEIMAX是一款高度濃縮的粉劑，大量科學家選擇PEIMAX,，在內(nèi)部自行制備低成本高效益的PEI轉(zhuǎn)染試劑,。多年以來，經(jīng)過眾多業(yè)內(nèi)人士評審的公開研究和出版文獻表明,，在HEK293,、CHO和Sf9系統(tǒng)中可獲得很高的轉(zhuǎn)染效率，在重組抗體和病毒載體生產(chǎn)中穩(wěn)定性高,，可靠性強,。PEIMAX提供從96孔板到200L生物反應器持續(xù)的高基因表達細胞體系，實現(xiàn)從新藥研發(fā)到工業(yè)化生產(chǎn)的輕松過度,。而且與大多數(shù)細胞轉(zhuǎn)染方案相比,，使用PEIMAX至少可降低40%轉(zhuǎn)染成本（部分案例可降低90%轉(zhuǎn)染成本）。

對于某些類型的細胞如HEK-293,、HEK293T,、NIH/3T3和COS細胞，在轉(zhuǎn)染前兩天鋪板可顯著提高轉(zhuǎn)入基因的表達水平,。如果選擇轉(zhuǎn)染前兩天鋪板,，可適當降低鋪板密度，以確保轉(zhuǎn)染時細胞的匯合度仍為70~80%,。2.對于接觸抑制敏感的細胞,，可適當降低鋪板密度,。3.即使在有蛋白（如10%的血清）存在的情況下，DNA-PEI復合物仍能轉(zhuǎn)染細胞,，但是DNA-PEI復合物必須在無蛋白存在的條件下形成,。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達到*轉(zhuǎn)染效率。其他的無蛋白培養(yǎng)基則需測試與線性PEI轉(zhuǎn)染試劑的兼容性,。Polysciences轉(zhuǎn)染與遞送相關產(chǎn)品已正式移交Kyfora Bio,，相關產(chǎn)品標簽將變更為Kyfora Bio by Polysciences，后續(xù)購買請認準備新品牌,。更多關于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關產(chǎn)品技術問題,，歡迎咨詢上海曼博生物!有人知道PEI轉(zhuǎn)染試劑的價格么？

細胞分盤：通過胰酶消化收集細胞,，用適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基以4×105至8×105細胞/cm2的密度平鋪細胞于60mm組織培養(yǎng)皿上（根據(jù)實驗需要選擇培養(yǎng)皿,，使細胞貼壁后所占總面積達到培養(yǎng)皿面積的70-90％）。根據(jù)細胞貼壁情況于含5％CO2的37℃溫箱中孵育8-24h,當細胞貼壁完全后即可開始轉(zhuǎn)染,。轉(zhuǎn)染前換入2mL預熱的無血清培養(yǎng)基,。2、制備PEI-DNA混合物：以60mm組織培養(yǎng)皿用420μL反應總體積為例,。準備兩支1.5mL離心管,，一管將質(zhì)粒DNA（總量2-8μg為佳）加入240μLHBS中，混勻,。另一管中則用HBS將100μM的PEI儲存液稀釋成10μM,，充分混合。然后取180μL10μMPEI溶液加入含有DNA的HBS中,，充分混勻后室溫靜置20-30min,。將這420μL的PEI-DNA混合液逐滴加入上述單層細胞的細胞培養(yǎng)基中，輕輕搖動平皿混勻,，置于含5％～7％CO2的37℃溫箱孵育,。注：每次用100μM的PEI儲存液前都需要先將其充分混勻，保證所取的濃度一致,。3,、培養(yǎng)6-10h后更換為37℃預熱的含有血清的培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng),，16h左右可以觀測到報告基因的表達,。無需復雜操作，PEI試劑簡化基因?qū)肓鞒獭?a href="http://18740.cn/zdcbsx/rmkoqzpxwb/19764541.html" target="_blank">高性價比PEI轉(zhuǎn)染試劑價格多少

PEI轉(zhuǎn)染試劑的使用方法是怎樣的,？國產(chǎn)PEI轉(zhuǎn)染試劑殘留檢測方法

材料：質(zhì)粒DNA指數(shù)生長的真核細胞PEI（聚乙烯亞胺）1×HBS（pH7.4）配方：PEI儲存液（100μM）：稱取125mgPEI粉末溶解于50ml1×HBS（pH7.4）中，0.2μm濾膜過濾,，儲存于4℃?zhèn)溆谩?×HBS（pH7.4）：將8.76gNaCl溶解于900ml超純水,，加入20ml1M的HEPES，調(diào)pH值到7.4,，定容至1L，過濾（0.2μm濾膜）后儲存于4℃?zhèn)溆?。方法?．細胞分盤：通過胰酶消化收集細胞,，用適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基以4×105至8×105細胞/cm2的密度平鋪細胞于60mm組織培養(yǎng)皿上（根據(jù)實驗需要選擇培養(yǎng)皿,，使細胞貼壁后所占總面積達到培養(yǎng)皿面積的70-90％）,。根據(jù)細胞貼壁情況于含5％CO2的37℃溫箱中孵育8-24h,當細胞貼壁完全后即可開始轉(zhuǎn)染。轉(zhuǎn)染前換入2mL預熱的無血清培養(yǎng)基,。更多產(chǎn)品信息,，歡迎咨詢上海曼博生物！國產(chǎn)PEI轉(zhuǎn)染試劑殘留檢測方法