1.對(duì)于某些類型的細(xì)胞如HEK-293,、HEK293T,、NIH/3T3和COS細(xì)胞,，在轉(zhuǎn)染前兩天鋪板可顯著提高轉(zhuǎn)入基因的表達(dá)水平,。如果選擇轉(zhuǎn)染前兩天鋪板,，可適當(dāng)降低鋪板密度，以確保轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞的匯合度仍為70~80%,。2.對(duì)于接觸抑制敏感的細(xì)胞,，可適當(dāng)降低鋪板密度。3.即使在有蛋白（如10%的血清）存在的情況下，DNA-PEI復(fù)合物仍能轉(zhuǎn)染細(xì)胞,，但是DNA-PEI復(fù)合物必須在無蛋白存在的條件下形成,。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達(dá)到*轉(zhuǎn)染效率。其他的無蛋白培養(yǎng)基則需測試與線性PEI轉(zhuǎn)染試劑的兼容性,。4.對(duì)大多數(shù)細(xì)胞來而言,，每1μgDNA使用3.0μLEndoFectinTM試劑都能獲得較高轉(zhuǎn)染效率。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1~4μL體積線性PEI轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行優(yōu)化,。如有更多關(guān)于Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)產(chǎn)品問題，歡迎咨詢上海曼博生物,。專為細(xì)胞實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì),，PEI轉(zhuǎn)染試劑提升基因表達(dá)效率。北京PEI轉(zhuǎn)染試劑價(jià)格

PEIMAX粉末配置方法：1)將1gPEIMAX40K放入盛有900mL水的玻璃燒杯中,；2)放入攪拌轉(zhuǎn)子,，放置于磁力攪拌器上，設(shè)置攪拌程序以形成一個(gè)較小的漩渦,；3)等待PEIMAX40K完全溶解,，通常需要5分鐘左右；4)用25mL塑料移液管加入1N氫氧化鈉滴定至pH6.9~7.1,；5)如果不小心超過7.1,，則使用1N的鹽酸和新的塑料移液管將pH重新滴定至6.9~7.1；6)將溶液轉(zhuǎn)移到1L玻璃量筒中,，加入水定容至1L,；7)用無菌真空過濾膜過濾配制的轉(zhuǎn)染試劑溶液；8)按需分裝,，4°C儲(chǔ)存（切記不可冷凍）,；注：未經(jīng)配制的粉末有效期為2年。配置成液體后分裝在合適的瓶子中,，并且保存在4℃的轉(zhuǎn)染試劑將可在6個(gè)月之內(nèi)保持性能,。如jin用于蛋白定性研究，分裝的轉(zhuǎn)染試劑可延長有效使用期至1年,。
北京iPSC培養(yǎng)PEI轉(zhuǎn)染試劑PEI轉(zhuǎn)染試劑適用于針對(duì)293和CHO細(xì)胞的瞬時(shí)轉(zhuǎn)染,。

注意事項(xiàng)質(zhì)粒質(zhì)量：請(qǐng)務(wù)必使用高質(zhì)量轉(zhuǎn)染級(jí)無內(nèi)質(zhì)粒（推薦使用QIAGEN或者M(jìn)N公司去內(nèi)質(zhì)粒提取試劑盒）。通過260nm光吸收測定DNA濃度,，260nm/280nm比值確定DNA純度（比值應(yīng)該在1.8~2.0的范圍之內(nèi)）,。如有可能，請(qǐng)通過瓊脂糖凝膠電泳檢測質(zhì)粒的完整性,。細(xì)胞條件：使用適當(dāng)保存和經(jīng)常傳代的健康細(xì)胞,。確保培養(yǎng)基沒有被細(xì)菌、或支原體污染。如果細(xì)胞是近期復(fù)蘇的液氮凍存細(xì)胞,，請(qǐng)?jiān)谵D(zhuǎn)染前至少傳代兩次,。建議使用GIBCO或者78bio公司血清培養(yǎng)細(xì)胞。歡迎關(guān)注曼博生物公眾號(hào)：Mine-bio

產(chǎn)品簡介Transporter5轉(zhuǎn)染試劑是一種非GMP等級(jí)的即用型線性聚乙烯亞胺（PEI轉(zhuǎn)染試劑）溶液,，由PEIMAX配置而成,，采用0.1umPES無菌過濾器，完全消除支原體污染風(fēng)險(xiǎn),。Transporter5將DNA縮聚成帶正電荷的復(fù)合物,，這些復(fù)合物很容易通過內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞，并且Transporter5-DNA復(fù)合物能很好地抵御溶酶體的降解作用,，有效提高轉(zhuǎn)染效率,。適用于工藝開發(fā)、臨床前和早期臨床研究,，可無縫過渡到MAXgeneGMP用于商業(yè)化生產(chǎn),。Transporter5轉(zhuǎn)染試劑能高效地將DNA轉(zhuǎn)染入HEK-293、CHO,、COS,、HELA、昆蟲（SF9,、SF21）等真核細(xì)胞系,，可作用于大到135,000個(gè)核苷酸的質(zhì)粒，所以較大的質(zhì)粒也可以成功地轉(zhuǎn)染,。Transporter5可節(jié)省試劑準(zhǔn)備時(shí)間,，加快項(xiàng)目進(jìn)度。經(jīng)過嚴(yán)格的性能檢測,，確保品質(zhì),，在新藥研發(fā)過程中是一款快速、重復(fù)性好,、可用于批量產(chǎn)的轉(zhuǎn)染試劑,。用PEI轉(zhuǎn)染試劑為什么會(huì)出現(xiàn)沉淀？

產(chǎn)品特點(diǎn)：PEIMAX40K是線性聚乙烯亞胺鹽酸鹽形式（LinearPolyethylenimineHydrochloride）,，是線性化聚乙烯亞胺PEI25K的升級(jí)產(chǎn)品,。相比于PEI25K，PEIMAX40K：1.完全水解（去乙?；?；2.鹽酸鹽形式，具更高的水溶特性,；3.含更長連續(xù)性乙烯亞胺片段,，其質(zhì)子化氮水平比PEI25K提高11%以上,。應(yīng)用領(lǐng)域：PEIMAX40K（cat#24765）是一款非GMP等級(jí)的PEI轉(zhuǎn)染試劑，適用于基礎(chǔ)學(xué)術(shù)研究和藥物研發(fā)早期階段,，以固體粉末形式提供,，需用戶自行配置（詳情見使用方法）?；蛘哧P(guān)注我們的公眾號(hào)：Mine-bioPEI轉(zhuǎn)染試劑使用的時(shí)候有什么注意事項(xiàng),？北京iPSC培養(yǎng)PEI轉(zhuǎn)染試劑

PEI轉(zhuǎn)染試劑有沒有毒性？北京PEI轉(zhuǎn)染試劑價(jià)格

瞬時(shí)轉(zhuǎn)染方法1.接種細(xì)胞：轉(zhuǎn)染前,，用膠原酶消化細(xì)胞并計(jì)數(shù)（不建議用胰酶）,。調(diào)整細(xì)胞濃度，將細(xì)胞鋪入細(xì)胞培養(yǎng)的器皿,，總體積如表1所示,，每個(gè)孔置入的細(xì)胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞匯合度達(dá)到70~80%。2.準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物：DNA,、PEI試劑和稀釋劑在進(jìn)行以下步驟前需先使其升至室溫。依據(jù)表1所示,，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA,。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用2-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑,。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,，一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中（注意：請(qǐng)勿顛倒添加順序）。充分混勻后,，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物,。當(dāng)溶液體積較大時(shí)，請(qǐng)用圓底聚丙烯管,，例如Falcon5mL/14mL離心管,。3.轉(zhuǎn)染細(xì)胞：直接向每個(gè)孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無血清條件下轉(zhuǎn)染時(shí),，去除生長培養(yǎng)基,，替換成無血清培養(yǎng)基，然后滴DNA-PEI復(fù)合物,。轉(zhuǎn)染3h后,，添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基。4.孵育細(xì)胞和分析結(jié)果：在CO2培養(yǎng)箱中37℃下孵育細(xì)胞至可以分析檢測,。轉(zhuǎn)染后快7h即可檢測到轉(zhuǎn)入基因的表達(dá),。請(qǐng)自行確定檢測時(shí)間。更多關(guān)于Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)內(nèi)容歡迎咨詢上海曼博生物,！北京PEI轉(zhuǎn)染試劑價(jià)格