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上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司成立于2019年,依托于集團公司泉心泉意深厚的資源和超過400家國內客戶群體,,生命科學領域一站式供應鏈體系,,以及高風險生物危險材料進出口平臺的優(yōu)勢,曼博生物嚴格篩選國際創(chuàng)新且經過同行驗證過的產品和技術,,引入中國市場,,開發(fā)、孵育和推廣,,致力于將全球創(chuàng)新產品和前沿技術帶入中國,,集中在為細胞/基因領域、/免疫,,抗體藥物研發(fā)客戶提供小眾創(chuàng)新產品,,包括從Researchgrade到cGMP等級的無動物源培養(yǎng)基質,轉染試劑,、病毒轉導試劑,、基因編輯工具等產品和定制服務,支持ATMP(AdvanceTherapyMedicinalProducts)藥物研發(fā)從R&D到Clinicaltrial以及后期商業(yè)化的無縫轉化,。更多關于Polysciences PEI相關產品問題,,歡迎咨詢上海曼博生物!也歡迎關注我們的公眾號:Mine-Bio.配制PEI轉染試劑的注意事項有哪些,?廣東iPSC培養(yǎng)PEI轉染試劑官方代理
產品特點:PEIMAX40K是線性聚乙烯亞胺鹽酸鹽形式(LinearPolyethylenimineHydrochloride),,是線性化聚乙烯亞胺PEI25K的升級產品。相比于PEI25K,,PEIMAX40K:1.完全水解(去乙?;?.鹽酸鹽形式,,具更高的水溶特性,;3.含更長連續(xù)性乙烯亞胺片段,,其質子化氮水平比PEI25K提高11%以上。應用領域:PEIMAX40K(cat#24765)是一款非GMP等級的PEI轉染試劑,,適用于基礎學術研究和藥物研發(fā)早期階段,,以固體粉末形式提供,需用戶自行配置(詳情見使用方法),。高性價比PEI轉染試劑轉染步驟用PEI轉染時,,一般和DNA的比例是?
穩(wěn)定轉染方法:1.接種細胞:轉染前一晚,用膠原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數(不建議用胰酶),。調整細胞濃度,,將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿,每個孔置入的細胞量應能使轉染時細胞匯合度達到70~80%,。2.準備DNA-PEI復合物:DNA,、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。依據表1所示,,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA,。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉染試劑(這個需要客戶自行摸索配比,,每一批轉染試劑和每一批DNA比例可能會稍有不同),。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的線性PEI轉染試劑滴加至試管中(注意:請勿顛倒添加順序),。充分混勻后,,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物。當溶液體積較大時,,請用圓底聚丙烯管,,例如NEST5mL/14mL離心管。3.轉染細胞:直接向每個孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿,。在無血清條件下轉染時,,去除生長培養(yǎng)基,替換成無血清培養(yǎng)基,,然后滴DNA-PEI復合物,。轉染1.5h后,添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基,。近期還有PEIfree申請活動,,歡迎咨詢上海曼博生物!
1.對于某些類型的細胞如HEK-293,、HEK293T,、NIH/3T3和COS細胞,在轉染前兩天鋪板可顯著提高轉入基因的表達水平,。如果選擇轉染前兩天鋪板,,可適當降低鋪板密度,,以確保轉染時細胞的匯合度仍為70~80%。2.對于接觸抑制敏感的細胞,,可適當降低鋪板密度,。3.即使在有蛋白(如10%的血清)存在的情況下,DNA-PEI復合物仍能轉染細胞,,但是DNA-PEI復合物必須在無蛋白存在的條件下形成,。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達到*轉染效率,。其他的無蛋白培養(yǎng)基則需測試與線性PEI轉染試劑的兼容性,。4.對大多數細胞來而言,每1μgDNA使用3.0μLEndoFectinTM試劑都能獲得較高轉染效率,。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1~4μL體積線性PEI轉染試劑進行優(yōu)化,。更多產品信息,歡迎咨詢上海曼博生物,!想購買24765-1在哪里可以買,?
穩(wěn)定轉染方法:1.接種細胞:轉染前一晚,用膠原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數(不建議用胰酶),。調整細胞濃度,,將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿,每個孔置入的細胞量應能使轉染時細胞匯合度達到70~80%,。2.準備DNA-PEI復合物:DNA,、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。依據表1所示,,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA,。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉染試劑(這個需要客戶自行摸索配比,,每一批轉染試劑和每一批DNA比例可能會稍有不同),。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的線性PEI轉染試劑滴加至試管中(注意:請勿顛倒添加順序),。充分混勻后,,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物。當溶液體積較大時,,請用圓底聚丙烯管,,例如NEST5mL/14mL離心管。3.轉染細胞:直接向每個孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿,。在無血清條件下轉染時,,去除生長培養(yǎng)基,替換成無血清培養(yǎng)基,,然后滴DNA-PEI復合物,。轉染1.5h后,,添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基。歡迎咨詢上海曼博生物,!歡迎關注我們的公眾號Mine-bioPolysciences的PEI轉染試劑品質如何,?即用型PEI轉染試劑哪個品牌好
PEI MAX 是一款高度濃縮的粉劑,大量科學家選擇PEI MAX ,,在內部自行制備低成本高效益的PEI轉染試劑,。廣東iPSC培養(yǎng)PEI轉染試劑官方代理
線性PEI轉染試劑是一種陽離子聚合物,分子量25000,,它能與核酸形成復合物,,并使該復合物進入哺乳動物細胞。線性PEI轉染試劑廣適用于常見細胞系,,如HEK-293,、HEK293T、HepG2,、Hela,、CHO-K1、COS-1,、COS-7,、NIH/3T3和Sf9等。該試劑即使在有血清存在的情況下,,它仍然能的將核酸導入細胞,。78bio公司提供的線性PEI轉染試劑具有如下優(yōu)點:優(yōu)越的轉染效率,重組蛋白的高表達水平,與含血清的培養(yǎng)基相兼容,低細胞毒性,易于操作?質量控制每批次線性PEI轉染試劑均經過轉染測試。將eGFP表達質粒(GeneCopoeiaCat.No.EX-EGFP-Lv01)用EndoFectinTM-Plus轉染試劑轉入亞融合狀態(tài)的HEK-293細胞,,轉染16h后,,超過95%的細胞表達eGFP。更多關于PEI轉染試劑相關產品技術問題,,歡迎咨詢上海曼博生物,。也歡迎關注我們的公眾號:Mine-bio廣東iPSC培養(yǎng)PEI轉染試劑官方代理