對于某些類型的細(xì)胞如HEK-293、HEK293T,、NIH/3T3和COS細(xì)胞,,在轉(zhuǎn)染前兩天鋪板可顯著提高轉(zhuǎn)入基因的表達(dá)水平。如果選擇轉(zhuǎn)染前兩天鋪板,,可適當(dāng)降低鋪板密度,,以確保轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞的匯合度仍為70~80%。2.對于接觸抑制敏感的細(xì)胞,,可適當(dāng)降低鋪板密度,。3.即使在有蛋白(如10%的血清)存在的情況下,DNA-PEI復(fù)合物仍能轉(zhuǎn)染細(xì)胞,,但是DNA-PEI復(fù)合物必須在無蛋白存在的條件下形成,。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達(dá)到*轉(zhuǎn)染效率。其他的無蛋白培養(yǎng)基則需測試與線性PEI轉(zhuǎn)染試劑的兼容性,。更多Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑等相關(guān)產(chǎn)品信息,,歡迎咨詢上海曼博生物,!如想申請?jiān)囉醚b,,可關(guān)注我們的公眾號:Mine-bio,后臺回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請”參加活動(dòng)PEI轉(zhuǎn)染試劑是一種陽離子聚合物轉(zhuǎn)染試劑,。進(jìn)口PEI轉(zhuǎn)染試劑品牌
PEI在于可以應(yīng)用于體內(nèi)試驗(yàn),。當(dāng)初試驗(yàn)經(jīng)費(fèi)很有限,被逼無奈只能放棄脂質(zhì)體2000,,選擇PEI,,以至于相當(dāng)長的時(shí)間內(nèi),轉(zhuǎn)染試驗(yàn)都不順利,。下面是幾點(diǎn)關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染的注意要點(diǎn):1.PEI的使用量可以參照脂質(zhì)體2000的說明書,,所用質(zhì)粒盡量去內(nèi)2.轉(zhuǎn)染時(shí),一定要把PEI+DMEM加入到質(zhì)粒+DMEM中,順序不可錯(cuò),,輕微混勻,,靜止20min3.轉(zhuǎn)染后4小時(shí),一定要換液,!換含有FBS的完全培養(yǎng)液,!因?yàn)镻EI對細(xì)胞毒性太大4.如果后續(xù)試驗(yàn)涉及到穩(wěn)定篩選,建議把血清濃度適當(dāng)提高,。PS:事實(shí)證明,,PEI是可行的,已經(jīng)做出穩(wěn)定細(xì)胞系了,。Polysciences轉(zhuǎn)染與遞送相關(guān)產(chǎn)品已正式移交KyforaBio,,相關(guān)產(chǎn)品標(biāo)簽將變更為KyforaBiobyPolysciences,后續(xù)購買請認(rèn)準(zhǔn)備新品牌,。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)的信息,,可咨詢上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司!25KPEI轉(zhuǎn)染試劑使用比例哪里有賣GMP等級的PEI轉(zhuǎn)染試劑,?
Polysciences 轉(zhuǎn)染試劑系列是基于聚乙烯亞胺(Polyethylenimine,,PEI)的產(chǎn)品,因其較高的轉(zhuǎn)染效果,,已廣泛應(yīng)用于工業(yè)化生產(chǎn),。聚乙烯亞胺是一種具有較高的陽離子電荷密度的有機(jī)大分子,每相隔二個(gè)碳原子,,即每“第三個(gè)原子都是質(zhì)子化的氨基氮原子,,使得聚合物網(wǎng)絡(luò)在任何pH下都能充當(dāng)有效的“質(zhì)子海綿”體(proton sponge)。PEI可用作轉(zhuǎn)染試劑,,它可以縮聚DNA分子形成顆粒并轉(zhuǎn)染真核細(xì)胞,。有實(shí)驗(yàn)證明,分子量為25000的線性PEI即Polysciences 23966(PEI 25K)轉(zhuǎn)染效率表現(xiàn)優(yōu)良,。
Transporter 5轉(zhuǎn)染試劑是一種非GMP等級的即用型線性聚乙烯亞胺(PEI轉(zhuǎn)染試劑)溶液,,由PEI MAX配置而成,采用0.1um PES無菌過濾器,,完全消除支原體污染風(fēng)險(xiǎn),。Transporter 5將DNA縮聚成帶正電荷的復(fù)合物,這些復(fù)合物很容易通過內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞,,并且Transporter 5-DNA 復(fù)合物能很好地抵御溶酶體的降解作用,,有效提高轉(zhuǎn)染效率。適用于工藝開發(fā),、臨床前和早期臨床研究,,可無縫過渡到MAXgene GMP用于商業(yè)化生產(chǎn)。Transporter 5轉(zhuǎn)染試劑能高效地將DNA轉(zhuǎn)染入HEK-293、CHO,、COS,、HELA、昆蟲(SF9,、SF21) 等真核細(xì)胞系,,可作用于大到135,000個(gè)核苷酸的質(zhì)粒,所以較大的質(zhì)粒也可以成功地轉(zhuǎn)染,。 Transporter 5可節(jié)省試劑準(zhǔn)備時(shí)間,,加快項(xiàng)目進(jìn)度。經(jīng)過嚴(yán)格的性能檢測,,確保品質(zhì),,在新藥研發(fā)過程中是一款快速、重復(fù)性好,、可用于批量產(chǎn)的轉(zhuǎn)染試劑,。產(chǎn)品特點(diǎn):非GMP,研究級PEI轉(zhuǎn)染試劑溶液,;高轉(zhuǎn)染效率,;無縫過渡到MAXgene GMP;易放大,,可預(yù)測產(chǎn)量,;用于工藝開發(fā),臨床前和早期臨床研究,。PEI轉(zhuǎn)染試劑會有毒性嗎,?
PEIMAX——高產(chǎn)工業(yè)化轉(zhuǎn)染試劑-高度濃縮,可制備大量轉(zhuǎn)染試劑KyforaBiobyPolysciences轉(zhuǎn)染試劑系列是基于聚乙烯亞胺(Polyethylenimine,,PEI)的產(chǎn)品,,因其較高的轉(zhuǎn)染效果,已廣泛應(yīng)用于工業(yè)化生產(chǎn),。聚乙烯亞胺是一種具有較高的陽離子電荷密度的有機(jī)大分子,,每相隔二個(gè)碳原子,即每“第三個(gè)原子都是質(zhì)子化的氨基氮原子,,使得聚合物網(wǎng)絡(luò)在任何pH下都能充當(dāng)有效的“質(zhì)子海綿”(protonsponge)體,。PEI可用作轉(zhuǎn)染試劑,,它可以縮聚DNA分子形成顆粒并轉(zhuǎn)染真核細(xì)胞,。PEIMAX40K是由KyforaBiobyPolysciences出品的全合成線性聚乙烯亞胺瞬時(shí)轉(zhuǎn)染試劑。PEIMAX是一款高度濃縮的粉劑,,大量科學(xué)家選擇PEIMAX,,在內(nèi)部自行制備低成本高效益的PEI轉(zhuǎn)染試劑。多年以來,經(jīng)過眾多業(yè)內(nèi)人士評審的公開研究和出版文獻(xiàn)表明,,在HEK293,、CHO和Sf9系統(tǒng)中可獲得很高的轉(zhuǎn)染效率,在重組抗體和病毒載體生產(chǎn)中穩(wěn)定性高,,可靠性強(qiáng),。PEIMAX提供從96孔板到200L生物反應(yīng)器持續(xù)的高基因表達(dá)細(xì)胞體系,實(shí)現(xiàn)從新藥研發(fā)到工業(yè)化生產(chǎn)的輕松過度,。而且與大多數(shù)細(xì)胞轉(zhuǎn)染方案相比,,使用PEIMAX至少可降低40%轉(zhuǎn)染成本(部分案例可降低90%轉(zhuǎn)染成本)。更多關(guān)于Kyfora Bio by Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑,,歡迎咨詢上海曼博生物,!Polysciences的PEI轉(zhuǎn)染試劑品質(zhì)如何?聚乙烯亞胺PEI轉(zhuǎn)染試劑使用注意事項(xiàng)
PEI轉(zhuǎn)染試劑如何做殘留檢測,?進(jìn)口PEI轉(zhuǎn)染試劑品牌
1.對于某些類型的細(xì)胞如HEK-293,、HEK293T、NIH/3T3和COS細(xì)胞,,在轉(zhuǎn)染前兩天鋪板可顯著提高轉(zhuǎn)入基因的表達(dá)水平,。如果選擇轉(zhuǎn)染前兩天鋪板,可適當(dāng)降低鋪板密度,,以確保轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞的匯合度仍為70~80%,。2.對于接觸抑制敏感的細(xì)胞,可適當(dāng)降低鋪板密度,。3.即使在有蛋白(如10%的血清)存在的情況下,,DNA-PEI復(fù)合物仍能轉(zhuǎn)染細(xì)胞,但是DNA-PEI復(fù)合物必須在無蛋白存在的條件下形成,。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達(dá)到*轉(zhuǎn)染效率,。其他的無蛋白培養(yǎng)基則需測試與線性PEI轉(zhuǎn)染試劑的兼容性。4.對大多數(shù)細(xì)胞來而言,,每1μgDNA使用3.0μLEndoFectinTM試劑都能獲得較高轉(zhuǎn)染效率,。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1~4μL體積線性PEI轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行優(yōu)化。若有更多關(guān)于Polysciences 轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)技術(shù)問題,,歡迎咨詢上海曼博生物,。歡迎關(guān)注曼博生物公眾號:Mine-bio進(jìn)口PEI轉(zhuǎn)染試劑品牌