1.對于某些類型的細胞如HEK-293,、HEK293T,、NIH/3T3和COS細胞,，在轉(zhuǎn)染前兩天鋪板可顯著提高轉(zhuǎn)入基因的表達水平,。如果選擇轉(zhuǎn)染前兩天鋪板,，可適當降低鋪板密度,，以確保轉(zhuǎn)染時細胞的匯合度仍為70~80%,。2.對于接觸抑制敏感的細胞,，可適當降低鋪板密度,。3.即使在有蛋白（如10%的血清）存在的情況下,，DNA-PEI復(fù)合物仍能轉(zhuǎn)染細胞，但是DNA-PEI復(fù)合物必須在無蛋白存在的條件下形成,。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達到*轉(zhuǎn)染效率,。其他的無蛋白培養(yǎng)基則需測試與線性PEI轉(zhuǎn)染試劑的兼容性,。4.對大多數(shù)細胞來而言，每1μgDNA使用3.0μLEndoFectinTM試劑都能獲得較高轉(zhuǎn)染效率,。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1~4μL體積線性PEI轉(zhuǎn)染試劑進行優(yōu)化,。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)產(chǎn)品問題，歡迎咨詢上海曼博生物,！歡迎關(guān)注我們的公眾號Mine-bio哪里有賣GMP等級的PEI轉(zhuǎn)染試劑,？PolyplusPEI轉(zhuǎn)染試劑病毒產(chǎn)量

上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司始終致力于為客戶提供一站式生物醫(yī)藥科技服務(wù)，以創(chuàng)新和為價值理念,，通過自身研發(fā)團隊,，以及與國內(nèi)外專業(yè)科研團隊強強聯(lián)合，不斷創(chuàng)新,，為生命科學和醫(yī)藥研發(fā)行業(yè)提供產(chǎn)品和服務(wù),。生物醫(yī)學工程是綜合應(yīng)用生命科學與工程科學的原理和方法，從工程學角度在分子,、細胞,、組織、乃至整個人體系統(tǒng)多層次認識人體的結(jié)構(gòu),、功能和其他生命現(xiàn)象,，研究用于防病、治病,、人體功能輔助及衛(wèi)生保健的人工材料,、制品、裝置和系統(tǒng)技術(shù)的總稱,。也歡迎關(guān)注我們的公眾號：Mine-bio,，查看更多技術(shù)文章！四川Kyfora Bio by PolysciencesPEI轉(zhuǎn)染試劑官方代理配制PEI轉(zhuǎn)染試劑的注意事項有哪些,？

注意事項質(zhì)粒質(zhì)量：請務(wù)必使用高質(zhì)量轉(zhuǎn)染級無內(nèi)質(zhì)粒（推薦使用QIAGEN或者MN公司去內(nèi)質(zhì)粒提取試劑盒）,。通過260nm光吸收測定DNA濃度，260nm/280nm比值確定DNA純度（比值應(yīng)該在1.8~2.0的范圍之內(nèi)）,。如有可能,，請通過瓊脂糖凝膠電泳檢測質(zhì)粒的完整性。細胞條件：使用適當保存和經(jīng)常傳代的健康細胞,。確保培養(yǎng)基沒有被細菌,、或支原體污染。如果細胞是近期復(fù)蘇的液氮凍存細胞,，請在轉(zhuǎn)染前至少傳代兩次,。建議使用GIBCO或者78bio公司血清培養(yǎng)細胞,。更多PEI相關(guān)的產(chǎn)品信息,，歡迎咨詢上海曼博生物,！

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KyforaBiobyPolysciences轉(zhuǎn)染試劑系列是基于聚乙烯亞胺（Polyethylenimine，PEI）的產(chǎn)品,，因其較高的轉(zhuǎn)染效果,，已廣泛應(yīng)用于工業(yè)化生產(chǎn)。聚乙烯亞胺是一種具有較高的陽離子電荷密度的有機大分子,，每相隔二個碳原子,，即每“第三個原子都是質(zhì)子化的氨基氮原子，使得聚合物網(wǎng)絡(luò)在任何pH下都能充當有效的“質(zhì)子海綿”體(protonsponge),。PEI可用作轉(zhuǎn)染試劑,，它可以縮聚DNA分子形成顆粒并轉(zhuǎn)染真核細胞。有實驗證明,，分子量為25000的線性PEI即KyforaBiobyPolysciences23966（PEI25K）轉(zhuǎn)染效率表現(xiàn)優(yōu)良,。請關(guān)注我們的公眾號：Mine-bio無需昂貴設(shè)備，PEI試劑實現(xiàn)經(jīng)濟高效率的基因轉(zhuǎn)染方案,。浙江PEI轉(zhuǎn)染試劑怎么樣

用PEI轉(zhuǎn)染試劑為什么會出現(xiàn)沉淀,？PolyplusPEI轉(zhuǎn)染試劑病毒產(chǎn)量

穩(wěn)定轉(zhuǎn)染方法：1.接種細胞：轉(zhuǎn)染前一晚，用膠原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數(shù)（不建議用胰酶）,。調(diào)整細胞濃度,，將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿，每個孔置入的細胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時細胞匯合度達到70~80%,。2.準備DNA-PEI復(fù)合物：DNA,、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫,。依據(jù)表1所示，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA,。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑,。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑(這個需要客戶自行摸索配比，每一批轉(zhuǎn)染試劑和每一批DNA比例可能會稍有不同）,。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,，一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）。充分混勻后,，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物,。當溶液體積較大時，請用圓底聚丙烯管,，例如NEST5mL/14mL離心管,。3.轉(zhuǎn)染細胞：直接向每個孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無血清條件下轉(zhuǎn)染時,，去除生長培養(yǎng)基,，替換成無血清培養(yǎng)基，然后滴DNA-PEI復(fù)合物,。轉(zhuǎn)染1.5h后,，添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基。歡迎關(guān)注我們的公眾號：Mine-bio PolyplusPEI轉(zhuǎn)染試劑病毒產(chǎn)量