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AB血清替代品血小板裂解液使用注意事項(xiàng)

來源: 發(fā)布時(shí)間:2021-11-30

本發(fā)明涉及細(xì)胞生物學(xué)領(lǐng)域,,特別涉及一種血小板裂解液的制備方法及其應(yīng)用,,用于替代動物來源的血清,,為間充質(zhì)干細(xì)胞擴(kuò)增和生產(chǎn)提供的營養(yǎng)。該制備方法包括:將血小板在20~24℃振蕩保存1~5d,采用反復(fù)凍融法和超聲法進(jìn)行處理,離心,收集上清液,去除纖維蛋白,獲得血小板裂解液.本發(fā)明提供的血小板裂解液的制備方法可明顯提高血小板裂解液中細(xì)胞因子含量,且可進(jìn)行細(xì)胞因子的定量平衡,有利于減少產(chǎn)品批間的差異,可達(dá)到穩(wěn)定的促進(jìn)人源性細(xì)胞生長的作用,。血小板裂解物是由富含血小板的血漿純化萃取而成,其中包含很多不同的細(xì)胞生長因子,。AB血清替代品血小板裂解液使用注意事項(xiàng)

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血小板裂解液解凍后請立即進(jìn)行培養(yǎng)基的配制,配置好的培養(yǎng)基在2-8°C環(huán)境下保存并盡快使用,,不建議超過21天,。如解凍后的原瓶無法全部使用,建議按需分裝成合適的小瓶中進(jìn)行-20°C保存一旦產(chǎn)品瓶或袋經(jīng)過初始解凍過程,,建議盡快將產(chǎn)品置于基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,。盡管對于儲存在2-8°C的準(zhǔn)備好的含有hPL的培養(yǎng)基,Sexton的內(nèi)部測試有效期為21天,,但建議客戶進(jìn)行內(nèi)部驗(yàn)證研究,,以確定其基于血小板裂解液的完整培養(yǎng)基的有效期,使用的基礎(chǔ)培養(yǎng)基和添加劑等變量可能會縮短或延長完整培養(yǎng)基產(chǎn)品的有效期,。AB血清替代品血小板裂解液怎么樣血小板裂解液和胎牛血清,各自有利弊,只是這些年大家對血小板裂解物的熱情比較高漲,。

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前述所說的生長因子大多存在于血小板內(nèi)部的α顆粒中,當(dāng)血小板被活化后會產(chǎn)生脫顆粒作用(即血小板的α顆粒會和細(xì)胞膜融合),,進(jìn)而釋放大量活化的生長因子,。而人源血小板裂解物就是直接將人類來源血小板細(xì)胞經(jīng)過連續(xù)的反復(fù)凍融裂解后,進(jìn)一步提純這些血小板脫顆粒的商品,;人源血小板裂解物除了擁有比富血小板血漿更高的生長因子濃度,,更用特殊工藝去除了細(xì)胞碎片,大幅降低了使用過程中的免疫原性,。

人源血小板裂解物的使用方式非常方便簡單,,在培養(yǎng)基中添加5%血小板裂解物,混合均勻后即可直接用來培養(yǎng)間充質(zhì)干細(xì)胞,,且在傳代過程中不需要預(yù)包被培養(yǎng)皿,。適合應(yīng)用在多種來源的間充質(zhì)原代干細(xì)胞培養(yǎng)過程呦!

建立商業(yè)化細(xì)胞生產(chǎn)的比較好培養(yǎng)基體系需要PD科學(xué)家考慮各種各樣的變量,性能,,來源,、質(zhì)量、可用性,、法規(guī)等,。作為歷史上占主導(dǎo)地位的細(xì)胞生長補(bǔ)充劑和組織培養(yǎng),胎牛血清(FBS),,有著眾所周知的作用限制(動物源性,、價(jià)格波動、道德)具有挑戰(zhàn)性等),,導(dǎo)致使用人源性補(bǔ)充劑,,如血小板裂解物(hPL)和AB人血清(ABS)。人源資源的使用衍生材料并非沒有風(fēng)險(xiǎn)和制造商必須使用適當(dāng)?shù)牟呗詠砉芾砗蜏p輕這些風(fēng)險(xiǎn),。安全是首要原則,。應(yīng)使用符合倫理的原材料來源生產(chǎn)的產(chǎn)品。人源血小板裂解液適合應(yīng)用在多種來源的間充質(zhì)原代干細(xì)胞培養(yǎng)過程,。

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細(xì)胞zhi liao的生產(chǎn)是一項(xiàng)費(fèi)時(shí)又昂貴的工程,。優(yōu)化生產(chǎn)工藝通常會涉及優(yōu)化培養(yǎng)參數(shù)去減少時(shí)間、降低成本,,同時(shí)提供呈現(xiàn)預(yù)期療效的表型,。細(xì)胞增長所需的培養(yǎng)基補(bǔ)充劑也是整個(gè)細(xì)胞生產(chǎn)工藝中的一個(gè)較關(guān)鍵的因素。胎牛血清(FBS)一直以來被作為是細(xì)胞培養(yǎng)的常用補(bǔ)充劑,,但因涉及倫理和安全問題,,如今從加工過的血液中提取的人源培養(yǎng)基補(bǔ)充劑已經(jīng)得到越來越多的使用。血小板因其在血栓形成中的作用而聞名,,很近,,血小板被認(rèn)為是傷口部位再生過程的關(guān)鍵介質(zhì)。血小板裂解過程中釋放的生長因子和細(xì)胞因子可調(diào)節(jié)局部免疫應(yīng)答,,并啟動局部組織的加速恢復(fù)(圖1),。考慮到血小板在人類生物學(xué)中這些作用,,也就不難理解為什么處理過的血小板裂解液能夠給細(xì)胞培養(yǎng)基提供可靠的促生長特性了,。血小板裂解液的使用方法是怎樣的?臨床用血小板裂解液如何制備

血小板裂解液用于無血清分離和傳代培養(yǎng)臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的方法,。AB血清替代品血小板裂解液使用注意事項(xiàng)

Sexton的血小板裂解液系列產(chǎn)品使用干冰運(yùn)輸,,全程確保產(chǎn)品處于凍存狀態(tài)。接收后立即儲存在-20°C環(huán)境中,,使用的時(shí)候必須使用37°C水浴解凍,,而非4°C冰箱或室溫解凍方法,否則會產(chǎn)生更多碎片,影響性能,。對于不立即使用的整瓶/袋解凍的血小板裂解液產(chǎn)品,,建議將剩余體積制備成一次性使用的等分試樣。在滿足生物血清相容性和低溫要求的條件下,,可以使用錐形管或較小的瓶子進(jìn)行等分儲存,。等分試樣的制備將減少血小板裂解液產(chǎn)品的冷凍/解凍循環(huán)。 AB血清替代品血小板裂解液使用注意事項(xiàng)

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