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預(yù)處理除膠原蛋白外,,動(dòng)物骨中還含有油脂,、多種礦物質(zhì)和其他雜質(zhì),,因此在被用于提取膠原蛋白之前必須進(jìn)行預(yù)處理。先剔除動(dòng)物骨上殘留的肉質(zhì)和肌腱等雜物,粉碎后用正丁醇或正己烷萃取出骨油?,F(xiàn)在除去骨中無機(jī)物以提高膠原蛋白的得率。除去骨中的礦物質(zhì)可用稀酸或EDTA溶液,。有人用原料用5倍質(zhì)量的,,用正乙烷脫脂后再用胃蛋白酶酶解,,在加酶量150U/g,,pH值,37℃條件下處理120min,,然后在固液比1∶6的情況下抽提5h,在此條件下,,提取率可達(dá)18%,;還有人用EDTA溶液()浸泡骨料5d,可有效脫去骨料中的羥基磷灰石,。[87-89]膠原蛋白的提取一般有三種方法:一是高壓輔助的物理方法;二是用溶劑預(yù)處理結(jié)合低溫或熱水抽提的化學(xué)方法,,根據(jù)溶劑的不同,,可分為熱水浸提法、酸法,、堿法,、鹽法;三是用酶的生物化學(xué)法,。一般來說,,高壓輔助和熱水抽提針對(duì)明膠的提取,而低溫抽提和酶法針對(duì)膠原的提取,,但其基本原理都是根據(jù)膠原蛋白的特性改變蛋白質(zhì)所在的外界環(huán)境,,把膠原蛋白從其他蛋白質(zhì)中分離出來。由二個(gè)或二個(gè)以上氨基酸組成--蛋白肽,。深海鱈魚膠原蛋白粉
酶解膠原蛋白的工藝主要分為單酶水解法和多酶水解法,。多酶水解法又分為混合酶水解法(比如牛胰蛋白酶,鏈霉菌蛋白酶,,芽孢桿菌蛋白酶混合)和分步酶水解法,,酶法提取皮膠原具體實(shí)驗(yàn)工藝及條件的選取通常應(yīng)考慮要開發(fā)的產(chǎn)品對(duì)分子量的要求,要得到分子量較小的膠原多肽一般采用多酶水解法,。影響酶解效果的因素主要有:酶的種類,、加酶量,、酶解溫度、酶解時(shí)間,、pH值及料水比,。采用酶法提取骨料中的膠原蛋白,既能有效縮短提取時(shí)間,,又能獲得具有良好生物活性的膠原蛋白,,而且對(duì)環(huán)境的污染也較小。膠原蛋白不易被普通蛋白酶水解,,但能被動(dòng)物膠原酶斷裂,斷裂的碎片自動(dòng)變性后可被普通蛋白酶水解,。胃蛋白酶水解膠原蛋白的適宜條件為~,、溫度37℃。天津深海鱈魚膠原蛋白肽原液參與和改善皮膚細(xì)胞的代謝,,使皮膚中的膠原蛋白活性加強(qiáng),。
Ⅺ型膠原是異三聚體,其組成為α1(Ⅺ)α2(Ⅺ)α3(Ⅺ),,Ⅺ型膠原是軟骨的微量成分,,在軟骨膠原纖維的形成和軟骨基質(zhì)的組成中起著重要作用,且常與Ⅱ型膠原共存,。陸生生物的軟骨組織較水生生物含量高的多,,所以Ⅱ型膠原的研究的對(duì)象大多是陸生生物,雖然在1984年已經(jīng)從鯊魚的軟骨中分離出來Ⅱ型膠原,,但是從水產(chǎn)動(dòng)物提?、蛐湍z原的研究并不多。ⅩⅧ型膠原發(fā)現(xiàn)的相對(duì)較晚,,同源性較高,,還有不同的亞類,主要存在于肺,、肝臟和腎臟等組織中,。屬于被稱之為multi-plexin的特殊膠原亞族,含有其他膠原所沒有的C末端非三螺旋區(qū)(non-triple-heli-cal regions,,NC1),,這一特殊結(jié)構(gòu)使其與其他只由三螺旋結(jié)構(gòu)組成的膠原相比擁有更好的靈活性。ⅩⅧ型膠原的研究主要集中在醫(yī)學(xué)和分子生物學(xué)領(lǐng)域,,如胚胎中的轉(zhuǎn)錄表達(dá),。
一級(jí)結(jié)構(gòu)是組成膠原蛋白多肽鏈的氨基酸序列;膠原蛋白分子是由3條左手螺旋(二級(jí)結(jié)構(gòu))的多肽鏈組成,,它們相互纏繞形成一個(gè)在中心分子軸周圍的右手螺旋(三級(jí)結(jié)構(gòu)),;完整的膠原蛋白分子的長(zhǎng)度約280nm,,直徑約;在Ⅰ型膠原原纖維的二維結(jié)構(gòu)(小角X線衍射圖譜和透射電子顯微照片)中,,膠原分子通過一個(gè)或多個(gè)4D距離與另一個(gè)膠原分子交錯(cuò),,D表示在小角X線衍射圖譜中所見的基本重復(fù)距離,,或電子顯微照片中所見的重復(fù)距離,。因?yàn)槟z原分子的長(zhǎng)度約是,膠原分子的交錯(cuò)引起約有,。由于膠原是細(xì)胞外間質(zhì)成分,,在體內(nèi)以不溶性大分子結(jié)構(gòu)存在,并與蛋白多糖,、糖蛋白等結(jié)合在一起,,因此膠原的制備包括材料的選擇、預(yù)處理,、酸堿酶鹽水法提取,、不同類型膠原的分離和純化。采用酶法提取膠原蛋白及其多肽的研究主要是從動(dòng)物皮及其加工副產(chǎn)物中,。
膠原蛋白中甘氨酸(Gly),、丙氨酸(Ala)、脯氨酸(Pro)和谷氨酸(Glu)含量較高,,特別是甘氨酸,,約占總氨基酸的27%,也有報(bào)道說占1/3,,即每隔兩個(gè)其它氨基酸殘基(X,,Y)即有一個(gè)甘氨酸,故其肽鏈可用(Gly-X-Y)n來表示,。每個(gè)原膠原分子由三條α-肽鏈組成,,α-肽鏈自身為α螺旋結(jié)構(gòu),肽鏈中每三個(gè)氨基酸殘基中就有一個(gè)要經(jīng)過此三股螺旋中間區(qū),,而此處空間十分狹窄,,只有甘氨酸適合于此位置,由此可解釋其氨基酸組成中每隔兩個(gè)氨基酸殘基出現(xiàn)一個(gè)甘氨酸的特點(diǎn),。特別注意,,X、Y均表示任意的氨基酸,,只不過X通常是脯氨酸,,Y通常指羥脯氨酸。同時(shí)還含有少量3-羥脯氨酸(3-hydroxyproline)和5-羥賴氨酸(5-hydroxylysine,,Hyl),。羥脯氨酸殘基可通過形成分子內(nèi)氫鍵穩(wěn)定膠原蛋白分子,。三條α-肽鏈借范德化力、氫鍵及共價(jià)交聯(lián)則以平行,、右手螺旋形式纏繞成“草繩狀”三股螺旋結(jié)構(gòu),,使膠原具有很高的拉伸強(qiáng)度。分子量大約在3000道爾頓,,膠原蛋白肽可促進(jìn)骨的形成,。湖北海鯛魚膠原蛋白
人體的吸收是以肽的方式進(jìn)行,食用蛋白肽的吸收利用率可達(dá)100%,。深海鱈魚膠原蛋白粉
為什么女人容易流失膠原蛋白?在相同年齡組中,,女性皮膚失去膠原蛋白的速度要比男性快,男性皮膚內(nèi)膠原蛋白形成的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的物理外觀更顯年輕,。另外,,女性的生理特點(diǎn)也決定了女性要比男性消耗更多的膠原蛋白,如經(jīng)期過后子宮內(nèi)膜脫落,,受損的子宮需要修復(fù),,而子宮內(nèi)膜由膠原纖維組成,就需要大量的膠原蛋白,。生育也會(huì)使子宮受到損傷,,同樣需要消耗膠原蛋白。
膠原蛋白 是皮膚的主要成分之一,,是人體內(nèi)含量**多的蛋白質(zhì),,它們分布在全身各個(gè)組織***中。皮膚除去水分后,,膠原蛋白 的重量占了70%,,負(fù)責(zé)為皮膚提供彈性和緊致度,并扮演著“深層水庫(kù)”的角色,,為表皮提供水分,。 深海鱈魚膠原蛋白粉
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