堿法提取即利用一定濃度的堿在一定的外界條件下提取膠原蛋白,,堿處理法中常用的處理劑為石灰,、氫氧化鈉、碳酸鈉等,,用氫氧化鈉浸提時效果較好,。一般的是把樣品勻漿后,用堿溶液多次溶脹后,,再離心提取,。但由于易引起蛋白質(zhì)變性,如膠原肽鍵水解,,含羥基,、疏基的氨基酸全部被破壞;所得產(chǎn)物等電點(diǎn)pH值較低,,天冬酞胺和谷氨酞胺分別轉(zhuǎn)變?yōu)樘於彼岷凸劝彼?,得到的水解產(chǎn)物分子量較在酸性溶液中比低等問題,若比較嚴(yán)重的話,,還會產(chǎn)生D,、L-型氨基酸消旋混合物,若D型氨基酸含量高過L型氨基酸,,則會抑制L-型氨基酸的吸收,,有些D型氨基酸有毒,甚至有致ai,、致畸和致突變的作用,。而且堿法提取的含量較低,用氫氧化鈉從魷魚皮中提取堿溶性膠原蛋白,,其得率只有3%(以濕基計(jì)),。所以,若想提取結(jié)構(gòu)完整,、使用安全的膠原蛋白,,很少采用此方法。有關(guān)單獨(dú)采用堿法提取膠原蛋白的報道不多,,一般是堿法提取和酸法提法結(jié)合使用,。比如在4℃條件下,魚骨用,再用,,用10%的異丙醇溶液去除脂肪,,,現(xiàn)在得到無色無味的膠原蛋白,,提取率為,。 無脊椎動物與脊椎動物在進(jìn)化上相距遙遠(yuǎn),它們的膠原性質(zhì)存在明顯的差異,。湖南膠原蛋白哪個牌子好
天然高分子材料中相當(dāng)有代表性的是天然蛋白質(zhì)和天然多糖,,多糖主要有軟骨素、HA(透明質(zhì)酸),、殼聚糖,、肝素等,多糖復(fù)合材料比較集中于可吸收性外科縫線,、藥物釋放的載體,、皮膚替代物、透析膜,、止血劑,、醫(yī)用引導(dǎo)組織再生材料、骨替代材料,、組織培養(yǎng)系統(tǒng)的支架,。膠原作為醫(yī)用生物材料,較重要的特點(diǎn)在于其低免疫原性,,與其它具有免疫原性的蛋白質(zhì)相比,,膠原蛋白的免疫原性非常低。人們甚至曾認(rèn)為膠原不具有抗原性,,研究表明:膠原具有低免疫原性,不含端肽時免疫原性尤其低,。河北牡蠣膠原蛋白功效和作用公司生產(chǎn)加工魚膠原蛋白肽,、深海魚低聚肽、牛骨髓肽,、大豆肽,、牡蠣肽、蠶蛹肽,、豌豆肽等等膠原蛋白肽制品,。
海南省華上生物科技有限公司生產(chǎn)蠶蛹蛋白,肽蠶蛹中的蠶蛹蛋白含量豐富,,脫脂蠶蛹中粗蛋白含量可達(dá)77%,。蠶蛹蛋白是一種全價優(yōu)良的品質(zhì)蛋白,其蛋白質(zhì)的氨基酸配比均衡性好,同時含多種礦物質(zhì),,微量元素含量豐富,,鐵、鋅含量很高,,是一種具有廣闊開發(fā)前景的優(yōu)良的品質(zhì)資源,。每100千克蠶蛹所含蛋白質(zhì)相當(dāng)于85千克瘦豬肉,或96千克雞蛋和109千克鯽魚所含的蛋白質(zhì),,而且蠶蛹蛋白為一種全價蛋白,,氨基酸品種齊全,其中含有18種氨基酸,,人體必需的8種氨基酸總量為40.85%,,超過世界衛(wèi)生組織所規(guī)定的36%的標(biāo)準(zhǔn),比豬肉,、羊肉,、雞蛋、牛奶中所含的必需氨基酸高幾倍,,并且必需氨基酸均衡性好,,相互比例合宜。
交聯(lián)指使膠原分子內(nèi)部和分子間通過共價健結(jié)合提高膠原纖維的張力和穩(wěn)定性的方法,。該法又分為物理方法,、化學(xué)方法和低溫等離子體法,生物學(xué)方法,;其中物理方法,、化學(xué)方法是較常用的交聯(lián)改性方法,生物學(xué)方法改性膠原蛋白主要在研究有關(guān)動物老化的生命現(xiàn)象中涉及,,在研制膠原基生物醫(yī)學(xué)材料中少見報道,。[74][127]物理方法通過物理手段對膠原蛋白改性有紫外線照射、重度脫水,、λ射線照射和熱交聯(lián)等方法,。膠原溶液如被紫外線等照射,將在分子間產(chǎn)生交聯(lián),,粘度增加,,生成凝膠。常用的紫外線交聯(lián)膠原膜的方法是將膠原膜放在鋁箔上,,距離254nm紫外燈20cm高度,,照射1~5h。對紫外線照射的膠原膜進(jìn)行力學(xué)性能和膠原酶試驗(yàn)表明:交聯(lián)膠原膜的萎縮溫度Ts和抗膠原酶解的能力均明顯高于未交聯(lián)膠原膜,。[128]重度脫水也是膠原蛋白物理改性中常使用的方法,,該法是通過脫水導(dǎo)致膠原分子間交聯(lián),,從而增加變性溫度,改善膠原的性能,。改性后膠原膜生物相容性提高,,降低了水溶性,影響了膜與成骨細(xì)胞的生物相容性,。物理方法改性原蛋白的優(yōu)點(diǎn)是可避免外源性有毒化學(xué)物質(zhì)進(jìn)入膠原內(nèi),,缺點(diǎn)是膠原膜交聯(lián)度低,且難以獲得均勻一致的交聯(lián),。 作用營養(yǎng)性,、修復(fù)性、保濕性,、親和性,。
有人以豬骨為原料,用蛋白酶的酶解反應(yīng)代替?zhèn)鹘y(tǒng)制膠工藝,,對骨膠原的酶解反應(yīng)與酶法制膠工藝進(jìn)行了試驗(yàn)研究,。結(jié)果表明:以胃蛋白酶對骨膠原的提取率比較高(),其次是胰蛋白酶(),,接下來是中性蛋白酶(),,現(xiàn)在是堿性蛋白酶()。并且通過單因素和正交試驗(yàn)對胃蛋白酶酶解反應(yīng)中各主要影響因素進(jìn)行了優(yōu)化,。試驗(yàn)結(jié)果表明,,胃蛋白酶提取的比較好條件是,胃蛋白酶的濃度是1%,,在,,然后在濃度為10%(w/v)的NaCL溶液中鹽析24h,現(xiàn)在骨膠原的回收率為,,骨膠原的提取率為,。還有人用胃蛋白酶提取豬皮膠原蛋白,分別在水解0,、2,、6、10,、14、18,、22,、26h時對四種不同胃蛋白酶用量(分別為1%、2%,、,、3%)的試樣取樣檢測,,采用一階HILL方程模擬胃蛋白酶提取豬皮膠原蛋白的進(jìn)程以及胃蛋白酶水解速率的衰減過程,現(xiàn)在得出2%的胃蛋白酶用量和6-7h的水解時間提取率比較大,。還有人用以新鮮豬皮為原料,,在50-52℃的條件下用胰酶進(jìn)行水解,在酶用量為5000:1~10000:1,,pH值為9,,反應(yīng)2-3h,原料:水為1:2的條件下酶解,。結(jié)果表明:總蛋白質(zhì)的提取率≥80%,。 鹽法提取是利用各種不同的鹽在不同的濃度條件下提取鹽溶性膠原蛋白的方法。天津膠原蛋白液體飲品
在這些酶的較適作用溫度下提取可能會破壞膠原蛋白的某些功能特性和生物活性,。湖南膠原蛋白哪個牌子好
氨基酸分析表明,,,每1000個氨基酸殘基含有309個甘氨酸,,其次為谷氨酸,、脯氨酸和丙氨酸,分別為98,、82和82個殘基,,羥基脯氨和羥基賴氨酸數(shù)也較較高別為40和27。外傘中高的膠原蛋白含量表明水母資源是一個潛在的膠原蛋白源,。Ⅰ型膠原分子長度約300nm,,直徑約,呈棒狀,,由三條肽鏈組成,,其中有兩條α(Ⅰ)鏈,一條Ⅰ型膠原蛋白的電泳圖譜[29]α(Ⅱ)鏈,。對機(jī)體功能作用較強(qiáng),。α(Ⅰ)鏈和α(Ⅱ)鏈之間的氨基酸序列只有微小的差異。有人利用Ⅰ型膠原蛋白的電腦模型來模擬結(jié)締組織的外基質(zhì)結(jié)構(gòu),,結(jié)果表明,,用其它一些基團(tuán)取代Ⅰ型膠原蛋白兩條鏈上氨基乙酸就會導(dǎo)致骨合成異常。第3條α鏈多存在于絕大多數(shù)真骨魚類,,尤其是魚皮,,其他陸生脊椎動物沒有。由3條異種α鏈形成的單一型雜分子α1(Ⅰ)α2(Ⅰ)α3(Ⅰ)組成,,而非[α1(Ⅰ)]2α2(Ⅰ),。有人研究了黑石首魚和羊頭海鯛的骨和鱗的酸性膠原蛋白(ASC)的電泳類型,發(fā)現(xiàn)在電泳譜帶上可以清楚地看到β,、γ,、α1和α2組分,,且α1的分子量為130kD,α2的分子量為110kD,。因此,,在某些魚類中,與其他組織,,如肌肉和膀胱相比較,,魚皮膠原蛋白中的α3(Ⅰ)鏈更適宜傳遞。 湖南膠原蛋白哪個牌子好
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