酶解膠原蛋白的工藝主要分為單酶水解法和多酶水解法,。多酶水解法又分為混合酶水解法（比如牛胰蛋白酶,，鏈霉菌蛋白酶,，芽孢桿菌蛋白酶混合）和分步酶水解法,，酶法提取皮膠原具體實驗工藝及條件的選取通常應(yīng)考慮要開發(fā)的產(chǎn)品對分子量的要求,，要得到分子量較小的膠原多肽一般采用多酶水解法。影響酶解效果的因素主要有：酶的種類,、加酶量,、酶解溫度、酶解時間,、pH值及料水比,。采用酶法提取骨料中的膠原蛋白，既能有效縮短提取時間,，又能獲得具有良好生物活性的膠原蛋白,，而且對環(huán)境的污染也較小。膠原蛋白不易被普通蛋白酶水解,，但能被動物膠原酶斷裂,，斷裂的碎片自動變性后可被普通蛋白酶水解。胃蛋白酶水解膠原蛋白的適宜條件為～,、溫度37℃,。 補充膠原三肽，能更有效的將皮膚細胞撐起,，結(jié)合保濕和抑制皺紋的作用,。重慶口服膠原蛋白

    可用于膠原蛋白的純化方法包括鹽析法、透析法,、離心法,、電泳法和色譜法,，其中鹽析法、離心法和電泳法較為常用,。由于單一方法難以完全分離純化膠原蛋白,，實際操作都是通過復(fù)合法來達到分離純化膠原蛋白的目的。鹽析法一般采用高濃度NaCl,；離心法常選用制備型低溫超速離心機,；電泳法多采用十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳法（SDS-PAGE），該法既可用于膠原蛋白的分離純化,，還可用來測定膠原蛋白分子的相對分子質(zhì)量,。像有人用破碎、酶解,、鹽析三步法提純蘇尼特羊骨骼I型膠原蛋白,。先去除骨頭里的非膠原物質(zhì)，然后往沉淀中10%的胃蛋白酶,，在4℃的條件下消化24h,，以14000r/min離心40min。棄沉淀往上清液中加NaCL,，使它終濃度達到,，靜止過夜，再離心,，現(xiàn)在的沉淀就是I型膠原蛋白,。 河南海鯛魚膠原蛋白肽口服液膠原蛋白已廣泛應(yīng)用于各種化學(xué)試劑交聯(lián)膠原。

    化學(xué)方法比物理方法改,。聯(lián)度高,，且能獲得均勻一致的交聯(lián)，對調(diào)節(jié),、控制膠原的各性質(zhì)均有效,。已廣泛應(yīng)用于各種化學(xué)試劑交聯(lián)膠原，以提高其交聯(lián)度,、力學(xué)性能及生物相容性,。化學(xué)改性法具體又可分為使用化學(xué)試劑交聯(lián),、側(cè)鏈的修飾,、生理活性物的固定化三種方法。[130]化學(xué)試劑交聯(lián)法中常用的化學(xué)交聯(lián)劑有戊二醛,、己異二氰酸酯,、碳化二亞胺、疊氮二苯基磷等,，其中戊二醛是應(yīng)用較比較廣的試劑,，大量實驗證明：戊二醛能提供有效交聯(lián)，但有細胞毒性,，且其用量難以控制,。另外，隨著交聯(lián)度的增加,，吸水能力和膨脹度卻會降低。?；B氮化物,、聚環(huán)氧化物或京尼平交聯(lián)等，不會引入明顯的毒性,，且可獲得理想的交聯(lián)效果。所見報道中,，多使用單一交聯(lián)劑對膠原蛋白交聯(lián)改性,，但也有使用混合交聯(lián)劑的,，如為了解決人工心臟瓣膜晚期鈣化問題,，篩選出環(huán)氧丙烷化學(xué)改性戊二醛處理生物瓣的方法，可明顯減低瓣膜組織膠原蛋白末端游離羧基含量,。動物實驗表明，經(jīng)改性后的瓣膜組織能保持較好的組織穩(wěn)定性和機械抗張強度,、免疫原性測試為陰性，符合臨床應(yīng)用,。

    有人以豬骨為原料，用蛋白酶的酶解反應(yīng)代替?zhèn)鹘y(tǒng)制膠工藝,，對骨膠原的酶解反應(yīng)與酶法制膠工藝進行了試驗研究,。結(jié)果表明：以胃蛋白酶對骨膠原的提取率比較高（）,，其次是胰蛋白酶（），接下來是中性蛋白酶（）,，現(xiàn)在是堿性蛋白酶（）,。并且通過單因素和正交試驗對胃蛋白酶酶解反應(yīng)中各主要影響因素進行了優(yōu)化。試驗結(jié)果表明,，胃蛋白酶提取的比較好條件是,，胃蛋白酶的濃度是1%，在,，然后在濃度為10%（w/v）的NaCL溶液中鹽析24h,，現(xiàn)在骨膠原的回收率為，骨膠原的提取率為。還有人用胃蛋白酶提取豬皮膠原蛋白,，分別在水解0,、2、6,、10,、14、18,、22,、26h時對四種不同胃蛋白酶用量（分別為1%、2%,、,、3%）的試樣取樣檢測，采用一階HILL方程模擬胃蛋白酶提取豬皮膠原蛋白的進程以及胃蛋白酶水解速率的衰減過程,，現(xiàn)在得出2%的胃蛋白酶用量和6-7h的水解時間提取率比較大,。還有人用以新鮮豬皮為原料，在50-52℃的條件下用胰酶進行水解,，在酶用量為5000：1～10000：1,，pH值為9，反應(yīng)2－3h,，原料：水為1：2的條件下酶解,。結(jié)果表明：總蛋白質(zhì)的提取率≥80%。 鹽法提取是利用各種不同的鹽在不同的濃度條件下提取鹽溶性膠原蛋白的方法,。

臨床大量的資料證實,，牡蠣具有提高男性血清睪酮水平、****,、抑制血小板聚集,、改善血糖高癥狀、提高人體抵抗力,、促進新陳代謝等功能,，對抗ai和防止ai細胞擴散也有一定效果,。預(yù)防心腦血管病癥牡蠣糖胺聚糖對過氧化氫誘導(dǎo)的血管內(nèi)皮細胞氧化損傷有保護作用,，能有效的防止因血管內(nèi)皮損傷而引起的血壓高、動脈硬化,、腦卒中等多種心血管疾病的發(fā)生,。抗zhonh,。瘤作用牡蠣天然活性肽（BPO）,，能有效抑制胃aiBCC-823細胞增殖活動，有明顯的ai細胞誘導(dǎo)凋亡作用。相對于較大分子膠原蛋白而言,，膠原三肽更能有效的服務(wù)于人類的健康與美麗,。重慶小分子膠原蛋白原液

所以是各國女性較為認可的魚類膠原蛋白。重慶口服膠原蛋白

    IV型膠原蛋白非常細小而且呈線性分布在組織內(nèi)部,，是連接表皮和真皮的主要要素,。Ⅴ型膠原的肽鏈由2條α1鏈和1條α2鏈或由3條α1鏈組成，存在3種組裝形式：[α1(Ⅴ)]3,、[α1(Ⅴ)]2α2(Ⅴ)和α1(Ⅴ),、α2(Ⅴ)、α3(Ⅴ),，其中以[α1(Ⅴ)]2α2(Ⅴ)為主,。Ⅴ型膠原分布在細胞周圍以及Ⅰ型膠原的周圍，可能在基膜和結(jié)締組織之間起著橋梁作用,，已經(jīng)從數(shù)種魚類肌肉中分離出來,。XV型膠原蛋白分布較廣而且多分布在血管、神經(jīng)組織的外面地帶,，而且其與角化細胞**黑素細胞分子發(fā)生有關(guān),。[33-36]膠原、明膠和水解膠原蛋白的電泳分析[37]Ⅺ型膠原是異三聚體,，其組成為α1(Ⅺ)α2(Ⅺ)α3(Ⅺ),，Ⅺ型膠原是軟骨的微量成分，在軟骨膠原纖維的形成和軟骨基質(zhì)的組成中起著重要作用,，且常與Ⅱ型膠原共存,。陸生生物的軟骨組織較水生生物含量高的多，所以Ⅱ型膠原的研究的對象大多是陸生生物,，雖然在1984年已經(jīng)從鯊魚的軟骨中分離出來Ⅱ型膠原,，但是從水產(chǎn)動物提取Ⅱ型膠原的研究并不多,。 重慶口服膠原蛋白

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