酶法提取是指可溶性膠原和酸溶性膠原被提取后,，需用一些蛋白酶，如膠原酶,、胃蛋白酶,、木瓜蛋白酶和胰凝乳蛋白酶等水解，得到不同的酶促溶性膠原蛋白,。所使用的蛋白酶主要分3種：動(dòng)物蛋白酶（如胰蛋白酶,，胃蛋白酶），植物蛋白酶（如木瓜蛋白酶,，菠蘿蛋白酶），微生物蛋白酶（如堿性蛋白酶,，中性蛋白酶）,。在對(duì)酶法水解膠原蛋白的研究中，以堿性蛋白酶應(yīng)用較多,。將膠原進(jìn)行限制性降解，即將末端肽切割下來(lái),，由于膠原肽鏈間的共價(jià)鍵都是通過(guò)分子末端肽里的賴氨酸或羥賴氨酸的相互作用形成的,，末端肽被切下后，含三螺旋結(jié)構(gòu)的主體部分可溶于稀有機(jī)酸而被提取出來(lái),。用酶處理,，可以水解掉膠原纖維蛋白的末端肽，提高膠原蛋白的產(chǎn)率,；而且還不會(huì)破壞膠原蛋白的三股螺旋結(jié)構(gòu)，保持其特性,。影響酶提取的因素有很多,，如酶濃度、酶與底物的比例,、酶解時(shí)間,、酶解溫度,、pH值以及料液比等。在實(shí)際操作中,，大多數(shù)采用酶復(fù)合法提取膠原蛋白,，較多的是使用胃蛋白酶提取，有機(jī)酸多為乙酸,。 無(wú)脊椎動(dòng)物與脊椎動(dòng)物在進(jìn)化上相距遙遠(yuǎn),，它們的膠原性質(zhì)存在明顯的差異。湖北大豆膠原蛋白肽

    在水產(chǎn)動(dòng)物體內(nèi)膠原蛋白含量高于陸生動(dòng)物,，如鰱魚,、鳙魚和草魚魚皮的蛋白質(zhì)含量分別為、,，均高于各自相應(yīng)魚肉的蛋白質(zhì)含量：、,。而魚皮中的膠原含量比較高可超過(guò)其蛋白質(zhì)總量的80%,，較魚體的其它部位要高許多，有研究報(bào)道真鯛魚皮中膠原蛋白占粗蛋白的,，鰻鱺則高達(dá),。如此高的含量意味著得率也高，如小鮪鰹,；日本海鱸,；香魚；黃海鯛,；竹莢魚（均以干重計(jì)）,。但膠原蛋白的種類要少得多，已從魚類中分離鑒定出的膠原類型有：比較廣分布在真皮,、骨,、鱗、鰾,、肌肉等處的I型,、軟骨和脊索的Ⅱ型和Ⅺ型以及肌肉的V型。而魚皮和魚骨所含的Ⅰ型膠原蛋白是其主要膠原蛋白,。此外,，還發(fā)現(xiàn)ⅩⅧ型膠原，然而哺乳動(dòng)物中含量比較豐富的Ⅲ型膠原,，在水產(chǎn)動(dòng)物中尚未發(fā)現(xiàn),。其中只有Ⅰ型膠原蛋白的價(jià)格人們才可以接受；其它類型的膠原如Ⅲ,、Ⅳ,、Ⅴ等只在研究中制備,，由于價(jià)格昂貴都不宜于大量生產(chǎn)。 山東骨膠原蛋白口服液膠原蛋白就好比一鍋才煮了一會(huì)兒的奶白色雞湯,。

    隨著各類香腸制品在肉制品中所占的比例越來(lái)越大,，天然的腸衣制品嚴(yán)重缺乏。研究人員正致力于替代品的開(kāi)發(fā),，以膠原蛋白質(zhì)為主要的膠原腸衣本身是營(yíng)養(yǎng)豐富的高蛋白物質(zhì),，在熱處理過(guò)程中隨著水分和油脂的蒸發(fā)與溶化，膠原幾乎與肉食品的收縮率一致,，而其他的可食用包裝材料還沒(méi)有被發(fā)現(xiàn)具有這種品質(zhì),。另外，膠原蛋白本身具有固定化酶的功能,，具有抗氧化性,，可以改善食品的風(fēng)味和質(zhì)量。產(chǎn)品應(yīng)力與膠原蛋白含量的多少成正比,，而應(yīng)變則成反比,。膠原蛋白是人體骨骼，尤其是軟骨組織中的重要組成成分,。膠原蛋白就像骨骼中的一張充滿小洞的網(wǎng),，它會(huì)牢牢地留住就要流失的鈣質(zhì)。沒(méi)有這張充滿小洞的網(wǎng),，即便是補(bǔ)充了過(guò)量的鈣,，也會(huì)白白地流失掉。而膠原蛋白的特征氨基酸羥基脯氨酸是血漿中運(yùn)輸鈣到骨細(xì)胞的工具,。骨細(xì)胞中的骨膠原是羥基磷灰石的黏合劑,，它與羥基磷灰石共同構(gòu)成了骨骼的主體。而骨質(zhì)疏松的實(shí)質(zhì)是合成骨膠原的速度跟不上需要,，換言之,，新的骨膠原的生成速度低于老的骨膠原發(fā)生變異或老化速度。研究表明,，如果缺少膠原蛋白，補(bǔ)充再多的鈣質(zhì)也無(wú)法防止骨質(zhì)疏松,，因此,，只有攝入足夠的可與鈣結(jié)合的膠原蛋白，才能使鈣在體內(nèi)被較快消化吸收,，且能較快的達(dá)到骨骼部位而沉積,。

    相對(duì)于較大分子膠原蛋白而言，膠原三肽更能有效的服務(wù)于人類的健康與美麗,。膠原三肽主要具有以下功能：滋養(yǎng)：膠原三肽對(duì)皮膚的滲透性較膠原蛋白更強(qiáng),，它可透過(guò)角質(zhì)層與皮膚上皮細(xì)胞結(jié)合,，參與和改善皮膚細(xì)胞的代謝，使皮膚中的膠原蛋白活性加強(qiáng),，保持角質(zhì)層水分及纖維結(jié)構(gòu)的完整性,，改善皮膚細(xì)胞生存環(huán)境和促進(jìn)皮膚組織的新陳代謝，增強(qiáng)血液循環(huán),，達(dá)到滋潤(rùn)皮膚的目的,。亮膚：皮膚的光澤取決于含水量，膠原三肽良好的保水能力使皮膚水潤(rùn)亮澤,，散發(fā)健康的光彩,。緊膚：當(dāng)膠原三肽被皮膚吸收后，填充在皮膚真皮之間,，增加皮膚緊密度,，產(chǎn)生皮膚張力，縮小毛孔,，使皮膚緊繃而富有彈性,！防皺：真皮中含有豐滿的膠原蛋白層，而補(bǔ)充膠原三肽,，能更有效的將皮膚細(xì)胞撐起,，結(jié)合保濕和抑制皺紋的作用，共同達(dá)到舒展粗紋,，淡化細(xì)紋的功效,！ 在這些酶的較適作用溫度下提取可能會(huì)破壞膠原蛋白的某些功能特性和生物活性。

    堿法提取即利用一定濃度的堿在一定的外界條件下提取膠原蛋白,，堿處理法中常用的處理劑為石灰,、氫氧化鈉、碳酸鈉等,，用氫氧化鈉浸提時(shí)效果較好,。一般的是把樣品勻漿后，用堿溶液多次溶脹后,，再離心提取,。但由于易引起蛋白質(zhì)變性，如膠原肽鍵水解,，含羥基,、疏基的氨基酸全部被破壞；所得產(chǎn)物等電點(diǎn)pH值較低,，天冬酞胺和谷氨酞胺分別轉(zhuǎn)變?yōu)樘於彼岷凸劝彼?，得到的水解產(chǎn)物分子量較在酸性溶液中比低等問(wèn)題，若比較嚴(yán)重的話,，還會(huì)產(chǎn)生D,、L-型氨基酸消旋混合物,，若D型氨基酸含量高過(guò)L型氨基酸，則會(huì)抑制L-型氨基酸的吸收,，有些D型氨基酸有毒,，甚至有致ai、致畸和致突變的作用,。而且堿法提取的含量較低,，用氫氧化鈉從魷魚皮中提取堿溶性膠原蛋白，其得率只有3%（以濕基計(jì)）,。所以,，若想提取結(jié)構(gòu)完整、使用安全的膠原蛋白,，很少采用此方法,。有關(guān)單獨(dú)采用堿法提取膠原蛋白的報(bào)道不多，一般是堿法提取和酸法提法結(jié)合使用,。比如在4℃條件下,，魚骨用，再用,，用10%的異丙醇溶液去除脂肪,，，現(xiàn)在得到無(wú)色無(wú)味的膠原蛋白,，提取率為,。 膠原的熱穩(wěn)定性是指測(cè)定其在水系中纖維的熱收縮溫度。廣東海鯛魚膠原蛋白肽口服液

真皮中含有豐滿的膠原蛋白層,，而補(bǔ)充膠原三肽,，能更有效的將皮膚細(xì)胞撐起。湖北大豆膠原蛋白肽

    膠原蛋白的熱變性溫度可以通過(guò)測(cè)定膠原蛋白溶液增比黏度的變化來(lái)確定,。其方法是將膠原蛋白樣品溶于一定量的緩沖溶液中,，并配制成一定濃度的溶液，然后用烏式黏度計(jì)測(cè)量溶液在一定溫度區(qū)間內(nèi)保持一定時(shí)間后的增比黏度,，以增比黏度對(duì)溫度作圖,，當(dāng)增比黏度變化50%時(shí)所對(duì)應(yīng)的溫度即為熱變性溫度。熱變性溫度還可通過(guò)拉曼光譜和差示掃描量熱法等進(jìn)行測(cè)定,。有人測(cè)得鱸魚,、鯽魚和鳙魚魚皮膠原蛋白的熱變性溫度分別為25、27和30℃,，它們的棲息水溫分別為26～27、29和32℃,，亞氨基酸含量分別為,、,，與3種魚皮膠原的熱變性溫度相吻合Ⅱ型膠原和Ⅺ型膠原Ⅱ型膠原由三條α1肽鏈組成，即[α1(Ⅱ)]3,，富含羥賴氨酸,，并且糖化率高，含糖量可達(dá)4%,，是軟骨中的主要膠原,。另外，即使同一生物,，皮和骨膠原蛋白的熱變形溫度也可能不一,，像來(lái)自日本海鱸、鮐魚,、大頭鯊和眼斑鲀的皮膠原蛋白的變性溫度為℃,，而骨膠原蛋白的變性溫度則為℃。附帶結(jié)論是骨膠原蛋白的變性溫度范圍整體上比皮膠原蛋白的變性溫度范圍要高,。而且骨膠原蛋白和皮膠原蛋白在不同pH時(shí)的溶解度不同,。這表明皮和骨膠原蛋白的分子特性和構(gòu)型存在差異。 湖北大豆膠原蛋白肽

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