可運用熒光素酶報告系統(tǒng)分析其相對活性,。c.驗證特定轉錄因子同其調(diào)控序列的作用,，將該序列（通常為啟動子區(qū)域）插入報告基因載體,，同時在實驗細胞***轉過表達該轉錄因子，可分析轉錄因子過表達是否提高熒光素酶活性,。d.可以分析信號通路是否***,，將該信號通路的下游響應原件序列構建入報告基因載體，在不同上游信號條件下,，熒光素酶活性**了通路的下游響應,。例如在GPCR研究中，將cAMPresponseelement（CRE）載入報告基因載體,，構建穩(wěn)定表達細胞株后,，可以用于分析GPRC的***與6b7a976f-99ae-4c48-8159-4bd篩選。又如,，將HIF1α的響應原件hypoxia-responsiveelement(HRE)插入luciferase報告載體構建穩(wěn)轉細胞株,，可以用于低氧相關通路的研究。e.驗證microRNA的靶序列,，將待測的3’UTR序列插入報告基因載體,，再共轉入該microRNA，如果熒光素酶活性下降,，則提示為其靶序列,。Q：在[信諾金達]做熒光素酶報告基因檢測，需要提供什么,？實驗結果包括哪些,？您需要提供：1.基因序列或模板，需提供詳細的轉錄因子,、目的基因或microRNA信息,；2.實驗細胞，[信諾金達]默認為使用293T細胞,，實驗結束后,，[信諾金達]會為您提供實驗流程及完整報告一份，包括實驗原始數(shù)據(jù),、圖片,、分析結果等。D-熒光素鉀鹽短期保存條件是4℃干燥避光,。熒光增白劑 33
可以以方便的96孔和384孔微量滴定板形式進行半衰期為一小時的“輝光型”信號在大量檢測板之間提供一致的信號與標準細胞生長培養(yǎng)基兼容海腎熒光素酶海腎螢光素酶是一種從海桑（Renillareniformis）分離的36kDa蛋白,。與螢火蟲熒光素酶相比，海腎熒光素酶的底物和輔因子要求不同,。海腎熒光素酶在氧氣存在下使用腔腸素,，產(chǎn)生480nm的藍光。與螢火蟲螢光素酶類似，海腎螢光素酶因其底物要求和光輸出方面的差異而可用于雙重報告檢測,。Amplite?海腎熒光素酶報告基因測定Amplite?Renilla螢光素酶報告基因檢測試劑盒（#AAT-12535）提供了一種快速,，靈敏的方法，可以使用專有的發(fā)光配方在基于細胞的檢測中檢海腎螢光素酶的活性,，與海腎螢光素酶相互作用后,，該試劑產(chǎn)生具有強光的產(chǎn)物。Amplite?海腎熒光素酶報告基因檢測試劑盒特點：該測定法與標準細胞生長培養(yǎng)基兼容該試劑盒可以測量野生型和合成hRluc基因的原始表達或基因表達每個試劑盒均包含可以方便96孔和384孔板檢測所必不可少的組分各類螢光素酶底物,，輔因子和物理特性：近幾十年來,，腺苷三磷酸(ATP)生物發(fā)光技術得到了很大的發(fā)展，已經(jīng)在細胞增殖,、細胞毒性和生物量計數(shù)等方面廣泛應用,。熒光原位雜交 免疫熒光D-熒光素鉀鹽的合作平臺有哪些？
隨后30年里,，Promega不斷在螢光素酶實驗工具領域推陳出新,，保持技術帶跑的人的地位。這里提到的螢光素酶即熒光素酶,。1991螢光素酶檢測系統(tǒng)（LAR）Promega公司推出的7b0a8f9c-3a4b-41a1-a7f8-3螢光素酶檢測試劑LuciferaseAssaySystem（LAR）,，為靈敏、非放射性的報告基因檢測拉開了序幕,。LAR與螢火蟲螢光素酶（luc）報告基因一起,，為研究人員開始了解基因表達調(diào)控因子提供了首要的工具。1995Dual-Luciferase?報告基因檢測系統(tǒng)（DLR）DLR是7b0a8f9c-3a4b-41a1-a7f8-3允許在單個樣本中依次檢測兩個報告基因的試劑,。通過允許螢光素酶活性的內(nèi)部歸一化,，在提高報告基因檢測的可靠性方面取得了關鍵進展。此外,，pGL3報告基因載體系列具有改良后的螢火蟲螢光素酶基因,，luc+。這個改造一種報告基因以實現(xiàn)性能改進的例子后來被進一步應用到pGL4和luc2報告基因上,，通過生物信息學和合成方法,，實現(xiàn)了更大的改進。[1]1999ENLITEN?/UltraGlo?重組螢光素酶Promega公司在早期推出的一種重組螢火蟲螢光素酶（Enliten）基礎上,，改造出了一種稱為UltraGlo?的熱穩(wěn)定性螢光素酶,。UltraGlo?的開發(fā)是在各種檢測和儲藏條件下進行一步法“加樣-讀數(shù)”檢測的關鍵。此后,。
每孔加入100μl養(yǎng)24h后,，Luciferin使其終濃度為150μg/ml，PBS,，再加入D-立即用活題成像系統(tǒng)檢測,，分析發(fā)光強度與細胞數(shù)之間的相關性,。4)細胞生長曲線繪制MCF7-luc細胞和作為對照取表達熒光素酶的MCF-7細胞，接種于24孔板,，接種密度為2×104/孔,。細胞接種后1～7d,，每天胰蛋白酶消化其中3孔細胞,，用細胞計數(shù)儀測定細胞數(shù)。以細胞生長天數(shù)為橫坐標,，細胞數(shù)目為縱坐標,，分別繪制兩種細胞生長曲線。二．動物模型BLAB/c裸鼠皮下移植瘤模型的建立BLAB/cnu/nu裸鼠,，4～5周齡,，體重（15±2）g，雌雄各3只,。取對數(shù)生長期的MCF-7用PBS重懸為2．5×10/ml懸液,，每只裸鼠左右背側近腋部皮下接種100μl，共接種6只,。接種后第5d采用德國BERTHOLD公司的活題成像系統(tǒng)檢測信號強度,。以后每5d觀測一連續(xù)觀測30d。觀測前每只裸鼠戊巴比妥鈉麻醉（計量為：35mg/kg體重）,，按150mg/kg體重的量腹腔注射luciferin（invivograde）,，10min后，進行活題成像觀察皮下腫大的瘤的生長情況,，定量分析各時間點的熒光值,。繪制腫大的瘤皮下生長曲線.MCF-7-luc細胞裸鼠皮下移植瘤的病理形態(tài)學觀察MCF-7-luc細胞裸鼠皮下接種后25d，脫頸處死小鼠,，取腫大的瘤組織,，制成石蠟切片，切片厚度為3μm,。做D-熒光素鉀鹽的哪家便宜,。
后者能夠易溶于水或緩沖液中，使用方便,，溶劑無毒性,，特別適合體內(nèi)實驗。配成溶液后的這三種產(chǎn)品,，在絕大多數(shù)的應用上都沒有實質(zhì)性的差別,。產(chǎn)品性質(zhì)運輸和保存運輸條件：4℃冰袋運輸；短期保存：4℃干燥避光長期保存：-20℃干燥避光母液保存：-20℃避光有效期長期保存：有效期一年工作液：先用現(xiàn)配使用方法1.體外生物發(fā)光檢測1）用無菌蒸餾水溶解D-熒光素鉀鹽,，配制成30mg/mL的儲存液(100-200×),，混勻,。立即使用，或分裝于-20℃避光保存,，避免反復凍融,。2）用預熱好的組織培養(yǎng)基將儲存液稀釋至mg/mL的工作液濃度。3）去除細胞培養(yǎng)基,。4）待圖像分析前,，向細胞內(nèi)添加熒光素工作液，37℃孵育5-10min,，然后進行圖像分析,。2.***成像分析1）用無菌的DPBS(w/oMg2+、Ca2+)配制15mg/mL的熒光素的儲存液,，混勻,。2）用μm濾膜過濾除菌。立即使用,，或分裝于-20℃避光保存,，避免反復凍融。3）腹腔注射（.）,，按照150mg/kg的熒光素/體重濃度進行注射,，以小鼠為例，每只小鼠體重假定20g,，每只小鼠用量3mg,；4）注射入體內(nèi)10-15min（待光信號達到更強穩(wěn)定平臺期）后進行成像分析。注：建議對每只動物模型都需要建立熒光素酶動力學曲線,，從而確定更高信號檢測時間和信號平臺期,。 D-熒光素鉀鹽的發(fā)射波長是多少？熒光增白劑ob-1價格
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包括熒光素酶和ATP水平分析,；報告基因分析；高通量測序和各種污染檢測,。目前有三種產(chǎn)品形式：D-熒光素（游離酸）,，D-熒光素鹽（鈉鹽和鉀鹽）。主要差別在于溶解特性：前者的水溶性以及緩沖體系的溶解性都較弱,，除非溶于弱堿如低濃度NaOH和KOH溶液,。可溶于甲醇和DMSO,；后者能夠易溶于水或緩沖液中,，使用方便，溶劑無毒性,，特別適合體內(nèi)實驗,。配成溶液后的這三種產(chǎn)品,，在絕大多數(shù)的應用上都沒有實質(zhì)性的差別。產(chǎn)品性質(zhì)運輸和保存運輸條件：4℃冰袋運輸,；短期保存：4℃干燥避光長期保存：-20℃干燥避光母液保存：-20℃避光有效期長期保存：有效期一年工作液：先用現(xiàn)配使用方法1.體外生物發(fā)光檢測1）用無菌蒸餾水溶解D-熒光素鉀鹽,，配制成30mg/mL的儲存液(100-200×)，混勻,。立即使用,，或分裝于-20℃避光保存，避免反復凍融,。2）用預熱好的組織培養(yǎng)基將儲存液稀釋至mg/mL的工作液濃度,。3）去除細胞培養(yǎng)基,。4）待圖像分析前,，向細胞內(nèi)添加熒光素工作液，37℃孵育5-10min,，然后進行圖像分析,。2.活題成像分析1）用無菌的DPBS(w/oMg2+、Ca2+)配制15mg/mL的熒光素的儲存液,，混勻,。2）用μm濾膜過濾除菌。立即使用,，或分裝于-20℃避光保存,，避免反復凍融。3）腹腔注射（.）,。熒光增白劑 33
南京翌科生物科技有限公司致力于商務服務,，是一家其他型的公司。公司業(yè)務分為外泌體提取,，非編碼RNA試劑,，檢測試劑，轉染試劑等,，目前不斷進行創(chuàng)新和服務改進,，為客戶提供良好的產(chǎn)品和服務。公司將不斷增強企業(yè)重點競爭力,，努力學習行業(yè)知識,，遵守行業(yè)規(guī)范，植根于商務服務行業(yè)的發(fā)展,。在社會各界的鼎力支持下,，持續(xù)創(chuàng)新，不斷鑄造***服務體驗,，為客戶成功提供堅實有力的支持,。