luciferyladenylate)+PPi螢光素化腺苷酸+O2→氧熒光素+AMP+光這一反應(yīng)非常節(jié)省能量,幾乎所有輸入反應(yīng)的能量都被轉(zhuǎn)化為光,。與之形成鮮明對(duì)比的是人類使用的白熾燈,,只有越10%的能量被轉(zhuǎn)化為光,剩余的能量都變?yōu)闊崮芏焕速M(fèi),。分析熒光素或熒光素酶不是特定的分子,,而是對(duì)于所有能夠產(chǎn)生熒光的底物和其對(duì)應(yīng)的酶的統(tǒng)稱,雖然它們各不相同,。不同的能夠控制發(fā)光的生物體用不同的熒光素酶來(lái)催化不同的發(fā)光反應(yīng)。更為人所知的發(fā)光生物是螢火蟲(chóng),,而其所采用不同的熒光素酶與其他發(fā)光生物如熒光菇(發(fā)光類臍菇,,Omphalotusoleariu')或許多海洋生物都不相同。在螢火蟲(chóng)中,,發(fā)光反應(yīng)所需的氧氣是從被稱為腹部氣管(abdominaltrachea)的管道中輸入,。一些生物,如叩頭蟲(chóng),,含有多種不同的熒光素酶,,能夠催化同一熒光素底物,而發(fā)出不同顏色的熒光,。螢火蟲(chóng)有2000多種,,而叩甲總科(包括螢火蟲(chóng)、叩頭蟲(chóng)和相關(guān)昆蟲(chóng))則有更多,,因此它們的熒光素酶對(duì)于分子系統(tǒng)學(xué)研究很有用,。目前研究得更透徹的熒光素酶是來(lái)自Photinini族螢火蟲(chóng)中的北美螢火蟲(chóng)(Photinuspyrali')。應(yīng)用熒光素酶可以在實(shí)驗(yàn)室中用基因工程的方法生成,,并被用于多種不同的實(shí)驗(yàn),。D-熒光素鉀鹽母液保存條件是-20℃避光。揚(yáng)州游離酸D-熒光素鉀鹽使用說(shuō)明
普遍應(yīng)用于整個(gè)生物技術(shù)領(lǐng)域,,尤其是體內(nèi)活ti成像技術(shù),。其作用機(jī)制是在ATP和熒光素酶的作用下,熒光素(底物)能夠被氧化發(fā)光,。當(dāng)熒光素過(guò)量時(shí),,產(chǎn)生的光量子數(shù)與熒光素酶的濃度呈正相關(guān)性。螢光素酶(英文名稱:Luciferase)是自然界中能夠產(chǎn)生生物熒光的酶的統(tǒng)稱,其中更有代表性的是一種學(xué)名為Photinuspyrali'的螢火蟲(chóng)體內(nèi)的螢光素酶,,螢火蟲(chóng)發(fā)光的腹部或海洋的藍(lán)色發(fā)光波浪將大自然中生物發(fā)光奇跡呈現(xiàn)于世,。在生物化學(xué)和分子生物學(xué)的早期,這一現(xiàn)象被認(rèn)為是發(fā)展生物分析的有力平臺(tái),。1991年,,Promega發(fā)布了di一代螢光素酶分析產(chǎn)品,并啟動(dòng)了基于螢光素酶的進(jìn)一步創(chuàng)新計(jì)劃,,通過(guò)持續(xù)致力于研究和創(chuàng)新生物發(fā)光系統(tǒng)建立了各種不同的分析技術(shù)Promega螢光素酶技術(shù)發(fā)光史里程碑AGlo-ingHistoryofInnovationandDiscovery1990年12月,,Promega初次提出螢火蟲(chóng)螢光素酶(Luc)作為一種新興報(bào)告基因技術(shù)的應(yīng)用可能性。當(dāng)時(shí)的人們認(rèn)為,,螢火蟲(chóng)螢光素酶具備的生物發(fā)光特性,、極高的靈敏度和快速簡(jiǎn)單的檢測(cè)流程等特點(diǎn),可能會(huì)對(duì)分子生物學(xué)家的研究產(chǎn)生重要的影響,。幾個(gè)月后,,di一代螢火蟲(chóng)螢光素酶報(bào)告基因載體和檢測(cè)試劑在Promega誕生,使這項(xiàng)新技術(shù)正式并更范圍廣地為全球研究人員服務(wù),。上海熒光素酶D-熒光素鉀鹽哪家好D-熒光素鉀鹽一般都是使用什么技術(shù),。
Q:熒光素酶作為報(bào)告基因相比于熒光蛋白有哪些優(yōu)勢(shì)?Luciferase的靈敏度相比于GFP提高10-100倍以上,,同時(shí)具有更寬的動(dòng)態(tài)范圍,,便于數(shù)值分析比較,不需要熒光顯微鏡,,而且在***實(shí)驗(yàn)中其熒光穿透性高于EGFP等熒光蛋白,,同時(shí)由于沒(méi)有內(nèi)源活性、其本底信號(hào)很低,。而GFP等熒光蛋白相比于熒光素酶的優(yōu)勢(shì)在于可以進(jìn)行失蹤定位,,并且其觀測(cè)不需裂解細(xì)胞,方便進(jìn)行適時(shí)觀察,。Q:海腎熒光素酶和螢火蟲(chóng)熒光素酶相比,,相對(duì)活性如何?在氧,、鎂和ATP的存在下,,螢火蟲(chóng)熒光素酶作用于甲蟲(chóng)熒光素,而來(lái)源于海洋腔腸(Renillareniformis)的熒光素酶在氧的存在下作用于海腎熒光素,。雙報(bào)告基因技術(shù)(Dual-reporterassays),結(jié)合了螢火蟲(chóng)熒光素酶測(cè)試和海腎熒光素酶測(cè)試,。Q:雙熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)轉(zhuǎn)染效率很低而且復(fù)孔重復(fù)不出來(lái)是什么原因?轉(zhuǎn)染效率低的話可以從三個(gè)方面改善,,首先要確保細(xì)胞狀態(tài)是好的,,通常我們選出處于分裂期的細(xì)胞,另外陽(yáng)性對(duì)照您可以選擇過(guò)表達(dá)的熒光蛋白質(zhì)粒,還有就是DNA的質(zhì)量尤為重要,,更好是先酶切驗(yàn)證,。這個(gè)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果很靈敏,有一定差異是正常的,,通常只要確保它在一個(gè)數(shù)量級(jí)之內(nèi)即可,。如果差異超出這個(gè)范圍可以從兩方面改善,一是記住保持樣本的均一性,。
我們將與LgBiT具有極強(qiáng)親和作用的,。HiBiT作為一種易于檢測(cè)且具有高靈敏度的蛋白質(zhì)標(biāo)簽,具有多種功能,,例如當(dāng)與基于CRIPSR的標(biāo)簽一起使用時(shí),,可以創(chuàng)建內(nèi)源性報(bào)告基因模型。[1]2020Lumit?技術(shù)隨著NanoBiT?技術(shù)的發(fā)展,,人們認(rèn)識(shí)到可以利用該系統(tǒng)通過(guò)結(jié)合免疫測(cè)定的組分檢測(cè)多種分析物,。由此產(chǎn)生的平臺(tái)(現(xiàn)稱為“Lumit”)提供了具有高靈敏度的簡(jiǎn)化免疫檢測(cè)法。螢光素酶(英語(yǔ):Luciferase)是自然界中能夠產(chǎn)生生物發(fā)光的酶的統(tǒng)稱,,其中**有代表性的是一種學(xué)名為Photinuspyralis的螢火蟲(chóng)體內(nèi)的螢光素酶,。在相應(yīng)化學(xué)反應(yīng)中,熒光的產(chǎn)生是來(lái)自于螢光素的氧化,,有些情況下反應(yīng)體系中也包括三磷酸腺苷(ATP)。沒(méi)有螢光素酶的情況下,,螢光素與氧氣反應(yīng)的速率非常慢,,而鈣離子的存在常常可以進(jìn)一步加速反應(yīng)(與肌肉收縮的情況相似),。螢光生成反應(yīng)通常分為以下兩步:螢光素+ATP→螢光素化腺苷酸(luciferyladenylate)+PPi螢光素化腺苷酸+O2→氧螢光素+AMP+光這一反應(yīng)非常節(jié)省能量,,幾乎所有輸入反應(yīng)的能量都被轉(zhuǎn)化為光。與之形成鮮明對(duì)比的是人類使用的白熾燈,,只有約10%的能量被轉(zhuǎn)化為光,,剩余的能量都變?yōu)闊崮芏焕速M(fèi)。螢光素或螢光素酶不是特定的分子,。南京翌科生物科技有限公司D-熒光素鉀鹽測(cè)試價(jià)格,。
請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。8)本產(chǎn)品只作科研用途,!D-熒光素鉀鹽是熒光素酶的水溶性底物,,存在于多種發(fā)光生物體中。在ATP和熒光素酶的催化作用下,,D-熒光素鉀被氧化,,產(chǎn)生藍(lán)綠色的光(560nm),當(dāng)?shù)孜镞^(guò)量時(shí),產(chǎn)生的Chemicalbook光量子數(shù)與熒光素酶的濃度呈正相關(guān),。編碼熒光素酶的Luc基因是植物,、哺乳動(dòng)物細(xì)胞的常用報(bào)告基因。由于沒(méi)有背景干擾,,因此可以很容易地檢測(cè)出低至,。用途D-熒光素鉀鹽是一類在生物體中發(fā)現(xiàn)的能引起生物發(fā)光的雜環(huán)化合物,如螢火蟲(chóng),。在ATP存在下,,螢光素酶將其氧化脫羧后會(huì)發(fā)光?;瘜W(xué)研究中可用于熒光素酶的基板,。生物活性D-Luciferin是螢火蟲(chóng)熒光素酶的底物。體外研究D-luciferinisthenaturalsubstrateoftheenzymeluciferase(Luc),μM.體內(nèi)研究Bioluminescenceimaging(BLI)usingthefireflyluciferase(Fluc)(5,10,15,and20min)μLofD-luciferin(intraperitoneallyorintravenously)stocksolutionpergramofbodyweight:normally~200μLfora20gmouseforastandard150mg/(eitherPotassiumorSodiumSalt)atroomtemperatureanddissolveindPBS,。D-熒光素鉀鹽測(cè)試需要滿足哪些條件,?無(wú)錫熒光素D-熒光素鉀鹽公司
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產(chǎn)品描述D-熒光素(D-Luciferin)是熒光素酶(Luciferase)的常用底物,,普遍應(yīng)用于整個(gè)生物技術(shù)領(lǐng)域,,特別是體內(nèi)***成像技術(shù)。其作用機(jī)制是在ATP和熒光素酶的作用下,,熒光素底物能夠被氧化發(fā)光,。當(dāng)熒光素過(guò)量時(shí),產(chǎn)生的光量子數(shù)與熒光素酶的濃度呈正相關(guān)性(見(jiàn)下圖),。將攜帶熒光素酶編碼基因(Luc)的慢病毒轉(zhuǎn)染入細(xì)胞后構(gòu)建穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞株,,構(gòu)建原位**模型,之后注入熒光素底物,,通過(guò)IVIS系統(tǒng)來(lái)檢測(cè)光強(qiáng)度變化,,從而實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)疾病發(fā)展?fàn)顟B(tài)或進(jìn)行藥物藥效評(píng)價(jià)等。也可以利用ATP對(duì)此反應(yīng)體系的影響,,根據(jù)生物發(fā)光強(qiáng)度的變化來(lái)指示能量或生命體征,。注:在抗**藥物藥效評(píng)價(jià)試驗(yàn)中,由于生物自發(fā)光檢測(cè)需要根據(jù)熒光素表達(dá)標(biāo)定**大小,,受**生長(zhǎng)所發(fā)生的**內(nèi)部壞死影響,,生物自發(fā)光并不能很***的評(píng)價(jià)**生長(zhǎng),在抗**藥效評(píng)價(jià)有較高要求的實(shí)驗(yàn)中,,建議使用小動(dòng)物核磁成像系統(tǒng)檢測(cè)**生長(zhǎng),。D-熒光素也常用于體外研究,包括熒光素酶和ATP水平分析,;報(bào)告基因分析,;高通量測(cè)序和各種污染檢測(cè),。目前有三種產(chǎn)品形式:D-熒光素(游離酸),D-熒光素鹽(鈉鹽和鉀鹽),。主要差別在于溶解特性:前者的水溶性以及緩沖體系的溶解性都較弱,,除非溶于弱堿如低濃度NaOH和KOH溶液??扇苡诩状己虳MSO,。 揚(yáng)州游離酸D-熒光素鉀鹽使用說(shuō)明
南京翌科生物科技有限公司致力于商務(wù)服務(wù),以科技創(chuàng)新實(shí)現(xiàn)***管理的追求,。翌科生物擁有一支經(jīng)驗(yàn)豐富,、技術(shù)創(chuàng)新的專業(yè)研發(fā)團(tuán)隊(duì),以高度的專注和執(zhí)著為客戶提供外泌體提取,,非編碼RNA試劑,,檢測(cè)試劑,轉(zhuǎn)染試劑,。翌科生物繼續(xù)堅(jiān)定不移地走高質(zhì)量發(fā)展道路,,既要實(shí)現(xiàn)基本面穩(wěn)定增長(zhǎng),又要聚焦關(guān)鍵領(lǐng)域,,實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)型再突破,。翌科生物創(chuàng)始人金芳芳,始終關(guān)注客戶,,創(chuàng)新科技,,竭誠(chéng)為客戶提供良好的服務(wù)。