我們通常會以1/3到1/6甚至更低的區(qū)間來選擇超濾管的孔徑,,通常更小的孔徑會使回收率提高但是超濾的時(shí)間也會比較長。一定范圍內(nèi),,超濾的回收率和速度是一對矛盾體,因此可以通過優(yōu)化孔徑的選擇,在回收率可以接受的條件下選擇較大的孔徑,來提高超濾的速度。低溫如< 10 ℃,,液體的粘度會增加,流動性會降低,,因此液體的跨膜速率也會降低,。適當(dāng)提高超濾溫度,往往能夠提高超濾的速度,。有些客戶需要做幾十ml到幾百ml樣品的濃縮或者緩沖液置換,,但是卻使用1支或幾支15ml的超濾管反復(fù)離心來完成操作,這樣必然造成時(shí)間上的浪費(fèi),。怎么辦,?一定要挑選適合處理量的產(chǎn)品,減少不必要的反復(fù)離心從而提升超濾的效率,。超濾離心管還可用于檢測藥品樣品中的殘留物和污染物,,并進(jìn)行質(zhì)量監(jiān)測和控制。鄭州濃縮超濾離心管使用方法
超濾離心管應(yīng)用:1,、組成部分:該裝置包括一個(gè)蓋子,、一個(gè)過濾器和一個(gè)50ML的離心管。2,、帶有擺桶式或定角式轉(zhuǎn)子的離心器以及可以容納50mL試管的樣本腔/試管座,。①注意:為了避免在離心過程中損壞裝置,在旋轉(zhuǎn)前請檢查間隙,。 3、帶有200微升(μL)的移液管,,用于濃縮液回收適用性,。①注意:該產(chǎn)品未經(jīng)消毒,只供一次使用,,保質(zhì)期3年,。為確保對預(yù)定用途的適用性,,建議進(jìn)行初步的回收和截留試驗(yàn),。4、濃縮含有抗原,、抗體,、酶、核酸(單株或雙株DNA/RNA樣本),、微生物,、洗出液和凈化樣本的生物樣本,。5、凈化組織培養(yǎng)基提取液和細(xì)胞溶解液中的大分子成分,,從反應(yīng)混合液中去除引物,、連接或分子標(biāo)記,在HPLC之前去除蛋白質(zhì),。鄭州濃縮超濾離心管使用方法使用超濾離心管時(shí)應(yīng)注意避免過度旋轉(zhuǎn)造成機(jī)械損傷或故障,,并及時(shí)維護(hù)保養(yǎng)設(shè)備。
超濾離心管,,備有四種材質(zhì)的超濾膜:聚醚砜,、三醋酸纖維素、再生纖維素和Hydrosart,,可根據(jù)不同要求靈活選用,;兩種回收濃縮液的方法:既可用吸管直接吸取并回收,又可將離心管放入離心機(jī)反甩,,將濃縮液甩入回收帽中,,加蓋保存。這兩種方法都可使?jié)饪s液達(dá)到近乎完全回收,;截留分子量普遍,,配有3K、5K,、10k,、30K、50K,、100K,、300K、1000K,、0.2μl的聚醚砜膜,;較新推出ZL產(chǎn)品Hydrosart膜2K型,具有極低的蛋白吸附特性,,高流速,、高通量,是免疫球蛋白濃縮和脫鹽的理想用膜,。
超濾離心管的分子量選擇:按照樣品量和目標(biāo)分子量選擇適當(dāng)?shù)某瑸V離心管,,為了得到較高的收率,所選濾膜的截留分子量MWCO建議選擇所需截留分子大小的1/3左右,,不超過目標(biāo)分子量的一半,。因?yàn)槌瑸V膜上孔徑是平均孔徑,膜上的孔并非均勻,,離心高壓下也可能滲漏,,因此截留孔徑越小,,流速越慢但截留比例更大。如果樣本濃度低體積大,,可選擇較小容積的超濾管多次重復(fù)加樣離心,。如果同時(shí)需要脫鹽和去除可溶小分子雜質(zhì),可將待濃縮樣品稀釋到超濾管較大容積再離心,,重復(fù)2次可除去99%鹽,。避免過長時(shí)間或者過速離心,雖然優(yōu)良品質(zhì)的產(chǎn)品都有防死端設(shè)計(jì),,可避免過度離心造成膜表面干而造成不可逆吸附,。避免過度濃縮,體積越小,,越容易因表面吸附而損失得率,。離心后用Tips輕輕吹吸幾次濾膜截留的溶液,必要時(shí)補(bǔ)加一定體積的緩沖液沖洗膜表面,,有助于減少膜表面吸附,,能提高回收率。盡量避免Tips接觸膜表面,。超濾離心管可以通過配合其他實(shí)驗(yàn)室設(shè)備使用,,如高速冷凍機(jī)、凝膠電泳儀等來達(dá)到更好的效果,。
超濾離心管使用注意事項(xiàng):(1)選擇合適的超濾管,。通常應(yīng)截留分子量不應(yīng)大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量為35kDa,,就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管,。若目的蛋白分子量為10kD左右,則可以用截留分子量3kD的超濾管,。認(rèn)真閱讀使用說明書,,注意超濾膜對各種化學(xué)物質(zhì)的耐受程度有所不同。2)新買來的超濾是干燥的,,使用前加入超純水,水量完全過膜,,冰浴或冰箱里預(yù)冷幾分鐘,。然后將水倒出,即可加入蛋白液,,加入的多少,,以不超過管頂?shù)陌拙€為準(zhǔn)。操作要輕,,加入蛋白液前,,超濾管需要插在冰上預(yù)冷,。(3)平衡。質(zhì)量和重心二者都要達(dá)到平衡,。注意轉(zhuǎn)速和加速度不可太快,,否則直接損壞超濾膜。開始離心超濾(離心機(jī)預(yù)冷至4度),。不同離心機(jī)的轉(zhuǎn)速 rpm換算成g之后,,有所不同。離心機(jī)的加速度調(diào)至較低檔,,減小對膜的壓力,。注意,一定要等離心機(jī)達(dá)到目的轉(zhuǎn)速之后,,方可離開離心機(jī),,否則離心機(jī)出問題時(shí),無法一時(shí)間處理,。膜與轉(zhuǎn)軸的方向根據(jù)說明書調(diào)整(角轉(zhuǎn)離心機(jī)的情況是膜與軸垂直),。在實(shí)際使用中,一般轉(zhuǎn)速開的比說明書里的要低,,這樣可以延長離心管的使用壽命,。超濾離心管是一種經(jīng)濟(jì)、有效且環(huán)保的分離技術(shù),,具有普遍應(yīng)用前景,。安徽小型超濾離心管生產(chǎn)公司
超濾離心管還可用于制備純度高的酶、蛋白質(zhì)等生物制品,,以滿足不同實(shí)驗(yàn)室和行業(yè)的需求,。鄭州濃縮超濾離心管使用方法
塑料離心管的優(yōu)點(diǎn)是透明或者是半透明的,它的硬度小,,可用穿刺法取出梯度,。缺點(diǎn)是易變形,抗有機(jī)溶劑腐蝕性差,,使用壽命短,。塑料離心管都有管蓋,它的作用是防止樣品外泄,,尤其是用于有放射性或強(qiáng)腐蝕性的樣品時(shí)防止樣品外泄是很重要的一點(diǎn),;管蓋還有一個(gè)作用是防止樣品揮發(fā)以及支持離心管,防止離心管變形,。在挑選這一點(diǎn)的時(shí)候還要注意檢查管蓋是否嚴(yán)密,,在試驗(yàn)時(shí)能否蓋嚴(yán),以到達(dá)倒置不漏液,;我們都知道在塑料離心管中,,常用材料有聚乙烯PE),,聚碳酸酯(PC),聚丙烯(PP)等,,其中聚丙烯PP管性能會相對較好,,所以,我們在挑選塑料離心管時(shí)盡可能的考慮聚丙烯的塑料離心管,。鄭州濃縮超濾離心管使用方法