脫鹽、更換緩沖液或滲濾是從含有生物分子的溶液中去除鹽分或溶劑的重要方法,。鹽分去除或緩沖液更換可通過超濾管來完成,,具體過程是濃縮樣本,棄去濾出液,然后向濃縮液中加入任何所需的溶劑,恢復(fù)到樣本原先的體積,。"洗出"的過程可反復(fù)進(jìn)行,,直到雜質(zhì)的濃度被充分降低。關(guān)于超濾管的常見問題與解答:Q:超濾管的膜材質(zhì)是什么?A:超濾管的膜材質(zhì)為默克密理博特有的Ultracel再生纖維素膜,,生產(chǎn)工藝嚴(yán)格,截留分子量明確而準(zhǔn),, 蛋白吸附損失小。Q:如果要用超濾的方法分離兩種蛋白,,那么這兩個(gè)蛋白的大小需要相差多少?A:按照經(jīng)驗(yàn),建議兩個(gè)蛋白的分子量要相差 一個(gè)數(shù)量級(jí)(10倍),。超濾離心管通常具有不同材質(zhì)的選擇,以適應(yīng)不同化學(xué)環(huán)境下的使用需求,。遼寧10K超濾離心管廠家
超濾離心管關(guān)于回收率的疑問?一般對(duì)濃度大于0.1mg/ml的溶質(zhì)進(jìn)行回收,,回收率在90%以上,。通常,樣品損失是由于濾膜表面和料管表面的非特異性吸附造成的,。為了獲得較高的回收率,,所選濾膜的截留率約為目標(biāo)蛋白的1/3。超濾膜是一種非對(duì)稱膜,,其孔徑呈正態(tài)分布,。在高壓離心下也可能發(fā)生泄漏,在這種情況下蛋白質(zhì)可能會(huì)發(fā)生變形,。因此,,截留孔徑越小,流速越慢,,但回收率會(huì)更高,。濃縮過程中有蛋白質(zhì)沉淀,,如何處理?如果蛋白質(zhì)濃縮過快或過多,,都可能造成蛋白質(zhì)沉淀,,濃縮后的蛋白質(zhì)之后濃度不宜過高;對(duì)于對(duì)濃縮速度敏感,、易沉淀的蛋白質(zhì),,建議改進(jìn)方法如下:1)降低離心速度,2)使用截留分子量較大的超濾膜3) 吹吸濃縮管,,然后離心,。遼寧10K超濾離心管廠家超濾離心管通常被用于生物醫(yī)學(xué)中,以研究疾病細(xì)胞,、干細(xì)胞等,。
離心管,管狀試樣容器,可帶密封蓋或壓蓋,是實(shí)驗(yàn)室里面常見的一種實(shí)驗(yàn)耗材,,主要是配合離心機(jī)使用,,即將實(shí)驗(yàn)液體裝在其中,然后放在離心機(jī)里面離心,。進(jìn)口離心管按照材料分類:塑料離心管,,玻璃離心管,鋼制離心管,,又可以分為PP,、PC、PS等,,根據(jù)不同需要,,生產(chǎn)廠家會(huì)選擇不同的塑料材料來進(jìn)行制作。根據(jù)其大小,,又分為1.5ml,、2ml、5ml,、10ml,、15ml、50ml等,,國(guó)產(chǎn)的離心管一般就是這幾個(gè)規(guī)格,,用的較多的也就是10ml和50ml的。如果您的離心機(jī)是配30ml或者其他規(guī)格的離心管時(shí),,就要考慮進(jìn)口的了,。另外,離心管還有圓底和尖底,以及螺旋蓋和插蓋之分,。螺旋蓋的離心管帶有較精細(xì)的刻度,,插蓋的只有一個(gè)總體的容量標(biāo)示。
在選擇過程中,,應(yīng)首先執(zhí)行以下步驟:1考慮樣品和分子特性:比如改變pH 可能增加構(gòu)象改變的風(fēng)險(xiǎn),,而降低溫度可能降低濃縮效率等。2,、選擇正確的膜:眾所周知,,超濾沒有太多的膜選項(xiàng),但您應(yīng)對(duì)再生纖維素和聚醚砜(PES)材料進(jìn)行測(cè)試,,以確定哪種材料可為您的特定材料提供較低的非特異性結(jié)合和較優(yōu)的回收率。3,、選擇合適的截留分子量,通常是靶標(biāo)1/3大小的截留分子量較適合,。但有時(shí)則需要更小的孔徑來滿足回收率的要求,。如果在病毒和核酸樣品,可參看下面截留分子量和病毒顆粒分子大小以及核酸大小的換算表。選擇合適的裝置:賽多利斯擁有適用于低濃度樣品,、DNA,、蛋白質(zhì),、病毒,、過濾應(yīng)用等普遍的裝置選項(xiàng),;選擇合適的裝置可以有效改善結(jié)果。超濾離心管能夠去除混合物中的雜質(zhì)和低分子量化合物,,得到高純度的目標(biāo)化合物,。
超濾離心管通常不需要預(yù)處理即可使用,,不過對(duì)于蛋白質(zhì)樣本處理,特別是較稀的蛋白質(zhì)溶液來說(<10ug/mL),用超濾膜濃縮回收率常常是不定量的,。雖然PES材料使非特異吸附較小化,,但是,某些蛋白,特別是稀的時(shí)候,會(huì)有問題。非特異結(jié)合的程度隨著個(gè)別蛋白結(jié)構(gòu)的不同而不同,。含有帶電的或者疏水結(jié)構(gòu)域的蛋白質(zhì)更易于不可逆結(jié)合到不同表面,。對(duì)超濾離心管表面做鈍化預(yù)處理可降低蛋白質(zhì)在膜表面的吸附性損失,,大多數(shù)情況下,在濃縮稀蛋白溶液之前預(yù)處理柱子可以提高回收率,,因?yàn)槿芤嚎商顫M膜和表面暴露的空白蛋白吸附位點(diǎn)。鈍化的方法是預(yù)先用較高容積的鈍化溶液預(yù)浸泡柱子1小時(shí)以上,,蒸餾水徹底沖洗柱子,,再用蒸餾水離心一次以徹底除去可能殘留在膜上的鈍化溶液。注意鈍化處理后別讓膜干了,。如果要留待以后使用,,需要加無菌蒸餾水保持膜濕潤(rùn),。超濾離心管通常具有標(biāo)準(zhǔn)化設(shè)計(jì),,使其易于與其他實(shí)驗(yàn)室設(shè)備集成使用,。遼寧再生纖維素離心管訂做
使用超濾離心管時(shí)應(yīng)注意保持樣品干燥,、無污染和清潔,。遼寧10K超濾離心管廠家
玻璃離心管玻璃離心管是由玻璃制成的,不同廠家可能使用的玻璃成分不同,,所以強(qiáng)度上可能會(huì)略有差異,。我們的普通玻璃試管可以承受的相對(duì)離心力(RCF) 通常小于3000g ,而硼硅玻璃管一般可以承受超過10000g 以上的相對(duì)離心力,。但由于玻璃離心管質(zhì)量易碎,,所以玻璃管一般不用于高速離心機(jī),用得也不多,。由于玻璃本身的特性,,它具有良好的化學(xué)穩(wěn)定性,,能與酸、堿和有機(jī)溶劑和平共存,。玻璃管外形穩(wěn)定,,能承受一定程度的擠壓,,但不能抵抗碰撞,,在 高速離心時(shí)容易破碎,,雖然能抵抗高溫,,能抵抗熱沖擊,但在溫度突然劇烈變化的環(huán)境中也很容易斷裂,。遼寧10K超濾離心管廠家