膜片鉗電生理技術(shù)的基本原理：膜片鉗技術(shù)用特制的玻璃微吸管吸附于細(xì)胞表面，使之形成10~100MΩ的高阻封接,，被孤立的小膜片面積為微米數(shù)量級,，因此封接范圍內(nèi)細(xì)胞膜只有少數(shù)離子通道。然后對該膜片實行電壓鉗位,，測量單個離子通道開放產(chǎn)生的微小電流,，這種通道的開放是一種隨機過程。通過觀測單個通道開放的電流幅值分布,、開放概率,、開放壽命分布等功能參數(shù)，并分析它們與膜電位,、離子濃度等之間的關(guān)系,。將該部分細(xì)胞采用負(fù)壓吸破，可以形成較常見的全細(xì)胞記錄模式,，可以研究整個細(xì)胞的生理功能和離子通道電生理功能,。更進(jìn)一步，還可以把吸管吸附放膜片從細(xì)胞膜上分離出來,，以膜的外側(cè)向外或膜的內(nèi)側(cè)向外等方式進(jìn)行實驗研究,。這種技術(shù)對膜內(nèi)外溶液成分及施加藥物操作都很方便。膜片鉗的數(shù)據(jù)如何處理：通過滲透很快改變胞漿成分并達(dá)到平衡,。連云港細(xì)胞生物學(xué)膜片鉗全細(xì)胞記錄方案

膜片鉗實驗難度大,、技術(shù)要求高,，要掌握有關(guān)技術(shù)和方法雖不是很困難的事，但要從一大批的實驗數(shù)據(jù)中,，經(jīng)過處理和分析,，得出有意義、有價值的結(jié)果和結(jié)論,，就顯得不那么容易,，有許多需要注意和考慮的問題，包括減少噪音,，避免電極前端的污染,，提高封接成功率，具體實驗過程中還需要考慮如何選取記錄模式,，為記錄特定離子電流如何選擇電極內(nèi),、外液，如何選擇阻斷劑,、激動劑,，如何進(jìn)行正確的數(shù)據(jù)采集等許多更為復(fù)雜的問題，還需在科研實踐中不斷地探索和解決,。上海全自動腦定位膜片鉗應(yīng)用膜片鉗技術(shù)的應(yīng)用范圍：在神經(jīng)科學(xué)中的研究,。

膜片鉗系統(tǒng)有如下應(yīng)用局限性(1)光能應(yīng)用于懸浮細(xì)胞的紀(jì)錄，因此大部分的紀(jì)錄對象為化細(xì)胞,，而對于需要貼壁生長的大多數(shù)正常細(xì)胞,，現(xiàn)有的自動膜片鉗系統(tǒng)就無法紀(jì)錄；(2)在紀(jì)錄對象上,，目前的膜片鉗系統(tǒng)只能紀(jì)錄胞膜形狀平整飽滿的細(xì)胞,，大部分是工具細(xì)胞如化細(xì)胞，此類細(xì)胞有比較強的細(xì)胞膜可以禁得起各種人為操作,，而許多具有研究價值的細(xì)胞(例如元代培養(yǎng)的神經(jīng)元)胞膜較弱容易破裂,，且胞體表面不規(guī)整，現(xiàn)有的自動膜片鉗系統(tǒng)難以派上用場,。因此,，迫切需要一種新型的全自動膜片鉗電生理紀(jì)錄系統(tǒng)來解決以上問題,。

膜片鉗實驗中電極制備的要求：合格的膜片微電極是成功封接細(xì)胞膜的基本條件,。要成功的封接細(xì)胞膜需要兩方面的因素保證，一是設(shè)法造成干凈的細(xì)胞膜表面,，二是制成合格的電極,。首先要選擇適當(dāng)?shù)牟Ａ?xì)管,，其材料可使用軟質(zhì)玻璃（蘇打玻璃、電石玻璃）或硬質(zhì)玻璃（硼硅玻璃、鋁硅玻璃,、石英玻璃）,。軟玻璃電極常用于作全細(xì)胞記錄，硬質(zhì)玻璃因?qū)щ娐实?、噪聲小而常用于離子單通道記錄,。膜片微電極是將玻璃毛細(xì)管用電極拉制儀拉制而成的,，制作分三步進(jìn)行：一是分兩次拉制,；第二步是在電極前端涂以硅酮樹脂（sylgard）；第三步是拋光,。膜片鉗實驗要從一大批的實驗數(shù)據(jù)中,，經(jīng)過處理和分析，得出有意義,、有價值的結(jié)果和結(jié)論,。

膜片鉗芯片技術(shù)是繼細(xì)胞芯片之后的又一種嶄新的分析細(xì)胞電生理參數(shù)的芯片技術(shù)。由于該芯片除了具有傳統(tǒng)膜片鉗的高分辨和高準(zhǔn)確性特點外,還具有高通量,、自動化以及細(xì)胞多通道參數(shù)和細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)參數(shù)在線和實時檢測等優(yōu)點.因此,該芯片技術(shù)將很大促進(jìn)細(xì)胞離子通道,、細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)傳導(dǎo)以及藥物篩選的研究和應(yīng)用。具體介紹了膜片鉗芯片技術(shù)的發(fā)展及其應(yīng)用,結(jié)合研究工作,著重介紹了膜片鉗芯片技術(shù)在味覺細(xì)胞研究的比較新進(jìn)展,并結(jié)合神經(jīng)芯片研究細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)的方法,對采用膜片鉗芯片技術(shù)在細(xì)胞和分子水平上研究味覺的敏感機理和傳導(dǎo)機制的應(yīng)用前景進(jìn)行了展望,。膜片鉗使用的注意事項：玻璃微電極需先用甲醇浸泡,，再用酒精燈微燒兩端，使其平滑,。蕪湖細(xì)胞生物學(xué)電生理膜片鉗研究方案

膜片鉗使用的注意事項：打雷天氣必須禁止膜片鉗實驗,。連云港細(xì)胞生物學(xué)膜片鉗全細(xì)胞記錄方案

膜片鉗法的各種模式：膜外面向內(nèi)模式：從全細(xì)胞模式將膜片微電極向上提起可得到切割分離的膜片，由于它的細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)面面對膜片微電極腔內(nèi)液,，膜外面自然封閉而對外,，所以這個模式被稱為莫外面向內(nèi)模式。開放細(xì)胞吸附膜內(nèi)面向外模式：將細(xì)胞吸附模式的膜片以外的某部位的胞膜進(jìn)行機械地破壞,，經(jīng)破壞孔調(diào)控細(xì)胞內(nèi)液并在細(xì)胞吸附狀態(tài)下進(jìn)行內(nèi)面向外的單一離子通道記錄,。穿孔囊泡膜外面向外模式：從穿孔膜片模式將膜片微電極向上提起，便在微電極尖銳端處形成一個膜囊泡,，如果條件較好,，此膜囊泡內(nèi)不只有細(xì)胞質(zhì)因子還可有線粒體等細(xì)胞器存在。連云港細(xì)胞生物學(xué)膜片鉗全細(xì)胞記錄方案

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