多克隆抗體特異性鑒定:抗體的親和力 是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度,。親和力的高低是由抗原分子的大小、抗體分子的結(jié)合位點與抗原決定簇之間立體構型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,、疏水鍵,、側(cè)鏈相反電荷基因的庫侖力,、范德華力和空間斥力,。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol,,通常K的范圍在 108 ~1010 /mol,,也有多達 1014 /mol??贵w親和力的測定對抗體的篩選,,確定抗體的用途,驗證抗體的均一性等均有重要意義,??贵w按其反應形式分為凝集素、沉降素,、抗毒,、溶解素,、調(diào)理素,、中和抗體、補體結(jié)合抗體等,。湖北富含脯氨酸11抗體報價
多克隆抗體免疫動物:供免疫用的動物主要是哺乳動物和禽類,,常選擇家兔、綿羊,、山羊,、馬、騾和豚鼠及小鼠等,。動物的選擇常根據(jù)抗體的用途和量來決定,,也與抗原的性質(zhì)有關,。如要獲得大量的抗體,多采用大動物,;如要是獲得直接標記診斷的抗體,,則直接采用本動物;如要獲得間接的標記診斷用抗體,,則必須用異源動物制備抗體,;如果難以獲得的抗原,且抗體的需要量少,,則可以采用純系小鼠制備,;一般實驗室采用的抗體,多用兔和羊制備,。免疫用的動物建議選擇適齡的健康雄性動物,,雌性動物特別是妊娠動物用于制備免疫抗體則非常不合適,有時甚至不產(chǎn)生抗體,。河南IgA抗體公司排行重組抗體技術使得科學家能夠定制和改良抗體,,以應對不同的疾病挑戰(zhàn)。
抗體可變區(qū)和恒定區(qū):通過分析不同Ig重鏈和輕鏈的氨基酸序列發(fā)現(xiàn),,重鏈和輕鏈靠近N端的約110個氨基酸序列變化很大,,其他部分氨基酸序列相對恒定。因此,,將Ig輕鏈和重鏈中靠近N端氨基酸序列變化較大的區(qū)域稱為可變區(qū)(variable region,,V),分別占重鏈和輕鏈的1/4和1/2,;將靠近C端的氨基酸序列相對穩(wěn)定的區(qū)域,,稱為恒定區(qū)(constant region,C),,分別占重鏈和輕鏈的3/4和1/2,。恒定區(qū) 重鏈和輕鏈的C區(qū)分別稱為CH和CL。不同型(κ或λ)Ig的CL長度基本一致,,但是不同類Ig的CH長度不同,,例如IgG、IgA和IgD包括CH1,、CH2和CH3,,而IgM和IgE則包括CH1、CH2,、CH3和CH4,。
抗體(antibody)是指機體由于抗原的刺激而產(chǎn)生的具有保護作用的蛋白質(zhì)。它(免疫球蛋白不只是抗體)是一種由漿細胞(效應B細胞)分泌,,被免疫系統(tǒng)用來鑒別與中和外來物質(zhì)如細菌,、病毒等的大型Y形蛋白質(zhì),,只被發(fā)現(xiàn)存在于脊椎動物的血液等體液中,及其B細胞的細胞膜表面,??贵w能識別特定外來物的一個獨特特征,該外來目標被稱為抗原,??贵w是一類能與抗原特異性結(jié)合的免疫球蛋白??贵w按其反應形式分為凝集素,、沉降素、抗毒,、溶解素,、調(diào)理素、中和抗體,、補體結(jié)合抗體等,。抗體可以幫助身體識別和摧毀病毒,、細菌等病原體,。
隨后,經(jīng)1968年和1972年的世界衛(wèi)生組織和國際免疫學會聯(lián)合會討論決定,,將具有抗體活性或化學結(jié)構與抗體相似的球蛋白統(tǒng)一命名為免疫球蛋白(immunoglobulin,,Ig)。Ig可分為分泌型Ig(secreted Ig,,SIg)和膜型Ig(membrane Ig,,mIg)。SIg主要存在于血液和組織液中,,行使抗體的各種功能,;mIg主要構成B細胞膜表面的抗原受體?;窘Y(jié)構:經(jīng)x線晶體衍射結(jié)構分析發(fā)現(xiàn),,Ig由四條多肽鏈組成,各肽鏈之間由數(shù)量不等的鏈間二硫鍵連接,。Ig可形成“Y”字型結(jié)構,,稱為Ig單體,是構成抗體的基本單位,。抗體還可以通過啟動補體系統(tǒng)引發(fā)炎癥反應,,吸引其他免疫細胞前來去除病原體,。河南IgA抗體公司排行
抗體是免疫系統(tǒng)產(chǎn)生的一種蛋白質(zhì),,能夠識別并中和入侵機體的病原體。湖北富含脯氨酸11抗體報價
多克隆抗體主要從動物免疫血清,、恢復期患者血清或免疫接種人群的血清中獲得,。多克隆抗體的優(yōu)勢是:作用全方面,具有中和抗原,、免疫調(diào)理,、補體依賴的細胞毒作用(CDC)、ADCC等重要作用,,而且來源普遍,、制備簡單。其缺點是:特異性不高,、易發(fā)生交叉反應,,不易大量制備,因而限制了其應用的范圍,。單克隆抗體解決多克隆抗體特異性不高的理想方法是制備識別單一表位特異性的抗體,。如果能獲得只針對單一表位的漿細胞克隆,并使其在體外擴增分泌抗體,,就有可能獲得單一表位特異性的抗體,。然而,漿細胞在體外的壽命較短,,難以培養(yǎng),。為克服這一缺點,Kohler和Milstein將可產(chǎn)生特異性抗體但短壽的B細胞與不產(chǎn)生抗體但長壽的骨髓瘤細胞融合,,獲得了可以產(chǎn)生單克隆抗體的雜交瘤細胞,,從而建立了單克隆抗體制備技術。湖北富含脯氨酸11抗體報價
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