多克隆抗體特異性鑒定:抗體的親和力 是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小、抗體分子的結(jié)合位點與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的,。有助于維持抗原抗體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,、疏水鍵、側(cè)鏈相反電荷基因的庫侖力、范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol,,通常K的范圍在 108 ~1010 /mol,也有多達 1014 /mol,??贵w親和力的測定對抗體的篩選,確定抗體的用途,,驗證抗體的均一性等均有重要意義,。抗體也參與到反應(yīng)中,,在過敏性疾病中發(fā)揮重要作用,。杭州異嗜性抗體
抗體特性和功能:IgG于出生后3個月開始合成,3~5歲接近成人水平,。IgG是血清和體液中含量很高的抗體,,占血清總Ig的75%~80%。人lgG有4個亞類,,根據(jù)其在血清中濃度的高低排序,,分別為IgG1、IgG2,、IgG3,、IgG4,。IgG的半衰期為20~23天,是再次免疫應(yīng)答產(chǎn)生的主要抗體,,其親和力高,在體內(nèi)分布普遍,,具有重要的免疫效應(yīng),,是機體抗傳染的“主力軍”。IgG1,、IgG2和IgG3可以穿過胎盤屏障,,在新生兒抗傳染免疫中起重要作用。IgG1,、lgG2和IgG3能通過經(jīng)典途徑活化補體,,并可與巨噬細胞、NK細胞表面Fc受體結(jié)合,,發(fā)揮調(diào)理作用,、ADCC作用等;人IgGl,、IgG2和IgG4可通過其Fc段與葡萄球菌蛋白A(SPA)結(jié)合,,借此可純化抗體,并用于免疫診斷,。某些自身抗體如抗甲狀腺球蛋白抗體,、抗核抗體,以及引起Ⅱ,、Ⅲ型超敏反應(yīng)的抗體也屬于IgG,。四川IgM抗體研發(fā)團隊抗體在疫苗接種后的產(chǎn)生是一種主動免疫應(yīng)答,提供長期的保護作用,。
抗體是一種重要的生物分子,,在醫(yī)學和生物學領(lǐng)域有著普遍的應(yīng)用。以下是抗體的一些主要用途:生物制品檢測:抗體可以用于生物制品的檢測和質(zhì)量控制中,。在生物制品的生產(chǎn)和質(zhì)量控制中,,需要對產(chǎn)品的質(zhì)量和安全性進行檢測和評估??贵w可以用于檢測生物制品中的病原體,、蛋白質(zhì)、細胞因子等關(guān)鍵指標,,確保產(chǎn)品的質(zhì)量和安全性,。總之,,抗體在醫(yī)學和生物學領(lǐng)域有著普遍的應(yīng)用價值,。隨著技術(shù)的不斷進步和創(chuàng)新,,抗體的應(yīng)用范圍還將不斷拓展和擴大,為人類健康和疾病調(diào)理提供更多的幫助和支持,。
多克隆抗體免疫動物:供免疫用的動物主要是哺乳動物和禽類,,常選擇家兔、綿羊,、山羊,、馬、騾和豚鼠及小鼠等,。動物的選擇常根據(jù)抗體的用途和量來決定,,也與抗原的性質(zhì)有關(guān)。如要獲得大量的抗體,,多采用大動物,;如要是獲得直接標記診斷的抗體,則直接采用本動物,;如要獲得間接的標記診斷用抗體,,則必須用異源動物制備抗體;如果難以獲得的抗原,,且抗體的需要量少,,則可以采用純系小鼠制備;一般實驗室采用的抗體,,多用兔和羊制備,。免疫用的動物建議選擇適齡的健康雄性動物,雌性動物特別是妊娠動物用于制備免疫抗體則非常不合適,,有時甚至不產(chǎn)生抗體??贵w的多樣性來自于基因重排和突變,,使其能夠識別各種不同的抗原。
多克隆抗體主要從動物免疫血清,、恢復(fù)期患者血清或免疫接種人群的血清中獲得,。多克隆抗體的優(yōu)勢是:作用全方面,具有中和抗原,、免疫調(diào)理,、補體依賴的細胞毒作用(CDC)、ADCC等重要作用,,而且來源普遍,、制備簡單。其缺點是:特異性不高,、易發(fā)生交叉反應(yīng),,不易大量制備,,因而限制了其應(yīng)用的范圍。單克隆抗體解決多克隆抗體特異性不高的理想方法是制備識別單一表位特異性的抗體,。如果能獲得只針對單一表位的漿細胞克隆,,并使其在體外擴增分泌抗體,就有可能獲得單一表位特異性的抗體,。然而,,漿細胞在體外的壽命較短,難以培養(yǎng),。為克服這一缺點,Kohler和Milstein將可產(chǎn)生特異性抗體但短壽的B細胞與不產(chǎn)生抗體但長壽的骨髓瘤細胞融合,,獲得了可以產(chǎn)生單克隆抗體的雜交瘤細胞,從而建立了單克隆抗體制備技術(shù),??贵w能識別特定外來物的一個獨特特征,,該外來目標被稱為抗原,。杭州異嗜性抗體
抗體對于病毒傳染的控制尤為重要,,如針對HIV的中和抗體研究具有重要意義,。杭州異嗜性抗體
多克隆抗體乳化作用:將抗原與佐劑混合的過程稱為乳化,。乳化的方法很多,,可采用研缽乳化,;可直接在旋渦振蕩器上乳化,;可用組織搗碎器乳化。少量時,,特別是弗氏佐劑與抗原乳化時,,常采用注射器乳化,用兩個注射器,,一個吸入抗原液,,一個吸入佐劑,兩注射器頭以膠管連接,,注意一定扎緊,,然后來回抽吸。當大量乳化時,,可采用膠體磨進行,。乳化好的標志是取一滴乳化劑滴入水中呈現(xiàn)球形而不分散。如出現(xiàn)平展擴散即為未乳化好,。乳化過的物質(zhì)放置一段時間(在保存期內(nèi))出現(xiàn)油水分層也是未乳化好的表現(xiàn),。 杭州異嗜性抗體
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