抗體的多樣性:人血清中的抗體多種多樣,B淋巴細(xì)胞可產(chǎn)生的抗體種類(lèi)在108以上,可與眾多不同抗原發(fā)生特異性結(jié)合。抗體多樣性的原因主要有兩方面:1.外源性因素環(huán)境中抗原種類(lèi)甚多,,每種大分子抗原又有多種抗原表位,每種抗原表位均可選擇啟動(dòng)體內(nèi)一個(gè)B細(xì)胞克隆,產(chǎn)生一種特異性抗體,。2.內(nèi)源性因素抗體多樣性的另一個(gè)原因是由基因的結(jié)構(gòu)及功能特征所決定的。編碼人Ig重鏈及κ,、λ型輕鏈的基因分別位于第14,、2、22號(hào)染色體上,。其中編碼Ig重鏈的基因包括編碼可變區(qū)的V,、D、J及編碼恒定區(qū)的C基因,;編碼Ig輕鏈的基因包括編碼可變區(qū)的V,、J及編碼恒定區(qū)的C基因??贵w可以區(qū)分自身抗原和外來(lái)抗原,,避免免疫系統(tǒng)攻擊自身組織。杭州IgG抗體費(fèi)用
抗體主要功能:?jiǎn)?dòng)補(bǔ)體產(chǎn)生攻膜復(fù)合物使細(xì)胞溶解破壞,。人IgG1~3和IgM與相應(yīng)抗原結(jié)合后,,可因構(gòu)象改變而使其CH2和CH3結(jié)構(gòu)域內(nèi)的補(bǔ)體結(jié)合點(diǎn)暴露,從而通過(guò)經(jīng)典途徑啟動(dòng)補(bǔ)體系統(tǒng),,產(chǎn)生多種效應(yīng)功能,,其中IgM、IgG1和IgG3啟動(dòng)補(bǔ)體系統(tǒng)的能力較強(qiáng),,IgG2較弱,。IgA、IgE和IgG4本身難以啟動(dòng)補(bǔ)體,,但在形成聚合物后可通過(guò)旁路途徑啟動(dòng)補(bǔ)體系統(tǒng),。通常情況下,lgD不能啟動(dòng)補(bǔ)體,。調(diào)理吞噬和ADCC,。IgG可通過(guò)其Fc段與表面具有相應(yīng)受體的細(xì)胞結(jié)合,產(chǎn)生不同的生物學(xué)作用,。免疫抗體研發(fā)制造抗體可以通過(guò)中和病原體,、啟動(dòng)免疫細(xì)胞和調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)等方式發(fā)揮作用,。
多克隆抗體又簡(jiǎn)稱(chēng)多抗。與之相對(duì)應(yīng)的叫單克隆抗體,,簡(jiǎn)稱(chēng)單抗,。抗原通常是由多個(gè)抗原決定簇組成的,,由一種抗原決定簇刺激機(jī)體,,由一個(gè)B淋巴細(xì)胞接受該抗原所產(chǎn)生的抗體稱(chēng)之為單克隆抗體(Monoclone antibody)。由多種抗原決定簇刺激機(jī)體,,相應(yīng)地就產(chǎn)生各種各樣的單克隆抗體,,這些單克隆抗體混雜在一起就是多克隆抗體,機(jī)體內(nèi)所產(chǎn)生的抗體就是多克隆抗體,;除了抗原決定簇的多樣性以外,,同樣一類(lèi)抗原決定簇,也可刺激機(jī)體產(chǎn)生IgG,、IgM,、IgA、IgE和IgD等五類(lèi)抗體,。
抗體特性和功能:IgM占血清Ig總量的5%~10%,,血清濃度約為1mg/ml。單體IgM以膜結(jié)合型表達(dá)于B細(xì)胞表面,,構(gòu)成B細(xì)胞抗原受體,,只表達(dá)mlgM是未成熟B細(xì)胞的標(biāo)志。分泌型IgM為五聚體,,是分子量很大的Ig,,沉降系數(shù)為19S,稱(chēng)為巨球蛋白(macroglobulin),,一般不能通過(guò)血管壁,,主要存在于血液中。五聚體IgM含有10個(gè)Fab段,,具有很強(qiáng)的抗原結(jié)合能力,;含有5個(gè)Fc段,比IgG更易啟動(dòng)補(bǔ)體,。天然血型抗體為IgM,血型不匹配的輸血,,可導(dǎo)致嚴(yán)重的溶血反應(yīng),。IgM是個(gè)體發(fā)育過(guò)程中很早合成和分泌的抗體,在胚胎發(fā)育晚期的胎兒即能產(chǎn)生IgM,,故臍帶血lgM升高提示胎兒有宮內(nèi)傳染(如風(fēng)疹病毒或巨細(xì)胞病毒等傳染),。IgM也是初次體液免疫應(yīng)答中很早出現(xiàn)的抗體,,是機(jī)體抗傳染免疫的“先頭”;血清中IgM升高,,提示新近發(fā)生傳染,,可用于傳染的早期診斷。特定的抗體可以用于制備特異性的試劑盒,,用于檢測(cè)特定病原體或標(biāo)志物,。
抗體可變區(qū)和恒定區(qū):可變區(qū) 重鏈和輕鏈的V區(qū)分別稱(chēng)為VH和VL。VH和VL中各含有3個(gè)氨基酸組成和排列順序高度可變的區(qū)域,,稱(chēng)為高變區(qū)(hypervariable region,,HVR)或互補(bǔ)決定區(qū)(complementarity determining region,CDR),, 包括HVR1(CDR1),、HVR2(CDR2)和HVR3(CDR3),其中,,HVR3(CDR3)變化程度更高,。VH的3個(gè)高變區(qū)分別位于29~31、49~58和95~102位氨基酸,,而VL的3個(gè)高變區(qū)分別位于28~35,、49~56和91~98位氨基酸。VH和VL的3個(gè)CDR共同組成Ig的抗原結(jié)合部位(antigen-binding site),,決定抗體的特異性,,是抗體識(shí)別及結(jié)合抗原的部位。在V區(qū)中,,CDR之外區(qū)域的氨基酸組成和排列順序相對(duì)保守,,稱(chēng)為骨架區(qū)(framework region,F(xiàn)R),。VH或VL各有四個(gè)骨架區(qū),,分別用FR1、FR2,、FR3和FR4表示,。抗體(antibody)是指機(jī)體由于抗原的刺激而產(chǎn)生的具有保護(hù)作用的蛋白質(zhì),。杭州IgG抗體費(fèi)用
抗體的親和力決定了其與抗原結(jié)合的強(qiáng)度,,高親和力的抗體能更有效地中和病原體。杭州IgG抗體費(fèi)用
多克隆抗體免疫動(dòng)物:抗原的免疫劑量是依照給予動(dòng)物的種類(lèi),、免疫周期以及所要求的抗體特性等不同而不同,。劑量過(guò)低,不能引起足夠強(qiáng)的免疫刺激,,免疫劑量過(guò)多,,有可能引起免疫耐受,。在一定的范圍內(nèi),抗體的效價(jià)是隨注射劑量的增加而增高,。蛋白質(zhì)抗原的免疫劑量比多糖類(lèi)抗原寬,。一般而言,小鼠的初次免疫劑量為 50μg~400μg/次,, 大鼠為100μg~1 000μg/次,, 兔為 200μg~1 000μg/2次。加強(qiáng)劑量為初次劑量的 1/5~2/5,。免疫劑量與注射途徑有關(guān),,一般而言,靜脈注射劑量大于皮下注射,,而皮下注射又比掌內(nèi)和跖內(nèi)皮下注射劑量大,,也可采用淋巴結(jié)內(nèi)注射法。杭州IgG抗體費(fèi)用