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深圳異嗜性抗體研發(fā)團(tuán)隊(duì)

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2024-03-07

單克隆抗體:解決多克隆抗體特異性不高的理想方法是制備識(shí)別單一表位特異性的抗體。如果能獲得只針對(duì)單一表位的漿細(xì)胞克隆,,并使其在體外擴(kuò)增分泌抗體,,就有可能獲得單一表位特異性的抗體。然而,,漿細(xì)胞在體外的壽命較短,,難以培養(yǎng)。為克服這一缺點(diǎn),,Kohler和Milstein將可產(chǎn)生特異性抗體但短壽的B細(xì)胞與不產(chǎn)生抗體但長(zhǎng)壽的骨髓瘤細(xì)胞融合,,獲得了可以產(chǎn)生單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞,從而建立了單克隆抗體制備技術(shù),。通過(guò)該技術(shù)融合形成的雜交瘤(hybridoma),,既具有骨髓瘤細(xì)胞大量擴(kuò)增和永生的特性,又具有免疫B細(xì)胞合成和分泌特異性抗體的能力,。多克隆抗體可以通過(guò)親和層析或凝集素親和純化方法進(jìn)行純化,,以獲得較高純度的抗體,。深圳異嗜性抗體研發(fā)團(tuán)隊(duì)

抗體主要功能:?jiǎn)?dòng)補(bǔ)體產(chǎn)生攻膜復(fù)合物使細(xì)胞溶解破壞。人IgG1~3和IgM與相應(yīng)抗原結(jié)合后,,可因構(gòu)象改變而使其CH2和CH3結(jié)構(gòu)域內(nèi)的補(bǔ)體結(jié)合點(diǎn)暴露,,從而通過(guò)經(jīng)典途徑啟動(dòng)補(bǔ)體系統(tǒng),產(chǎn)生多種效應(yīng)功能,,其中IgM,、IgG1和IgG3啟動(dòng)補(bǔ)體系統(tǒng)的能力較強(qiáng),,IgG2較弱,。IgA、IgE和IgG4本身難以啟動(dòng)補(bǔ)體,,但在形成聚合物后可通過(guò)旁路途徑啟動(dòng)補(bǔ)體系統(tǒng),。通常情況下,lgD不能啟動(dòng)補(bǔ)體,。調(diào)理吞噬和ADCC:IgG可通過(guò)其Fc段與表面具有相應(yīng)受體的細(xì)胞結(jié)合,,產(chǎn)生不同的生物學(xué)作用。湖北自身抗體哪家好單克隆抗體是通過(guò)從單個(gè)抗體細(xì)胞中獲得的抗體產(chǎn)生的,。

抗體介導(dǎo)I型超敏反應(yīng),。IgE為親細(xì)胞抗體,可通過(guò)其Fc段與肥大細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞表面的IgE高親和力Fc受體結(jié)合,,使其致敏,。當(dāng)相同的變應(yīng)原再次進(jìn)入機(jī)體時(shí),可以直接與致敏靶細(xì)胞表面的特異性IgE結(jié)合,,促使這些細(xì)胞合成和釋放生物活性物質(zhì),,引起I型超敏反應(yīng)。在人類(lèi),,lgG是能夠通過(guò)胎盤(pán)的抗體,。胎盤(pán)母體一側(cè)的滋養(yǎng)層細(xì)胞可表達(dá)一種特異性的IgG輸送蛋白,稱(chēng)為FcRn,。IgG可選擇性地與FcRn結(jié)合,,從而轉(zhuǎn)移到滋養(yǎng)層細(xì)胞內(nèi),并主動(dòng)進(jìn)入胎兒的血循環(huán)中,。IgG穿過(guò)胎盤(pán)的作用在于這是一種重要的自然被動(dòng)免疫機(jī)制,,對(duì)于新生兒抗傳染具有重要意義。另外,,sigA可通過(guò)呼吸道和消化道的黏膜,,在黏膜局部免疫中發(fā)揮重要的免疫防御作用。

抗體胃蛋白酶作用于鉸鏈區(qū)二硫鍵所連接的兩條重鏈的近c(diǎn)端,,水解Ig后可獲得一個(gè)F(ab’)2片段和一些小片段pFc’,。F(ab’)2是由兩個(gè)Fab段及鉸鏈區(qū)組成,,由于Ig分子的兩個(gè)臂仍由二硫鍵連接,因此F(ab’)2片段為雙價(jià),,可同時(shí)結(jié)合兩個(gè)抗原表位,,與抗原結(jié)合可發(fā)生凝集反應(yīng)和沉淀反應(yīng)。由于F(ab’)2片段既保留了結(jié)合相應(yīng)抗原的生物學(xué)活性,,又避免了Fc段免疫原性可能引起的副作用,,因而被普遍用于制備生物制品,如白喉抗有害素,、破傷風(fēng)抗有害素均是經(jīng)胃蛋白酶消化后精制提純的生物制品,。胃蛋白酶水解Ig后所產(chǎn)生的pFc 7然后被降解,無(wú)生物學(xué)作用 ,。單克隆抗體可以用于檢測(cè)和監(jiān)測(cè)特定細(xì)胞的增殖,。

抗體IgG可通過(guò)其Fc段與表面具有相應(yīng)受體的細(xì)胞結(jié)合,產(chǎn)生不同的生物學(xué)作用,。調(diào)理作用(opsonization)指IgG抗體(特別是IgG1和IgG3)的Fc段與中性粒細(xì)胞,、巨噬細(xì)胞表面相應(yīng)的Fc受體結(jié)合,從而增強(qiáng)吞噬細(xì)胞的吞噬作用,。例如,,細(xì)菌特異性的IgG抗體可通過(guò)其Fab段與相應(yīng)的細(xì)菌抗原結(jié)合后,以其Fc段與巨噬細(xì)胞或中性粒細(xì)胞表面相應(yīng)的Fc受體結(jié)合,,通過(guò)IgG的Fab段和Fc段的“橋聯(lián)”作用,,促進(jìn)吞噬細(xì)胞對(duì)細(xì)菌的吞噬??贵w依賴(lài)的細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用(antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity,,ADCC)指具E有殺傷活性的細(xì)胞(如NK細(xì)胞)通過(guò)其表面的Fc受體識(shí)別包被于靶細(xì)胞表面抗原(如病毒感染細(xì)胞或腫瘤細(xì)胞)上的抗體的Fc段,直接殺傷靶細(xì)胞,。NK細(xì)胞是介導(dǎo)ADCC的主要細(xì)胞,。抗體與靶細(xì)胞上的抗原結(jié)合是特異性的,,而表達(dá)Fc受體細(xì)胞的殺傷作用是非特異性的 ,。單克隆抗體可以高度特異性地與特定抗原結(jié)合。南京IgE抗體價(jià)格

多克隆抗體適用于各種實(shí)驗(yàn)和臨床應(yīng)用,,如免疫染色,、免疫印跡、流式細(xì)胞術(shù)等,。深圳異嗜性抗體研發(fā)團(tuán)隊(duì)

選擇性培養(yǎng)的目的是篩選融合的雜交瘤細(xì)胞,,一般采用HAT選擇性培養(yǎng)基。在HAT培養(yǎng)基中,未融合的小鼠骨髓瘤細(xì)胞中DNA的從頭合成途徑會(huì)被阻止,;未融合的骨髓瘤細(xì)胞又因缺乏次黃嘌呤-鳥(niǎo)嘌呤-磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶(HGPRT),,不能利用補(bǔ)救途徑合成DNA;這樣未融合小鼠骨髓瘤細(xì)胞的兩個(gè)DNA合成途徑都被阻止,,骨髓瘤細(xì)胞DNA不能復(fù)制而死亡,。 未融合的B淋巴細(xì)胞雖具有次黃嘌呤-鳥(niǎo)嘌呤-磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶,但其本身不能在體外長(zhǎng)期存活也逐漸死亡,。 只有融合的雜交瘤細(xì)胞由于從B淋巴細(xì)胞獲得了次黃嘌呤-鳥(niǎo)嘌呤-磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶,,可以通過(guò)補(bǔ)救途徑合成DNA,并具有骨髓瘤細(xì)胞能無(wú)限增殖的特性,,因此,,雜交瘤細(xì)胞能在HAT培養(yǎng)基中存活和增殖。深圳異嗜性抗體研發(fā)團(tuán)隊(duì)

標(biāo)簽: 血清 抗體 膽固醇 胰蛋白酶