19世紀(jì)后期,,Von Behring及其同事Kitasato研究發(fā)現(xiàn),,用白喉或破傷風(fēng)免疫動物后可產(chǎn)生具有中和有害素作用的物質(zhì),稱之為antitoxin,隨后引入“抗體”一詞來泛指抗有害素類物質(zhì),??贵w(antibody,Ab)是B細胞接受抗原刺激后增殖分化為漿細胞所產(chǎn)生的糖蛋白,,主要存在于血清等體液中,,是介導(dǎo)體液免疫的重要效應(yīng)分子,能與相應(yīng)抗原特異性結(jié)合,,發(fā)揮免疫功能,。1937年,Tiselius和Kabat用電泳方法將血清蛋白分為白蛋白,、α1,、α2、β及γ球蛋白等組分,,并發(fā)現(xiàn)抗體主要存在于γ區(qū),,因此抗體又被稱為γ球蛋白。單克隆抗體可以識別和分離特定的細胞類型,。上海Prestige抗體生產(chǎn)廠家
1937年,,Tiselius和Kabat用電泳方法將血清蛋白分為白蛋白、α1,、α2,、β及γ球蛋白等組分,并發(fā)現(xiàn)抗體主要存在于γ區(qū),,因此抗體又被稱為γ球蛋白,。隨后,經(jīng)1968年和1972年的世界衛(wèi)生組織和國際免疫學(xué)會聯(lián)合會討論決定,,將具有抗體活性或化學(xué)結(jié)構(gòu)與抗體相似的球蛋白統(tǒng)一命名為免疫球蛋白(immunoglobulin,,Ig)。Ig可分為分泌型Ig(secreted Ig,,SIg)和膜型Ig(membrane Ig,,mIg)。SIg主要存在于血液和組織液中,,行使抗體的各種功能,;mIg主要構(gòu)成B細胞膜表面的抗原受體。上海Prestige抗體生產(chǎn)廠家多克隆抗體可以用于區(qū)分同源蛋白質(zhì)在結(jié)構(gòu)和功能上的差異,。
血型抗體一般分為二類:天然抗體和免疫抗體,,一般天然抗體是IgM,免疫抗體是IgG,。①IgM類抗體在鹽水介質(zhì)中能夠凝集具有相應(yīng)抗原的紅細胞,,這類抗體主要是ABO以及P,、MN、Lewis抗體,,常為天然抗體,。能啟動補體,發(fā)生血管內(nèi)溶血,。此類抗體不能透過胎盤,,且其合理反應(yīng)溫度為4℃ 所以又叫冷抗體。②IgG類抗體多數(shù)情況下在鹽水介質(zhì)中與具有相應(yīng)抗原的紅細胞不發(fā)生凝集,,只有在膠體介質(zhì),、酶或抗球蛋白、凝聚胺介質(zhì)中才發(fā)生凝集,,這類抗體主要是Rh,、Kidd,、Duffy等血型抗體,。通常情況通過免疫(輸血、妊娠,、部位移植)產(chǎn)生抗體,,又稱免疫抗體。多發(fā)生血管外溶血,。此類抗體合理反應(yīng)溫度37℃所以又叫溫抗體,。
IgE是什么?與過敏有什么關(guān)系,?說IgE之前,,我們先來了解一下抗體,它的本質(zhì)是蛋白質(zhì),,確切地說,,它是一種具有免疫功能的球蛋白,存在于血清,、體液,、外分泌液和一些細胞膜上,因此也叫做免疫球蛋白(Immunoglobulin,,Ig),。人體至少有5種免疫球蛋白,各自具有不同的免疫學(xué)功能,,包括IgM,,IgG,IgA,,IgD和IgE,。其中與過敏關(guān)系密切的是IgE抗體,。IgE是Ⅰ型超敏反應(yīng)機制中重要的免疫分子,自1967年IgE純化以來,,血清學(xué)檢測已成為診斷超敏反應(yīng)疾病常用的檢測方法,。多克隆抗體是一種通過小鼠或其他動物產(chǎn)生的抗體,可以與多個不同的抗原結(jié)合,。
選擇性培養(yǎng)的目的是篩選融合的雜交瘤細胞,,一般采用HAT選擇性培養(yǎng)基。在HAT培養(yǎng)基中,,未融合的小鼠骨髓瘤細胞中DNA的從頭合成途徑會被阻止,;未融合的骨髓瘤細胞又因缺乏次黃嘌呤-鳥嘌呤-磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶(HGPRT),不能利用補救途徑合成DNA,;這樣未融合小鼠骨髓瘤細胞的兩個DNA合成途徑都被阻止,,骨髓瘤細胞DNA不能復(fù)制而死亡。 未融合的B淋巴細胞雖具有次黃嘌呤-鳥嘌呤-磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶,,但其本身不能在體外長期存活也逐漸死亡,。 只有融合的雜交瘤細胞由于從B淋巴細胞獲得了次黃嘌呤-鳥嘌呤-磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶,可以通過補救途徑合成DNA,,并具有骨髓瘤細胞能無限增殖的特性,,因此,雜交瘤細胞能在HAT培養(yǎng)基中存活和增殖,。單克隆抗體在惡性癥調(diào)理中具有潛在的應(yīng)用價值,。上海Prestige抗體生產(chǎn)廠家
多克隆抗體可以通過親和層析或凝集素親和純化方法進行純化,以獲得較高純度的抗體,。上海Prestige抗體生產(chǎn)廠家
抗體J鏈和分泌片:Ig輕鏈和重鏈除上述基本結(jié)構(gòu)外,,某些類別的Ig還含有其他輔助成分,如J鏈和分泌片,。J鏈(joining chain)是一條富含半胱氨酸的多肽鏈,,由漿細胞合成,其主要功能是將多個Ig單體連接為多聚體,。2個IgA單體由J鏈相互連接形成二聚體,,5個IgM單體由二硫鍵相互連接,并通過二硫鍵與J鏈連接形成五聚體,。IgG,、IgD和IgE常為單體,無J鏈,。分泌片(secretory piece,,SP)又稱為分泌成分(secretory component,SC),,是分泌型IgA分子上的一個輔助成分,,為一種含糖的肽鏈,,由黏膜上皮細胞合成和分泌,以非共價形式結(jié)合于IgA二聚體上,,使其成為分泌型IgA(SIgA),,并一起被分泌到黏膜表面。分泌片能保護SIgA的鉸鏈區(qū)不被蛋白水解酶降解,。上海Prestige抗體生產(chǎn)廠家