單克隆抗體的大量制備主要采用動(dòng)物體內(nèi)誘生法和體外培養(yǎng)法。(1)體內(nèi)誘生法取BALB/c小鼠,,首先腹腔注射0.5ml液體石蠟或降植烷進(jìn)行預(yù)處理,。1-2周后,,腹腔內(nèi)接種雜交瘤細(xì)胞,。雜交瘤細(xì)胞在小鼠腹腔內(nèi)增殖,,并產(chǎn)生和分泌單克隆抗體,。約1-2周,,可見(jiàn)小鼠腹部膨大,。用注射器抽取腹水,即可獲得大量單克隆抗體,。(2)體外培養(yǎng)法將雜交瘤細(xì)胞置于培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng),。在培養(yǎng)過(guò)程中,雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生并分泌單克隆抗體,,收集培養(yǎng)上清液,,離心去除細(xì)胞及其碎片,即可獲得所需要的單克隆抗體,。但這種方法產(chǎn)生的抗體量有限,。各種新型培養(yǎng)技術(shù)和裝置不斷出現(xiàn),極大提高了抗體的生產(chǎn)量,。多克隆抗體可以用于區(qū)分同源蛋白質(zhì)在結(jié)構(gòu)和功能上的差異,。四川免疫抗體報(bào)價(jià)
由雜交瘤單細(xì)胞克隆所產(chǎn)生的單克隆抗體只能特異性地與抗原分子上的一個(gè)抗原決定簇結(jié)合,抗體成分均一,,抗體的結(jié)構(gòu),、氨基酸順序、特異性等都是一致的,,且在培養(yǎng)過(guò)程中只要不發(fā)生變異,,不同時(shí)間內(nèi)分泌的抗體都能保持同樣的結(jié)構(gòu)和功能,。用這種技術(shù)可按需要生產(chǎn)大量很純的單一抗體,這些是用普通血清學(xué)方法所不能達(dá)到的,。單克隆抗體的發(fā)展經(jīng)歷了鼠源性單克隆抗體,、嵌合性單克隆抗體、人源化單克隆抗體和全人源單克隆抗體四個(gè)階段,。特別是全人源單克隆抗體,,其可變區(qū)和恒定區(qū)都是人源的,這類(lèi)抗體藥物具有高親和力,、高特異性,、幾乎沒(méi)有毒副作用等優(yōu)點(diǎn),克服了動(dòng)物源抗體及嵌合抗體的各種缺點(diǎn),,成為調(diào)理性抗體藥物發(fā)展的必然趨勢(shì),;湖北富含脯氨酸11抗體供應(yīng)商單克隆抗體可用于針對(duì)惡性癥細(xì)胞的免疫調(diào)理。
IgE主要來(lái)源于呼吸道,、消化道黏膜下的漿細(xì)胞,,是一種親細(xì)胞性抗體,與反應(yīng),、寄生蟲(chóng)病與皮膚過(guò)敏有關(guān),。另有一種能與某種過(guò)敏原特異性結(jié)合的IgE,稱(chēng)特異性IgE,,對(duì)過(guò)敏性喘癥的診斷,,其特異性強(qiáng)、敏感性高,,對(duì)尋找變應(yīng)原有重要意義,。血清免疫球蛋白E(IgE) 正常值為0.1-0.9mg/L??侷gE強(qiáng)陽(yáng)性,,特異性IgE陰性。異常結(jié)果:血清中過(guò)敏原特異性IgE水平只能說(shuō)明個(gè)體對(duì)已測(cè)過(guò)敏原的敏感性,。但不能只依靠檢測(cè)血清中的過(guò)敏原特異性IgE水平,,而必須結(jié)合臨床病史和其它診斷手段才能確診過(guò)敏癥?!⌒枰獧z查的人群:患者屬過(guò)敏性體質(zhì),,對(duì)過(guò)敏原特異性檢測(cè)項(xiàng)不敏感。
研究表明,,孕婦血型及其血清中免疫抗體效價(jià)與新生兒溶血病的發(fā)生之間存在相關(guān)性,。新生兒溶血病是母嬰血型不合而引起的新生兒被動(dòng)免疫性溶血性疾病,以ABO血型系統(tǒng)很常見(jiàn),,其次是Rh血型系統(tǒng),。ABO血型抗體是以IgM抗體為主,,而此類(lèi)抗體是不能透過(guò)胎盤(pán)的,但血液中還有少量血型抗體以IgM和IgA的形式存在,,O型血人的抗-A,、抗-B抗體部分以IgG類(lèi)抗體存在,由于IgG抗體能夠透過(guò)胎盤(pán)與胎兒的紅細(xì)胞發(fā)生凝集反應(yīng)導(dǎo)致紅細(xì)胞破壞,。病情嚴(yán)重者可導(dǎo)致早產(chǎn),、流產(chǎn)及死胎等。而孕婦產(chǎn)前血清免疫抗體效價(jià)檢測(cè)能夠及早發(fā)現(xiàn)不規(guī)則抗體及異??贵w效價(jià)等,從而可以及時(shí)有效的給予對(duì)癥調(diào)理,。多克隆抗體可以用于動(dòng)物模型的研究,,以探索抗原的功能和影響。
抗體特性和功能:正常人血清lgD濃度很低,,儀占血清Ig總量的0.2%,。IgD可在個(gè)體發(fā)育的任何時(shí)間產(chǎn)生。5類(lèi)lg中,,IgD的鉸鏈區(qū)很長(zhǎng),,易被蛋白酶水解,故其半衰期很短(只3天),。lgD分為兩型:血清型IgD的生物學(xué)功能尚不清楚,;膜結(jié)合型IgD(mlgD)構(gòu)成BCR,是B細(xì)胞分化發(fā)育成熟的標(biāo)志,,未成熟B細(xì)胞只表達(dá)mlgM,,成熟B細(xì)胞可同時(shí)表達(dá)mlgM和mIgD,稱(chēng)為初始B細(xì)胞(naive B cell),?;罨腂細(xì)胞或記憶性B細(xì)胞表面的mlgD會(huì)逐漸消失。IgE是正常人血清中含量很少的Ig,,血清濃度極低,,約為5×10-5mg/ml。IgE主要由黏膜下淋巴組織中的漿細(xì)胞分泌,。其重要特征為糖含量較高,。IgE為親細(xì)胞抗體,其CH2和CH3結(jié)構(gòu)域可與肥大細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞上的IgE高親和力Fc受體結(jié)合,,引起I型超敏反應(yīng),。此外,IgE與機(jī)體的抗寄生蟲(chóng)免疫相關(guān),。多克隆抗體的制備過(guò)程需要嚴(yán)格的動(dòng)物倫理管理,,確保動(dòng)物的福利,。同種抗體價(jià)格
多克隆抗體的制備過(guò)程相對(duì)復(fù)雜,需要較長(zhǎng)時(shí)間和資源,。四川免疫抗體報(bào)價(jià)
抗體的結(jié)構(gòu):Porter等對(duì)血清IgG抗體的研究證明:Ig分子的基本結(jié)構(gòu)是由四肽鏈組成的,。即:由二條相同的分子量較小的肽鏈(輕鏈)和二條相同的分子量較大的肽鏈(重鏈)組成。輕鏈與重鏈?zhǔn)怯啥蜴I連接形成一個(gè)四肽鏈分子稱(chēng)為Ig分子的單體,;單體是構(gòu)成所有免疫球蛋白分子的基本結(jié)構(gòu),;所有抗體的單體都是四條肽鏈的對(duì)稱(chēng)結(jié)構(gòu),即:兩條糖基化重鏈(H)和兩條非糖基化輕鏈(L),;每條重鏈和輕鏈分為氨基端(N端)和羧基端(C端),。輕鏈和重鏈1、輕鏈(light chain,,L鏈)由214個(gè)氨基酸殘基組成,,通常不含碳水化合物,分子量為24kD,,有兩個(gè)由鏈內(nèi)二硫鍵組成的環(huán)肽,,L鏈可分為:Kappa(κ)與 lambda(λ)2個(gè)亞型。2,、重鏈(heavy chain,,H鏈)由450-550個(gè)氨基酸殘基組成,分子量55-75kD,,含糖數(shù)量不同,,4-5個(gè)鏈內(nèi)二硫鍵,可分為5類(lèi),,μ,、γ、α,、δ,、ε鏈,不同的H鏈與L鏈(κ或λ)組成完整的Ig分子,。分別稱(chēng)為:IgM,,IgG,IgA,,IgD和IgE,。四川免疫抗體報(bào)價(jià)