抗體獨特的生物學(xué)活性使其在疾病的診斷,、免疫防治及基礎(chǔ)研究中發(fā)揮作重要作用,。早在19世紀(jì)后期,人們就開始使用特異性抗原免疫動物制備相應(yīng)的抗血清,。1975年,,Kohler和Milstein建立了單克隆抗體(monoclonai antibody,,mAb)技術(shù),使規(guī)?;苽涓咛禺愋?、均質(zhì)性抗體成為可能。然而,,鼠源性mAb在人體反復(fù)免疫后出現(xiàn)的人抗鼠抗體(human anti-mouseantibody,,HAMA)很大程度上限制了mAb的臨床應(yīng)用。近年來,,隨著分子生物學(xué)的發(fā)展,,人們已經(jīng)可以通過抗體工程技術(shù)制備人一鼠嵌合抗體、人源化抗體或人源抗體,。多克隆抗體可以通過交叉反應(yīng)的方式檢測相關(guān)的抗原,。深圳多克隆抗體研發(fā)制造
IgE是什么?與過敏有什么關(guān)系,?IgE是如何參與過敏反應(yīng):IgE我們可以把它看做免疫系統(tǒng)的“守門員”,。過敏體質(zhì)的人在初次接觸外界環(huán)境中的某過敏原時,,免疫系統(tǒng)會“誤判”把這種過敏物質(zhì)當(dāng)做外來“入侵者”,身體就產(chǎn)生能夠識別此過敏原的IgE抗體(特異性IgE),,就像給過敏原打上了“壞蛋”標(biāo)簽,,使它們下次可以識別到該過敏原。IgE的尾巴則和效應(yīng)細胞(肥大細胞,、嗜堿性粒細胞)粘住,。上述過程稱為“致敏”。游離狀態(tài)的IgE抗體半衰期是2-3天,,如果長期不接觸變應(yīng)原,,致敏狀態(tài)可逐漸消失。深圳多克隆抗體研發(fā)制造多克隆抗體適用于各種實驗和臨床應(yīng)用,,如免疫染色、免疫印跡,、流式細胞術(shù)等,。
19世紀(jì)后期,Von Behring及其同事Kitasato研究發(fā)現(xiàn),,用白喉或破傷風(fēng)免疫動物后可產(chǎn)生具有中和有害素作用的物質(zhì),,稱之為antitoxin,隨后引入“抗體”一詞來泛指抗有害素類物質(zhì),??贵w(antibody,Ab)是B細胞接受抗原刺激后增殖分化為漿細胞所產(chǎn)生的糖蛋白,,主要存在于血清等體液中,是介導(dǎo)體液免疫的重要效應(yīng)分子,,能與相應(yīng)抗原特異性結(jié)合,,發(fā)揮免疫功能。1937年,,Tiselius和Kabat用電泳方法將血清蛋白分為白蛋白,、α1、α2,、β及γ球蛋白等組分,,并發(fā)現(xiàn)抗體主要存在于γ區(qū),因此抗體又被稱為γ球蛋白,。
研究表明,,孕婦血型及其血清中免疫抗體效價與新生兒溶血病的發(fā)生之間存在相關(guān)性。新生兒溶血病是母嬰血型不合而引起的新生兒被動免疫性溶血性疾病,,以ABO血型系統(tǒng)很常見,,其次是Rh血型系統(tǒng),。ABO血型抗體是以IgM抗體為主,而此類抗體是不能透過胎盤的,,但血液中還有少量血型抗體以IgM和IgA的形式存在,,O型血人的抗-A、抗-B抗體部分以IgG類抗體存在,,由于IgG抗體能夠透過胎盤與胎兒的紅細胞發(fā)生凝集反應(yīng)導(dǎo)致紅細胞破壞,。病情嚴(yán)重者可導(dǎo)致早產(chǎn)、流產(chǎn)及死胎等,。而孕婦產(chǎn)前血清免疫抗體效價檢測能夠及早發(fā)現(xiàn)不規(guī)則抗體及異??贵w效價等,從而可以及時有效的給予對癥調(diào)理,。多克隆抗體的制備過程需要嚴(yán)格的動物倫理管理,,確保動物的福利。
抗體特性和功能:IgG于出生后3個月開始合成,,3~5歲接近成人水平,。IgG是血清和體液中含量很高的抗體,占血清總Ig的75%~80%,。人lgG有4個亞類,,根據(jù)其在血清中濃度的高低排序,分別為IgG1,、IgG2,、IgG3、IgG4,。IgG的半衰期為20~23天,,是再次免疫應(yīng)答產(chǎn)生的主要抗體,,其親和力高,,在體內(nèi)分布普遍,具有重要的免疫效應(yīng),,是機體抗傳染的“主力軍”,。IgG1、IgG2和IgG3可以穿過胎盤屏障,,在新生兒抗傳染免疫中起重要作用。IgG1,、lgG2和IgG3能通過經(jīng)典途徑活化補體,,并可與巨噬細胞、NK細胞表面Fc受體結(jié)合,,發(fā)揮調(diào)理作用,、ADCC作用等;人IgGl,、IgG2和IgG4可通過其Fc段與葡萄球菌蛋白A(SPA)結(jié)合,,借此可純化抗體,并用于免疫診斷,。某些自身抗體如抗甲狀腺球蛋白抗體、抗核抗體,,以及引起Ⅱ,、Ⅲ型超敏反應(yīng)的抗體也屬于IgG;多克隆抗體具有較高的多樣性,,可以覆蓋更普遍的抗原特異性,。河南IgA抗體費用
單克隆抗體的生產(chǎn)過程需要大量的細胞培養(yǎng)和純化步驟,。深圳多克隆抗體研發(fā)制造
抗體可變區(qū):重鏈和輕鏈的V區(qū)分別稱為VH和VL,。VH和VL中各含有3個氨基酸組成和排列順序高度可變的區(qū)域,稱為高變區(qū)(hypervariable region,,HVR)或互補決定區(qū)(complementarity determining region,CDR),, 包括HVR1(CDR1),、HVR2(CDR2)和HVR3(CDR3),其中,,HVR3(CDR3)變化程度更高,。VH的3個高變區(qū)分別位于29~31、49~58和95~102位氨基酸,,而VL的3個高變區(qū)分別位于28~35,、49~56和91~98位氨基酸。VH和VL的3個CDR共同組成Ig的抗原結(jié)合部位(antigen-binding site),,決定抗體的特異性,,是抗體識別及結(jié)合抗原的部位。在V區(qū)中,,CDR之外區(qū)域的氨基酸組成和排列順序相對保守,,稱為骨架區(qū)(framework region,F(xiàn)R),。VH或VL各有四個骨架區(qū),,分別用FR1、FR2、FR3和FR4表示,。深圳多克隆抗體研發(fā)制造