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Millipore超濾濃縮管設(shè)有反轉(zhuǎn)離心回收設(shè)計(jì)使蛋白樣品,,特別是小體積樣品回收,避免吸頭吸取造成的樣品丟失或操作錯誤,; 其中0.5mL,、2mL 和 70mL 超濾管設(shè)計(jì)為反轉(zhuǎn)回收模式樣品吸附損失小,; 合理的死體積設(shè)計(jì),,避免樣品離干而降低回收率; 能兼顧高回收率和操作的方便性及標(biāo)準(zhǔn)化,,并滿足下游各種應(yīng)用的要求,,使研究者處理樣品時倍感輕松。 有效濃縮同時保證高的蛋白回收率 設(shè)計(jì)精巧,、緊湊,,一體化結(jié)構(gòu)確保不會發(fā)生滲漏,即使是極為珍貴的樣品也能非常放心地操作,。 超濾濃縮管代理銷售哪家比較靠譜,。金山區(qū)Merck超濾濃縮管報(bào)價
Amicon? Pro純化超濾管簡明操作指南 親和純化 用于純化GST?Tag,His?Tag等重組表達(dá)蛋白及抗體,,適合~0.5 mL裂解液操作 6次低速離心,,總耗時~100分鐘(含65分鐘孵育時間) 1. 在Amicon? Pro上樣池中加入200μL親和純化樹脂(50%懸濁液)和1.5 mL漂洗緩沖液。 1,000×g離心1 min,。 2. 加入0.5 mL樣品并與樹脂吸打混勻,。孵育1 h,其間可溫和攪動促進(jìn)結(jié)合。 3. 1,000×g離心1 min 以去除未結(jié)合雜質(zhì),。 4. 加入1.5 mL漂洗緩沖液,,1,000×g離心1 min。 外泌體用于細(xì)胞學(xué)或動物實(shí)驗(yàn)前的無菌處理 已經(jīng)經(jīng)過上述方法制備的外泌體在進(jìn)行細(xì)胞或動物實(shí)驗(yàn)之前還需進(jìn)行一步除菌過濾,,這個時候考慮到得率,,應(yīng)該采用離心法處理,以減少過濾時的外泌體樣品損失,。 超濾方法純化具體操作步驟舉例 Amicon? Ultra-15 超濾管 (10 kDa MWCO) 用Steriflip?真空抽濾對樣品進(jìn)行澄清[目錄號SCGP00525; 0.22 μm Millipore Express PLUS (PES)膜]金山區(qū)Merck超濾濃縮管報(bào)價一個好的超濾濃縮管代理銷售需要具備哪些特點(diǎn)您知道嗎,?
濃度:當(dāng)需要截留的樣品濃度很低時,通量通常不受濃度影響,。操作過 程中,,隨著溶質(zhì)濃度的升高,增加的粘滯性和極化將導(dǎo)致通量降低,。 溫度:粗體,,作為獲得壓力、濃度一樣的詞條通常增加操作時的溫度可 以提高超濾效率,。每增加 1℃蛋白擴(kuò)散率增加 3-3.5%,,同時溶液粘度降低。 實(shí)踐中一般是以樣品和設(shè)備能耐受的比較高溫度來操作,。 pH:改換溶液和 / 或 pH 常常改變分子結(jié)構(gòu),,蛋白尤其如此。在蛋白的 pI 值蛋白會沉淀,,產(chǎn)生堵塞和得率損失,。 污垢:溶液中除了目的分子造成的濃差極化,還有其它小顆粒和分子會 在膜上富集和沉淀,,逐漸堆積在膜孔上或膜孔結(jié)構(gòu)中,,形成結(jié)晶和沉淀。
7次低速離心,,總耗時~100分鐘(含60分鐘孵育時間) 1. 在Amicon? Pro上樣池中加入200μL親和純化樹脂(50%懸濁液)和1.5 mL漂洗緩沖液,。 1,000×g離心1 min。 2. 加入0.5 mL樣品并與樹脂吸打混勻,。孵育1 h,,其間可溫和攪動促進(jìn)結(jié)合。 3. 1,000×g離心1 min 以去除未結(jié)合雜質(zhì),。 4. 加入1.5 mL漂洗緩沖液,,1,000×g離心1 min。 5. 上樣池下端接上Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管(可選用50k MWCO型號),。 6. 加入1 mL洗脫緩沖液與樹脂混勻,。4,000×g離心5 min,。 7. 加入200μL 中和緩沖液。4,000×g離心15 min,。 8. 加上**終需要的緩沖液1.5 mL,。4,000×g離心15 min,置換緩沖液的同時進(jìn)行濃縮,。 9. 倒轉(zhuǎn)Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管,,1,000×g離心回收純化和濃縮好的蛋白。超濾濃縮管的好處都有很多,。
離心方式的超濾方法進(jìn)行溶液置換也被稱為“滲濾”,,操作時樣品首先被濃縮,,繼而加入新的溶液,,再次濃縮時,原溶液已經(jīng)被換成選定的溶液,。 化學(xué)相容性與溶出 樣品的化學(xué)背景有時很多樣而復(fù)雜,,過濾的過程中很重要的一點(diǎn)是操作過程不應(yīng)給樣品帶來新的污染。所以濾膜和裝置與樣品接觸的其它部分都不能與樣品中的化學(xué)成分發(fā)生反應(yīng)而產(chǎn)生溶出污染,。關(guān)于默克密理博各種微濾,、超濾產(chǎn)品的化學(xué)相容性請參考產(chǎn)品使用說明書或垂詢技術(shù)支持專線 ?;厥章始捌渲匾猿瑸V的**終目的常常是很大程度地回收目標(biāo)溶質(zhì),,但膜的很多特性會對這一目的產(chǎn)生影響。影響回收的因素包括:? 標(biāo)稱分子量限制(NMWL)/ 核酸截留分子量(NCO)? 截留 ? 濃差極化 ? 通量Millipore超濾濃縮管用于蛋白超濾,、濃縮,、除鹽!青浦區(qū)離心濃縮管規(guī)格
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特點(diǎn)與優(yōu)點(diǎn): 特別的反轉(zhuǎn)離心回收設(shè)計(jì),,滯留體積很小,樣品損失少,, 樣品回收率通常>90% 濃縮倍數(shù)達(dá)到50-200倍 Ultracel?再生纖維素膜和聚丙烯外殼將吸附降至比較低 特別設(shè)計(jì)的死體積防止離干,,保證樣品回收率和活性 有四種截留分子量供選擇 法醫(yī)gDNA鑒定、PCR產(chǎn)物純化與小分子分離 Microcon? 超濾管 Microcon?為橫膜式超濾管,,沒有死體積,,用于大分子樣品的濃縮、脫 鹽,、換液都非常高效方便,。實(shí)際應(yīng)用中還常用于大分子與其它分子的分 離,比如蛋白酶切后的處理及藥物結(jié)合率分析等等,。金山區(qū)Merck超濾濃縮管報(bào)價