有關詳細信息,,請參見表2,?!癫唤ㄗh在SNAP i.d. @ 2.0系統(tǒng)中剝離印跡,。印跡已被剝離可以從阻塞步驟開始在SNAP i.d.o 2.0系統(tǒng)中對遵循標準協(xié)議的系統(tǒng)進行重新探測,?!袢绻恍枰獎冸x(例如,,如果使用其他二抗進行檢測),,則可以重新檢測印跡快速清洗后,,立即在SNAP i.d.9 2.0系統(tǒng)中使用,。 優(yōu)化準則抗體已經開發(fā)了優(yōu)化指南,以使用戶能夠轉換所用抗體的濃度將標準免疫檢測測定法濃縮至適用于SNAP i.d. @ 2.0系統(tǒng)的濃度,。大多數用戶會能夠使用相同量的抗體,,但與標準品相比,體積更小,,濃度更高免疫檢測,。但是,當使用擴展抗體方案(第12頁)時,,可以使用相同的方法通常用于標準免疫檢測的一抗的濃度,,體積和時間,其次是較高濃度的二抗,,持續(xù)時間較短,。表1.如何根據SNAP i.d.9益啟生物公司帶您了解樣本制備儀詳情。普陀區(qū)Merck細胞分析儀Merck儀器
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x @ -FAgo過濾器(或等效過濾器)建議在保溫瓶和真空源之間使用,例如o保護真空源免受污染,?!駥⒄婵掌窟B接到真空源的真空管●前肢●封閉劑,例如脫脂/低脂干奶(0.5%以下),,酪蛋白,,牛血清白蛋白(BSA)或其他市售的封閉劑,例如blok * -CH緩沖液(請參閱表5)抗體(單克隆和/或多克?。?,檢測試劑●洗滌緩沖液:Tris或磷酸鹽緩沖鹽溶液,pH 7.4,,補充了Tween @ 20表面活性劑(TBST)或PBST)●轉移蛋白的印跡吸筆座尺寸比較大印跡尺寸(厘米)多印跡4.5 x8.4小型的7.5 x 8.48.5 x 13.5,。 一般準則●如果蛋白質已經轉移到已經干燥的PVDF膜上,請用100%重新潤濕印跡甲醇,,然后在組裝前用蒸餾水沖洗,。如果蛋白質已轉移至硝酸纖維素膜干燥后,用蒸餾水重新益啟生物公司帶您了解細胞跨膜電阻儀詳情,。
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2.0系統(tǒng)計算SNAP i.d.9 2.0系統(tǒng)所需的抗體濃度用于標準免疫檢測的濃度標準SNAP i.d.o 2.0免疫檢測免疫檢測多印跡迷你印跡Midi污點_Ab濃度1毫克/毫升1毫克/毫升1毫克/毫升1毫克/毫升所需抗體量_ 1微克0.25微克0.5微克1微克使用的抗體量30毫升2.5毫升5毫升10毫升比較終抗體稀釋1:30,0001:10,0001:10,0001:10,000使用的抗體庫存1微升0.25微升0.5微升1微升由于每種抗體都是只有一個的,,并且檢測試劑的靈敏度各不相同,,因此可能有必要進行調整抗體或抗原濃度,使用的檢測試劑的類型或靈敏度或印跡X射線曝光時間,。請注意,,本指南只作為開發(fā)比較終抗體的起點濃度以獲得所需的性能。表2.封閉,,抗體和洗滌的建議體積SNAP i.d.o 2.0SNA普陀區(qū)Merck細胞分析儀Merck儀器