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細(xì)胞屬性的判定,,免疫組化也可以進(jìn)行這方面的臨床應(yīng)用,。通過(guò)特定抗體標(biāo)記出細(xì)胞內(nèi)相應(yīng)的抗原成分,來(lái)判定細(xì)胞的屬性,,確定cancer的來(lái)源,。如細(xì)胞角蛋白(CK)是上皮性標(biāo)記,,CK陽(yáng)性提示cancer為上皮源性cancer;降鈣素抗體是甲狀腺髓樣cancer特有的標(biāo)記;甲狀腺球蛋白(Tg)陽(yáng)性提示是甲狀腺濾泡性cancer;前列腺特異性抗原(PSA)只見于前列腺上皮;膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)陽(yáng)性則提示膠質(zhì)cancer;CD20和CD79a陽(yáng)性則提示B細(xì)胞淋巴瘤;平滑肌肌動(dòng)蛋白(Actin)陽(yáng)性提示cancer為平滑肌源性;胃腸道間質(zhì)瘤中原cancer基因蛋白產(chǎn)物CD117陽(yáng)性;血管源性cancer中內(nèi)皮細(xì)胞標(biāo)記物CD34陽(yáng)性等等。如果您需要做實(shí)驗(yàn)外包,,可以與我們英瀚斯生物進(jìn)行聯(lián)系。免疫組化流程是什么樣的,?河北大鼠免疫組化注意事項(xiàng)
免疫組化在在病理診斷中,,隨著各種抗體新的用途不斷被發(fā)現(xiàn)及越來(lái)越多的新型抗體的出現(xiàn),免疫組化在cancer診斷及鑒別診斷,、分類,、預(yù)后判斷等方面產(chǎn)生了重大的影響。由于免疫組化技術(shù)也存在一些局限性,因此,,深入研究免疫組化原理和技術(shù),,并努力實(shí)現(xiàn)規(guī)范化的操作,才能充分發(fā)揮免疫組化在病理的診斷及鑒別診斷,、判斷預(yù)后,、指導(dǎo)臨床醫(yī)療中的作用。
觀察組織切片中抗原的數(shù)量及其在組織中的分布情況,,對(duì)抗原進(jìn)行定位,、定性及定量的研究,稱為免疫組織化學(xué),,由于抗原與抗體特異性結(jié)合,,因此通過(guò)免疫組化使標(biāo)記抗體的顯色劑(酶、熒光素,、同位素,、金屬離子等等)顯色來(lái)確定組織細(xì)胞內(nèi)抗原(多肽和蛋白質(zhì))。IHC所用標(biāo)本主要為兩大類:組織標(biāo)本和細(xì)胞標(biāo)本,,其中制作組織標(biāo)本更常用,、更基本的方法是石蠟切片。石蠟切片對(duì)于組織形態(tài)保存好,,有利于各種染色對(duì)照觀察,,而且能長(zhǎng)期保存;石蠟切片中使用的甲醛固定劑對(duì)組織內(nèi)抗原暴露有一定的影響,但可進(jìn)行抗原修復(fù),,是免疫組化中優(yōu)先選擇的組織標(biāo)本制作方法,。 山西免疫組化要多少錢有沒(méi)有推薦的免疫組化外包公司?
關(guān)于免疫組化,,抗體和抗原之間的結(jié)合具有高度的特異性,,免疫組織化學(xué)正是利用了這一原理。先將組織或細(xì)胞中的某種化學(xué)物質(zhì)提取出來(lái),,以此作為抗原或半抗原,,通過(guò)免疫動(dòng)物后獲得特異性的抗體,再以此抗體去探測(cè)組織或細(xì)胞中的同類的抗原物質(zhì),。由于抗原與抗體的復(fù)合物是無(wú)色的,,因此還必須借助于組織化學(xué)的方法將抗原抗體結(jié)合的部位顯示出來(lái),以其達(dá)到對(duì)組織或細(xì)胞中的未知抗原進(jìn)行定性,,定位或定量的研究,。南京英瀚斯生物科技有限公司有設(shè)計(jì)免疫組化的實(shí)驗(yàn)哦!如果您對(duì)此有希望了解更多,,可以與我們聯(lián)系,!
免疫組化的抗原修復(fù)
很多抗原的可視性可以通過(guò)抗原修復(fù)來(lái)提高,,抗原修復(fù)可以打破福爾馬林固定時(shí)形成的蛋白質(zhì)交聯(lián),從而使被掩藏的抗原顯現(xiàn)出來(lái),??乖迯?fù)技術(shù)包括不同時(shí)間長(zhǎng)度的加熱或者利用蛋白酶來(lái)做酶消化,例如蛋白酶K,,胰蛋白酶或胃蛋白酶,。加熱的方法通常會(huì)用到微波爐,高壓鍋,,蒸箱或水浴,。將樣品在接近100°C高溫加熱20分鐘后再冷卻同等的時(shí)間。**常用的抗原修復(fù)液有a)檸檬酸鹽緩沖劑,pH6.0,b)Tris-EDTA,pH9.0和c)EDTA,pH8.0.如需要可用檸檬酸鹽緩沖劑做抗原修復(fù):檸檬酸鹽緩沖劑配方:10mM檸檬酸鈉,0.05%Tween-20,pH6.0或10mM檸檬酸,0.05%Tween-20,pH6.0將含有檸檬酸鈉或檸檬酸鹽緩沖劑的染色盤放到蒸箱或者水浴中,,預(yù)熱到95-100°C,。將切片浸沒(méi)于染色盤中。蓋子虛掩,,孵育20-40分鐘(研究者需自己決定比較好的孵育時(shí)間),。關(guān)掉蒸箱或水浴,將染色盤置于室溫下,,讓切片冷卻20分鐘,。在TBS-Tween-20中漂洗切片2次,每次2分鐘,。開始封閉步驟,。 免疫組化失敗的原因?
什么是免疫組化,?免疫組化的原理是什么,?
1、定義:用標(biāo)記的特異性抗體對(duì)組織切片或細(xì)胞標(biāo)本中某些化學(xué)成分的分布和含量進(jìn)行組織和細(xì)胞原位定性,、定位或定量研究,,這種技術(shù)稱為免疫組織化學(xué)(immunohistochemistry)技術(shù)或免疫細(xì)胞化學(xué)(immunocytochemistry)技術(shù)。
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2、原理:根據(jù)抗原抗體反應(yīng)和化學(xué)顯色原理,,組織切片或細(xì)胞標(biāo)本中的抗原先和一抗結(jié)合,,再利用一抗與標(biāo)記生物素、熒光素等的二抗進(jìn)行反應(yīng),,前者再用標(biāo)記辣根過(guò)氧化物酶(HRP)或堿性磷酸酶(AKP)等的抗生物素(如鏈霉親和素等)結(jié)合,,通過(guò)呈色反應(yīng)或熒光來(lái)顯示細(xì)胞或組織中化學(xué)成分,在光學(xué)顯微鏡或熒光顯微鏡下可清晰看見細(xì)胞內(nèi)發(fā)生的抗原抗體反應(yīng)產(chǎn)物,,從而能夠在細(xì)胞爬片或組織切片上原位確定某些化學(xué)成分的分布和含量,。 關(guān)于免疫組化,你想知道的都在這里,!河北大鼠免疫組化注意事項(xiàng)
病理報(bào)告中的免疫組化到底有什么作用?河北大鼠免疫組化注意事項(xiàng)
確定來(lái)源不明的轉(zhuǎn)移瘤的原發(fā)部位,,臨床上免疫組化也可以進(jìn)行操作。對(duì)于來(lái)源不明的轉(zhuǎn)移瘤,,用免疫組化技術(shù)有助于確定惡性cancer的組織學(xué)來(lái)源,,進(jìn)一步確定原發(fā)部位。如角蛋白抗體(CK20)在胃腸道cancer,、膽管cancer,、胰腺cancer中陽(yáng)性,而在肺cancer,、乳腺cancer,、腎cancer中陰性;Tg陽(yáng)性可考慮甲狀腺轉(zhuǎn)移;波形蛋白(Vimentin)陽(yáng)性支持肉瘤的診斷;前列腺特異性抗原(PSA)陽(yáng)性可考慮前列腺轉(zhuǎn)移;甲狀腺球蛋白陽(yáng)性可考慮甲狀腺濾泡細(xì)胞cancer;肌動(dòng)蛋白(Actin)、肌球蛋白(Myosin),、結(jié)蛋白(Desmin),、肌紅蛋白(Myoglobin)陽(yáng)性可考慮橫紋肌肉瘤;S-100蛋白陽(yáng)性支持黑色素瘤的診斷;等等這些都為cancer的醫(yī)療及預(yù)后提供了依據(jù)。河北大鼠免疫組化注意事項(xiàng)