免疫組化指的是根據(jù)抗體與抗原特異結(jié)合的原理來檢測組織切片中的抗原(如蛋白),。immuno的詞根來自操作中所使用的抗體,,而histo意味著組織。另一種類似的技術(shù)是免疫細(xì)胞化學(xué)(Immunocytochemistry,,簡稱ICC),。這兩個詞大家經(jīng)常混著用,,看著好像差不多,,但實際上還是有點區(qū)別。IHCvsICC對于IHC,,組織是來自患者或動物,,經(jīng)過冷凍或石蠟包埋。將這些組織制成約4μm厚的切片,,封片后再處理,。通過這種方法,研究人員可觀察細(xì)胞組分的定位,,同時維持周圍組織的原先結(jié)構(gòu),。對于ICC,大部分細(xì)胞外基質(zhì)及其他基質(zhì)組分被去除,,只剩下整個細(xì)胞來染色,。ICC的來源可以是細(xì)胞懸液,來自患者或動物(如血涂片,、拭子等),,或在實驗室中進(jìn)行的組織培養(yǎng)細(xì)胞系。 關(guān)于免疫組化,,你想知道的都在這里,!寧夏大鼠免疫組化怎么樣
免疫組化應(yīng)該選擇石蠟切片還是冰凍切片,?
(1)要求做冰凍切片的不一定能做石蠟切片,這是***我向一老師請教得出的結(jié)論,。因為作石蠟切片時要高溫烤片,,可能會破壞組織的抗原性,如果組織的抗原性較穩(wěn)定,,則可作石蠟切片,;但是要求做石蠟切片的,可作冰凍切片,。
(2)冰凍切片的優(yōu)點是能夠較好的保存組織的抗原免疫活性,,做免疫組化時不需抗原修復(fù)這一步。缺點是細(xì)胞內(nèi)易形成冰晶而破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu),,可能會使抗原彌散,;切片厚度較石蠟的厚,做的片子沒石蠟的漂亮,。當(dāng)你買一抗時,,目錄上都寫著做什么樣的切片,如果它寫著只能做冰凍,,就不能做石蠟,,如寫著兩者都可,那就都能做,。
(3)石蠟切片的優(yōu)點可以保持組織細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu),,且容易存放在室溫,而冰凍切片比較麻煩,,一定要存在-80度的低溫冰箱中,,尤其是用來做原位雜交的的切片,為了防止RNA降解,,保存一貫很重要,。由于石蠟切片可以切到4微米左右,所以原位雜交探針容易滲透到組織中去,,容易成功,,而且得到的顏色/形態(tài)都較冰凍切片好。
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免疫組化染色切片的好壞直接影響著病理醫(yī)生對其染色結(jié)果的判斷,,進(jìn)而影響病理診斷,,所以制作一張良好的免疫組化切片至關(guān)重要,它需要病理醫(yī)生與病理技師兩者間的相互協(xié)調(diào),,密切配合和共同努力,,病理醫(yī)生選擇抗體,,設(shè)置對照,判讀結(jié)果,,指導(dǎo)技術(shù);而技術(shù)人員進(jìn)行實驗操作,,保證染色質(zhì)量。在免疫組化切片的制作過程存在多個環(huán)節(jié),,每一環(huán)節(jié)的失誤都可能影響檢測結(jié)果,,如抗原保存,蛋白酶消化,,增強(qiáng)技術(shù)及對抗體的管理,、使用和試劑的濃度等等,因此制作一張高質(zhì)量的免疫組織化學(xué)切片是多方面相互配合的結(jié)果,。
免疫組化分類中,,免疫熒光方法,英瀚斯生物為您進(jìn)行介紹,。一開始建立的免疫組織化學(xué)技術(shù),。它利用抗原抗體特異性結(jié)合的原理,,先將已知抗體標(biāo)上熒光素,,以此作為探針檢查細(xì)胞或組織內(nèi)的相應(yīng)抗原,在熒光顯微鏡下觀察,。當(dāng)抗原抗體復(fù)合物中的熒光素受激發(fā)光的照射后即會發(fā)出一定波長的熒光,,從而可確定組織中某種抗原的定位,進(jìn)而還可進(jìn)行定量分析,。由于免疫熒光技術(shù)特異性強(qiáng),、靈敏度高、快速簡便,,所以在臨床病理診斷,、檢驗中應(yīng)用比較廣。病理免疫組化多少錢,?
關(guān)于免疫組化,,抗體和抗原之間的結(jié)合具有高度的特異性,免疫組織化學(xué)正是利用了這一原理,。先將組織或細(xì)胞中的某種化學(xué)物質(zhì)提取出來,,以此作為抗原或半抗原,通過免疫動物后獲得特異性的抗體,,再以此抗體去探測組織或細(xì)胞中的同類的抗原物質(zhì),。由于抗原與抗體的復(fù)合物是無色的,因此還必須借助于組織化學(xué)的方法將抗原抗體結(jié)合的部位顯示出來,,以其達(dá)到對組織或細(xì)胞中的未知抗原進(jìn)行定性,,定位或定量的研究,。南京英瀚斯生物科技有限公司有設(shè)計免疫組化的實驗哦!如果您對此有希望了解更多,,可以與我們聯(lián)系,!免疫組化可以看什么?山西免疫組化
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免疫組化如何才能充分脫蠟,?
(1)蠟不溶于水,如果脫蠟不干凈,,少許蠟存留于切片上,,將會引起染色不均勻、陽性物時隱時現(xiàn),、真假難辨,、背景染色增加等。為了解決上述的問題,,切片在染色前必須徹底脫蠟,,目前用于脫蠟的試劑主要是二甲苯,因它脫蠟力強(qiáng),,脫蠟時間較短,;
(2)脫蠟的時間要根據(jù)季節(jié),室溫和試劑的新鮮謀面是在不同,。如果在夏天,,室溫較高,脫蠟試劑也新鮮,,則脫蠟時間不需很多,,3-5分鐘就已足夠。如果在冬天,,室溫較低,,脫蠟試劑也較陳舊,則脫蠟時間需要延長,,10-20分鐘或更長,。
(3)當(dāng)天切的切片,燒烤2小時后進(jìn)行染色,,切片帶有溫度進(jìn)行脫蠟這將可加速脫蠟的過程,,如果預(yù)先切好烤好的切片,在染色前,,還必須對切片進(jìn)行加溫10-20分鐘,,然后再行脫蠟,這樣脫蠟速度加快,,效果魁偉更好,??傊僮鲿r應(yīng)根據(jù)不同的季節(jié),,不同的室溫,,不同的試劑來決定,脫蠟的時間,,原則上是要徹底,、干凈、完全地脫去切片上的蠟,。
切片染色更多問題匯總,,關(guān)注英瀚斯生物。 寧夏大鼠免疫組化怎么樣