HE染色全名蘇木精—伊紅染色法,，屬于化學(xué)染色法,，其主要依靠蘇木精染液為堿性，主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍(lán)色,；伊紅為酸性染料,，主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色。實(shí)驗(yàn)過程：1,、石蠟切片脫蠟至水：依次將切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-無水乙醇Ⅰ5min-無水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min,，自來水洗。2,、蘇木素染色：切片入蘇木素染液染3-5min,，自來水洗，分化液分化,，自來水洗,，返藍(lán)液返藍(lán)，流水沖洗,。3,、伊紅染色：切片依次入85%、95%的梯度酒精脫水各5min,，入伊紅染液中染色5min,。4、脫水封片：切片依次放入無水乙醇I5min-無水乙醇II5min-無水乙醇Ⅲ5min-二甲Ⅰ5min-二甲苯Ⅱ5min透明,，中性樹膠封片,。5、顯微鏡鏡檢,，圖像采集分析,。結(jié)果判讀：細(xì)胞核呈藍(lán)色，細(xì)胞質(zhì)呈紅色HE染色規(guī)范化流程以及注意事項(xiàng),。江蘇結(jié)果客觀的HE染色檢測

HE染色細(xì)胞質(zhì)過染分析及應(yīng)對原因：（1）伊紅染色液濃度太高,，特別是焰紅燃料、四溴四氯熒光素鈉的存在,；（2）切片在伊紅染色時(shí)間過長,；（3）切片在伊紅染色后經(jīng)乙醇脫水步驟時(shí)過的太快,，而使乙醇分化伊紅的作用不能產(chǎn)生。對策：適當(dāng)稀釋伊紅染色液,，減少伊紅染色時(shí)間,，或者使切片在乙醇脫水等步驟時(shí)，停留時(shí)間相對均勻,。同樣,，也要檢查切片的厚度是否合適。切片中出現(xiàn)藍(lán)黑色沉淀物分析及應(yīng)對原因：蘇木精染色液中的金屬膜,，黏附在玻片上。對策：每天染色前仔細(xì)過濾蘇木精染色液,，或建議使用半氧化蘇木精染色液,，如Gill蘇木精染色液,可以避免過多的金屬膜產(chǎn)生。陜西性價(jià)比高的HE染色分析HE染色是組織學(xué),、病理學(xué)教學(xué)與科研中比較基礎(chǔ),、使用比較普遍的技術(shù)方法之一。

HE染色分化作用：染色后,，用某些特定的溶液將組織過多結(jié)合的染色劑脫去,，這個(gè)過程稱為分化作用，所用的溶液稱為分化液,。在HE染色中用0.5%鹽酸乙醇作為分化液,，因酸能破壞蘇木精的醌型結(jié)構(gòu)，使組織與色素分離而褪色,。經(jīng)蘇木精染色后,，必須用0.5%鹽酸乙醇分化，使細(xì)胞核過多結(jié)合的蘇木精染料和細(xì)胞漿吸附的蘇木精染料脫去,，在進(jìn)行伊紅染色,，才能保證細(xì)胞核與細(xì)胞漿染色的分明。因此,，在HE染色中分化是極為關(guān)鍵的一步,。返藍(lán)作用：分化之后，蘇木精在酸性條件下處于紅色離子狀態(tài),，呈紅色,，在堿性條件下處于藍(lán)色離子狀態(tài)，呈藍(lán)色,。組織切片經(jīng)0.5%鹽酸乙醇分化后呈紅色或粉紅色,，故分化之后，立即用水出去組織切片上的酸而終止分化,，再用弱堿性水（0.2%氨水）使蘇木精染上的細(xì)胞核呈現(xiàn)藍(lán)色,，這個(gè)過程稱為返藍(lán)作用或藍(lán)化作用,。另外用自來水浸洗也可使細(xì)胞核返藍(lán)，但所需時(shí)間較長,。

HE染色常見問題：切片染色不均勻,，有片狀的弱著**存在答：（1）取材時(shí)組織太厚，固定過久,，導(dǎo)致深部組織固定不佳,，而表淺組織過度固定，而透明,、脫水,、浸蠟均是如此，這樣在后期染色時(shí)就會(huì)出現(xiàn)染色不均勻,。應(yīng)該將厚的組織剖開固定,。（2）制片過程有問題，切片厚薄不一,，或者有刀痕,，或組織與玻片間存在氣泡。同一張切片厚薄不一,，一般都是在制片時(shí),，刀片固定不佳或刀片鈍或刀片與組織角度不佳（一般比較好角度為5°）（3）脫蠟前未烘烤，脫蠟時(shí)間過短或脫蠟液使用過久,，導(dǎo)致脫蠟不徹底,。（4）染色液過少，著色不均勻,；或染色時(shí)部分組織干涸而另一部分濕潤,，這樣會(huì)導(dǎo)致組織吸附染料的能力不一。（5）分化不當(dāng),。南京英瀚斯,，專業(yè)的病理染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺。HE染色的基本原理和結(jié)果分析,。

HE 染色是病理的主要常規(guī)染色,，其命名是因?yàn)橹饕褂玫膬煞N試劑分別為Hematoxylin與Eosin Y，藉由電荷與吸附性的差異,，組織結(jié)構(gòu)對不同染料的結(jié)合程度不同,，我們可以發(fā)現(xiàn)Hematoxylin呈色在細(xì)胞核，Eosin Y則表現(xiàn)在細(xì)胞質(zhì)與間質(zhì),，染色優(yōu)良的片子可以幫助我們在顯微鏡下看到清晰的細(xì)胞型態(tài)與變化,。染色步驟依試劑提供者的建議而有所差異，而且每個(gè)實(shí)驗(yàn)室需要的顏色深淺不一，使用者可以依自己的需求另行調(diào)整,，以下是力沛有限公司建議的HE染色步驟HE染色取材,、染色以及分析方法介紹。吉林結(jié)果客觀的HE染色檢測

骨組織HE染色的操作流程,。江蘇結(jié)果客觀的HE染色檢測

HE染色伊紅溶液中加入少量的冰醋酸(一般小于10%就行),，可改變組織等電點(diǎn)，促進(jìn)伊紅與胞漿蛋白質(zhì)結(jié)合,，其本身不參與染色的反應(yīng),。當(dāng)蘇木素染色效能極高，很短時(shí)間就導(dǎo)致核漿共染時(shí),，可適當(dāng)?shù)靥砑颖姿?一般不超過2%),，抑制蘇木素染色效能，方便控制染色時(shí)間,，同時(shí)也能提高蘇木素染色的清晰度?，F(xiàn)在有商用的HE染色液賣，但是質(zhì)量參差不齊,。如果課題組較大,，完全可以自己配制,，效果也挺好,。配制為乙酸濃度5%-7.5%和鹽酸濃度為0.5%-1%的蘇木素溶液放置一周，即可完全成熟,，染色效果好,，氧化膜和結(jié)晶都很少(一般蘇木素中酸度越低越容易產(chǎn)生氧化膜和結(jié)晶，這也是提示更換蘇木素的標(biāo)志之一),。江蘇結(jié)果客觀的HE染色檢測