HE染色石蠟和冰凍切片樣本的處理,，樣品處理：a.對(duì)于石蠟切片:二甲苯中脫蠟5-10分鐘;換用新鮮的二甲苯,，再脫蠟5-10分鐘;無水乙醇5分鐘;90%乙醇2分;70%乙醇2分鐘;蒸餾水2分鐘.b.對(duì)于冰凍切片：蒸餾水2分鐘。c對(duì)于培養(yǎng)細(xì)胞：用4%多聚甲醛固定10分鐘以上,。蒸餾水洗滌2分鐘,。換用新鮮的蒸餾水，再洗滌2分鐘,。蘇木素伊紅(HE)染色對(duì)于上述處理好的樣品：蘇木素染色液染色5-10分鐘(可以根據(jù)染色結(jié)果和要求調(diào)整時(shí)間),。浸自來水中沖洗去多余的染色液，約10分鐘,。蒸餾水再洗滌一遍(數(shù)秒鐘),。95%乙醇5秒。伊紅染色液染色30秒-2分鐘(可以根據(jù)染色結(jié)果和要求調(diào)整時(shí)間),。此時(shí),，如果需要直接觀察，可以用70%乙醇洗滌2次,。如需脫水,、透明后封片按后續(xù)步驟進(jìn)行，70%乙醇洗滌后仍可按照后續(xù)步驟進(jìn)行脫水,、透明和封片處理,。HE染色觀察細(xì)胞形態(tài)變化。四川專業(yè)的HE染色分析

HE染色全名蘇木精—伊紅染色法,，屬于化學(xué)染色法,，其主要依靠蘇木精染液為堿性，主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍(lán)色,；伊紅為酸性染料,，主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色。實(shí)驗(yàn)過程：1、石蠟切片脫蠟至水：依次將切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-無水乙醇Ⅰ5min-無水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min,，自來水洗,。2、蘇木素染色：切片入蘇木素染液染3-5min,，自來水洗,，分化液分化，自來水洗,，返藍(lán)液返藍(lán),，流水沖洗。3,、伊紅染色：切片依次入85%,、95%的梯度酒精脫水各5min，入伊紅染液中染色5min,。4,、脫水封片：切片依次放入無水乙醇I5min-無水乙醇II5min-無水乙醇Ⅲ5min-二甲Ⅰ5min-二甲苯Ⅱ5min透明，中性樹膠封片,。5,、顯微鏡鏡檢，圖像采集分析,。結(jié)果判讀：細(xì)胞核呈藍(lán)色,，細(xì)胞質(zhì)呈紅色寧夏病理HE染色外包肝臟組織HE染色如何觀察。

HE染色攻略：HE染色又稱為蘇木精-伊紅染色,，染色后組織或細(xì)胞可以借助普通光學(xué)顯微鏡觀察與鑒別細(xì)胞凋亡與細(xì)胞壞死的一種染色方法,。這種方法適用范圍***，對(duì)組織細(xì)胞的各種成分都可著色,，便于***觀察組織構(gòu)造,，而且適用于各種固定液固定的材料,，染色后不易褪色可長(zhǎng)期保存,。經(jīng)過HE染色，細(xì)胞核被蘇木素染成藍(lán)紫色,，細(xì)胞質(zhì)被伊紅染色呈粉紅色,。可以觀察細(xì)胞結(jié)構(gòu),、組織層次等等,。首先切片組織是否完整，組織有無損傷,；然后看切片有無刀痕,；***細(xì)胞核是否清晰可見，胞核與包漿要對(duì)比鮮明。

HE染色分化作用：染色后,，用某些特定的溶液將組織過多結(jié)合的染色劑脫去,，這個(gè)過程稱為分化作用，所用的溶液稱為分化液,。在HE染色中用0.5%鹽酸乙醇作為分化液,，因酸能破壞蘇木精的醌型結(jié)構(gòu)，使組織與色素分離而褪色,。經(jīng)蘇木精染色后,，必須用0.5%鹽酸乙醇分化，使細(xì)胞核過多結(jié)合的蘇木精染料和細(xì)胞漿吸附的蘇木精染料脫去,，在進(jìn)行伊紅染色,，才能保證細(xì)胞核與細(xì)胞漿染色的分明。因此,，在HE染色中分化是極為關(guān)鍵的一步,。返藍(lán)作用：分化之后，蘇木精在酸性條件下處于紅色離子狀態(tài),，呈紅色,，在堿性條件下處于藍(lán)色離子狀態(tài)，呈藍(lán)色,。組織切片經(jīng)0.5%鹽酸乙醇分化后呈紅色或粉紅色,，故分化之后，立即用水出去組織切片上的酸而終止分化,，再用弱堿性水（0.2%氨水）使蘇木精染上的細(xì)胞核呈現(xiàn)藍(lán)色,，這個(gè)過程稱為返藍(lán)作用或藍(lán)化作用。另外用自來水浸洗也可使細(xì)胞核返藍(lán),，但所需時(shí)間較長(zhǎng),。HE染色結(jié)果如何分析和讀片？

HE染色堿染料染主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著色,。學(xué)上常用的一種染色方法為蘇木精 伊紅染色法,。蘇木精 伊紅染色法 （ hematoxylin-eosin staining ） ，簡(jiǎn)稱HE染色法 ,，石蠟切片技術(shù)里常用的染色法之一 ,。蘇木精染液為堿 ，主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍(lán)色 ,；伊紅為酸染料 ,，主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色 。細(xì)胞核被蘇木精染成鮮明的藍(lán)色,，軟骨基質(zhì),、鈣鹽顆粒呈深藍(lán)色,，粘液呈灰藍(lán)色。細(xì)胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色,，胞漿內(nèi)嗜酸顆粒呈強(qiáng)的鮮紅色,。膠原纖維呈淡粉紅色，力纖維呈亮粉紅色,，紅血球呈橘紅色,，蛋白液體呈粉紅色。HE染色是病理實(shí)驗(yàn)中比較用的一種基礎(chǔ)染色方法,。遼寧推薦的HE染色檢測(cè)

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HE染色原理1,、細(xì)胞核染色的原理：蘇木精為堿性天然染料,，可使細(xì)胞核著色。細(xì)胞核內(nèi)染色質(zhì)的成分主要是DNA,，在DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)中,，兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外，使DNA雙螺旋的外側(cè)帶負(fù)電荷,，呈酸性,，很容易與帶正電荷的蘇木精堿性燃料以離子鍵或氫鍵結(jié)合而被染色。蘇木精在堿性溶液中呈藍(lán)色,，所以細(xì)胞核被染成藍(lán)色,。2、細(xì)胞漿染色的原理：伊紅是一種化學(xué)合成的酸性染料,，在一定條件下可使細(xì)胞漿著色,。細(xì)胞漿的主要成分是蛋白質(zhì)，為兩性化合物,，細(xì)胞漿的染色與染液的pH在胞漿蛋白質(zhì)等電點(diǎn)（4.7—5.0）以下時(shí),，胞漿蛋白質(zhì)以堿式電離，則細(xì)胞漿帶正電荷,，就可被帶負(fù)電荷的酸性染料染色,。伊紅在水中離解成帶負(fù)電荷的陰離子，與胞漿蛋白質(zhì)帶正電荷的陽(yáng)離子結(jié)合,，使細(xì)胞漿著色,，呈現(xiàn)紅色,。四川專業(yè)的HE染色分析