目前幾種常用免疫組化方法簡(jiǎn)單介紹

1）免疫熒光方法是**早建立的免疫組織化學(xué)技術(shù),。由于免疫熒光技術(shù)特異性強(qiáng),、靈敏度高,、快速簡(jiǎn)便,，所以在臨床病理診斷,、檢驗(yàn)中應(yīng)用較廣,。它利用抗原抗體特異性結(jié)合的原理,，先將已知抗體標(biāo)上熒光素,，以此作為探針檢查細(xì)胞或組織內(nèi)的相應(yīng)抗原,，在熒光顯微鏡下觀(guān)察,。當(dāng)抗原抗體復(fù)合物中的熒光素受激發(fā)光的照射后即會(huì)發(fā)出一定波長(zhǎng)的熒光,，從而可確定組織中某種抗原的定位,，進(jìn)而還可進(jìn)行定量分析,。

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2）免疫酶標(biāo)方法免疫酶標(biāo)方法是繼免疫熒光后,，于60年代發(fā)展起來(lái)的技術(shù),?；驹硎窍纫悦笜?biāo)記的抗體與組織或細(xì)胞作用，然后加入酶的底物,，生成有色的不溶性產(chǎn)物或具有一定電子密度的顆粒,，通過(guò)光鏡或電鏡,，對(duì)細(xì)胞表面和細(xì)胞內(nèi)的各種抗原成分進(jìn)行定位研究,。免疫酶標(biāo)技術(shù)是目前**常用的技術(shù),。本方法與免疫熒光技術(shù)相比的主要優(yōu)點(diǎn)是：定位準(zhǔn)確,，對(duì)比度好,，染色標(biāo)本可長(zhǎng)期保存,，適合于光,、電鏡研究等,。免疫酶標(biāo)方法的發(fā)展非常迅速,，已經(jīng)衍生出了多種標(biāo)記方法,，且隨著方法的不斷改進(jìn)和創(chuàng)新,，其特異性和靈敏度都在不斷提高，使用也越來(lái)越方便。目前在病理診斷中廣為使用的有ABC法,、SP三步法,、即用型二步法檢測(cè)系統(tǒng)等,。

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免疫組化的應(yīng)用領(lǐng)域

免疫組化在生物醫(yī)學(xué)研究和臨床診斷中有著廣泛的應(yīng)用。在**學(xué)中,，免疫組化通常被用于**標(biāo)志物的檢測(cè),，幫助確定**的類(lèi)型、分級(jí)和預(yù)后,。例如,，免疫組化通過(guò)檢測(cè)ER,、PR和HER2的表達(dá),，可以指導(dǎo)乳腺*的治療方案,。在神經(jīng)科學(xué)中，免疫組化用于研究神經(jīng)元的分布和功能,。在免疫學(xué)中,，免疫組化可以用于檢測(cè)炎癥細(xì)胞和免疫細(xì)胞在組織中的分布和水平,。此外，免疫組化實(shí)驗(yàn)技術(shù)還被廣泛應(yīng)用于發(fā)育生物學(xué),、病理學(xué)和藥物研發(fā)等領(lǐng)域,。 靠譜免疫組化怎么樣免疫組化檢測(cè)多少錢(qián),？

免疫組化（IHC）利用抗體檢測(cè)組織切片中蛋白質(zhì)和其他抗原的定位。

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抗體-抗原的相互作用通過(guò)有色酶底物顯色檢測(cè)或熒光染料熒光檢測(cè)進(jìn)行觀(guān)察,。雖然IHC在定量方面不如蛋白質(zhì)印跡或ELISA,，但是IHC可以提供完整組織中蛋白定位的寶貴信息。蛋白表達(dá)譜對(duì)病理學(xué)家以及作為診斷工具都具有重要意義,。

IHC實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵在于穩(wěn)定,、優(yōu)化且可重復(fù)的染色方案，而該方案應(yīng)使用高質(zhì)量的特異性試劑,。

免疫組化的結(jié)果分析：

免疫組化實(shí)驗(yàn)通常需要設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照,、陰性對(duì)照（或替代對(duì)照）（陽(yáng)性對(duì)照是排除方法和實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)有無(wú)問(wèn)題；陰性對(duì)照與替代對(duì)照是排除有無(wú)非特異性染色）,。一般情況下,，陽(yáng)性對(duì)照顏色的特點(diǎn)為：Ag定位，包漿,、胞核,、胞膜、間質(zhì)具有結(jié)構(gòu)性,。且染色的強(qiáng)度不同（顏色深淺不一）,；陰性對(duì)照的特點(diǎn)為：染色細(xì)胞與組織無(wú)區(qū)別,，顏色具有彌散性，分布均勻,。

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說(shuō)明：免疫組化實(shí)驗(yàn)可以對(duì)結(jié)果進(jìn)行定量分析,，但要實(shí)驗(yàn)得到的必須是高質(zhì)量的染色切片,，要求背景染色淺且特異性染色較深，這樣分析的結(jié)果才會(huì)比較準(zhǔn)確,。 病理報(bào)告中的免疫組化到底有什么作用?

免疫組化結(jié)果要如何分析？

 （1）陽(yáng)性著色細(xì)胞計(jì)數(shù)法,。在40*光鏡下,，隨機(jī)選擇不重疊的10個(gè)視野，機(jī)器或人工計(jì)數(shù)陽(yáng)性著色細(xì)胞,，每組3~6張不同動(dòng)物組織切片,，然后進(jìn)行組間比較即可。

（2）灰密度分析法,?？梢酝ㄟ^(guò)在不同組別和不同動(dòng)物組織切片上選擇相同區(qū)域、相同條件下用image j進(jìn)行灰密度分析,，然后進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析即可,。

（3）評(píng)分法。用光學(xué)顯微鏡下對(duì)組織切片分別按染色程度（0~3分為陰性著色,、淡黃色,、淺褐色、深褐色）,、陽(yáng)性范圍進(jìn)行評(píng)分（1~4分為0~25%,、26~50%、51~75%,、76~100%）,，**終可以分?jǐn)?shù)相加，再進(jìn)行比較,。對(duì)于以上這幾種方法,，各有利弊，請(qǐng)細(xì)心選擇,。要想得到正確結(jié)果的前提是你要做出著色均勻,、背景很淺的高質(zhì)量切片。

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免疫組化中免疫膠體金技術(shù),，英瀚斯生物小編為您說(shuō)明介紹。免疫膠體金技術(shù)是以膠體金這樣一種特殊的金屬顆粒作為標(biāo)記物,。膠體金是指金的水溶膠,，它能迅速而穩(wěn)定地吸附蛋白，對(duì)蛋白的生物學(xué)活性則沒(méi)有明顯的影響,。因此,，用膠體金標(biāo)記一抗、二抗或其他能特異性結(jié)合免疫球蛋白的分子(如葡萄球菌A蛋白)等作為探針,，就能對(duì)組織或細(xì)胞內(nèi)的抗原進(jìn)行定性,、定位，甚至定量研究,。由于膠體金有不同大小的顆粒,，且膠體金的電子密度高，所以免疫膠體金技術(shù)特別適合于免疫電鏡的單標(biāo)記或多標(biāo)記定位研究,。由于膠體金本身呈淡至深紅色,，因此也適合進(jìn)行光鏡觀(guān)察。如應(yīng)用銀加強(qiáng)的免疫金銀法則更便于光鏡觀(guān)察,。貴州細(xì)胞免疫組化推薦