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免疫組化染色切片的好壞直接影響著病理醫(yī)生對(duì)其染色結(jié)果的判斷,,進(jìn)而影響病理診斷,所以制作一張良好的免疫組化切片至關(guān)重要,,它需要病理醫(yī)生與病理技師兩者間的相互協(xié)調(diào),,密切配合和共同努力,病理醫(yī)生選擇抗體,,設(shè)置對(duì)照,判讀結(jié)果,,指導(dǎo)技術(shù);而技術(shù)人員進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作,,保證染色質(zhì)量,。在免疫組化切片的制作過程存在多個(gè)環(huán)節(jié),每一環(huán)節(jié)的失誤都可能影響檢測(cè)結(jié)果,,如抗原保存,,蛋白酶消化,,增強(qiáng)技術(shù)及對(duì)抗體的管理,、使用和試劑的濃度等等,因此制作一張高質(zhì)量的免疫組織化學(xué)切片是多方面相互配合的結(jié)果,。哪里可以做免疫組化,?河南小鼠免疫組化推薦
免疫組化的基本原理
免疫組化(Immunohistochemistry, IHC)是一種利用抗原-抗體特異性結(jié)合的原理,通過顯色反應(yīng)在組織切片上定位特定蛋白質(zhì)的技術(shù)。該技術(shù)結(jié)合了免疫學(xué)和組織學(xué)的優(yōu)點(diǎn),,能夠在細(xì)胞或亞細(xì)胞水平上精確顯示目標(biāo)蛋白的分布和表達(dá)情況,。免疫組化的基本原理是利用一抗與目標(biāo)蛋白結(jié)合,,再通過二抗與一抗結(jié)合,通過顯色系統(tǒng)(如DAB)使目標(biāo)蛋白可視化,。這種方法不僅能夠提供蛋白質(zhì)的定位信息,,還能通過半定量分析評(píng)估蛋白質(zhì)的表達(dá)水平。 河南小鼠免疫組化推薦免疫組化技術(shù)的原理,、分類和優(yōu)點(diǎn),!
免疫組化結(jié)果要如何分析,?
(1)陽性著色細(xì)胞計(jì)數(shù)法。在40*光鏡下,,隨機(jī)選擇不重疊的10個(gè)視野,,機(jī)器或人工計(jì)數(shù)陽性著色細(xì)胞,每組3~6張不同動(dòng)物組織切片,,然后進(jìn)行組間比較即可。
(2)灰密度分析法,。可以通過在不同組別和不同動(dòng)物組織切片上選擇相同區(qū)域、相同條件下用image j進(jìn)行灰密度分析,,然后進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析即可。
(3)評(píng)分法,。用光學(xué)顯微鏡下對(duì)組織切片分別按染色程度(0~3分為陰性著色,、淡黃色,、淺褐色、深褐色)、陽性范圍進(jìn)行評(píng)分(1~4分為0~25%,、26~50%,、51~75%、76~100%),,**終可以分?jǐn)?shù)相加,,再進(jìn)行比較,。對(duì)于以上這幾種方法,,各有利弊,請(qǐng)細(xì)心選擇,。要想得到正確結(jié)果的前提是你要做出著色均勻,、背景很淺的高質(zhì)量切片。
英瀚斯生物,,專業(yè)病理染色團(tuán)隊(duì),,不止做檢測(cè),還有專業(yè)病理分析,。
免疫組化的優(yōu)缺點(diǎn)
免疫組化的優(yōu)點(diǎn)在于其高特異性和敏感性,,能夠在組織原位檢測(cè)目標(biāo)蛋白的表達(dá)和分布。此外,,免疫組化可以與其他技術(shù)(如熒光顯微鏡,、電子顯微鏡)結(jié)合,提供更豐富的信息,。然而,,免疫組化也存在一些缺點(diǎn)。首先,,實(shí)驗(yàn)步驟復(fù)雜,,需要優(yōu)化多個(gè)參數(shù)(如一抗?jié)舛取⒎跤龝r(shí)間),。其次,,免疫組化的結(jié)果可能受到組織固定、抗原修復(fù)等因素的影響,,導(dǎo)致假陽性或假陰性結(jié)果,。此外,免疫組化的定量分析相對(duì)困難,,通常只能進(jìn)行半定量分析,。 在南京英瀚斯做的免疫組化,效果不錯(cuò),!
在臨床應(yīng)用中,,免疫組化還可以進(jìn)一步分類不同qi官與組織交界處cancer。由于重疊的特征,在一些組織qi官交界處的cancer,,只憑組織學(xué)基礎(chǔ)對(duì)cancer進(jìn)行分類很困難,。如胃腸道梭形細(xì)胞肉瘤是肌肉起源的平滑肌肉瘤,是間質(zhì)起源的胃腸道間質(zhì)瘤(GIST),,還是神經(jīng)起源的神經(jīng)鞘瘤;同樣發(fā)生于組織交界處的cancer有睪丸胚胎cancer與精原細(xì)胞cancer,,兩者較難區(qū)別,且醫(yī)療與預(yù)后明顯的不同,,但用免疫組化檢測(cè)角蛋白就較易于區(qū)別:角蛋白陰性則為精原細(xì)胞cancer,,而角蛋白陽性則為胚胎cancer。免疫組化常見問題原因分析,!甘肅組織免疫組化注意事項(xiàng)
做免疫組化意味什么,?河南小鼠免疫組化推薦
免疫組化分類中,免疫熒光方法,,英瀚斯生物為您進(jìn)行介紹,。一開始建立的免疫組織化學(xué)技術(shù)。它利用抗原抗體特異性結(jié)合的原理,,先將已知抗體標(biāo)上熒光素,,以此作為探針檢查細(xì)胞或組織內(nèi)的相應(yīng)抗原,在熒光顯微鏡下觀察,。當(dāng)抗原抗體復(fù)合物中的熒光素受激發(fā)光的照射后即會(huì)發(fā)出一定波長(zhǎng)的熒光,,從而可確定組織中某種抗原的定位,進(jìn)而還可進(jìn)行定量分析,。由于免疫熒光技術(shù)特異性強(qiáng),、靈敏度高、快速簡(jiǎn)便,,所以在臨床病理診斷,、檢驗(yàn)中應(yīng)用比較廣。河南小鼠免疫組化推薦