免疫組化在在病理診斷中，隨著各種抗體新的用途不斷被發(fā)現(xiàn)及越來越多的新型抗體的出現(xiàn)，免疫組化在cancer診斷及鑒別診斷,、分類、預(yù)后判斷等方面產(chǎn)生了重大的影響,。由于免疫組化技術(shù)也存在一些局限性,，因此，深入研究免疫組化原理和技術(shù),，并努力實現(xiàn)規(guī)范化的操作,，才能充分發(fā)揮免疫組化在病理的診斷及鑒別診斷、判斷預(yù)后,、指導(dǎo)臨床醫(yī)療中的作用,。

觀察組織切片中抗原的數(shù)量及其在組織中的分布情況，對抗原進行定位,、定性及定量的研究,，稱為免疫組織化學(xué)，由于抗原與抗體特異性結(jié)合,，因此通過免疫組化使標記抗體的顯色劑(酶,、熒光素、同位素,、金屬離子等等)顯色來確定組織細胞內(nèi)抗原(多肽和蛋白質(zhì)),。IHC所用標本主要為兩大類:組織標本和細胞標本，其中制作組織標本更常用,、更基本的方法是石蠟切片,。石蠟切片對于組織形態(tài)保存好，有利于各種染色對照觀察,，而且能長期保存;石蠟切片中使用的甲醛固定劑對組織內(nèi)抗原暴露有一定的影響,，但可進行抗原修復(fù)，是免疫組化中優(yōu)先選擇的組織標本制作方法,。 免疫組化可以看什么,？浙江組織免疫組化

關(guān)于免疫組化的封閉：用和二抗來源一致的血清在保濕盒中于37℃孵育15~30min，然后甩去封閉用血清,，勿洗,；注意：封閉時間根據(jù)具體實驗調(diào)整；封閉液一般選用5%BSA或與二抗來源一致的血清,，切記是BSA,，不是PBS.很多論壇寫的是PBS,太坑了,。①使用血清好還是BSA好？答：***是待檢樣本會非特異性的和蛋白結(jié)合,，從而導(dǎo)致背景過高,，因此可以用BSA或血清封閉掉這部分非特異性的結(jié)合，從這點看,，BSA和血清沒有明顯區(qū)別,。第二是待檢樣本中可能會有Fc受體，可以和抗體恒定區(qū)結(jié)合,，與抗體特異性無關(guān),，封閉血清中有抗體，因此用血清可以封閉掉一抗及二抗和樣本Fc受體之間結(jié)合,。BSA則無法封閉Fc受體,。貴州動物組織免疫組化推薦英瀚斯生物,，可做免疫組化定量分析,。

免疫組化的基本原理 

免疫組化（Immunohistochemistry, IHC）是一種利用抗原-抗體特異性結(jié)合的原理，通過顯色反應(yīng)在組織切片上定位特定蛋白質(zhì)的技術(shù),。該技術(shù)結(jié)合了免疫學(xué)和組織學(xué)的優(yōu)點,，能夠在細胞或亞細胞水平上精確顯示目標蛋白的分布和表達情況。免疫組化的基本原理是利用一抗與目標蛋白結(jié)合,，再通過二抗與一抗結(jié)合,，通過顯色系統(tǒng)（如DAB）使目標蛋白可視化。這種方法不僅能夠提供蛋白質(zhì)的定位信息,，還能通過半定量分析評估蛋白質(zhì)的表達水平,。

免疫組化有哪幾種分類 ？

 1）按標記物質(zhì)的種類,，如熒光染料,、放射性同位素、酶（主要有辣根過氧化物酶和堿性磷酸酶）,、鐵蛋白,、膠體金等，可分為免疫熒光法,、放射免疫法,、免疫酶標法和免疫金銀法等。

 2）按染色步驟可分為直接法（又稱一步法）和間接法（二步,、三步或多步法）,。與直接法相比，間接法的靈敏度提高了許多,。

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3）按結(jié)合方式可分為抗原-抗體結(jié)合，如過氧化物酶-抗過氧化物酶（***）法,；親和連接,，如卵白素-生物素-過氧化物酶復(fù)合物（ABC）法、鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶連結(jié)（SP）法等,，其中SP法是比較常用的方法,；聚合物鏈接，如即用型二步法,，此方法尤其適合于內(nèi)源性生物素含量高的組織抗原檢測,。 免疫組化結(jié)果怎么看？

免疫組化實驗注意事項總結(jié)：

?本實驗室所用切片一般是石蠟切片,。

?烘片：使蠟片水分蒸發(fā),，石蠟軟化，組織切片牢固貼在玻片上,；烘片至跟烘片前透明度有差異,。

?抗原修復(fù)時，使片子始終浸沒在修復(fù)液中,，液體不能干,。

?一抗孵育在37度培養(yǎng)箱，濕盒放置1h,，省時間和結(jié)合效果好,，不要超過1h，容易過染,。

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?二抗使用：兩個二抗放大信號或一個二抗,；若抗體信號強,，可不用放大信號，盡量增大信噪比,。

?10XDAB在常溫溶解,，盡可能現(xiàn)用現(xiàn)配，放于4度儲存時間久了效果不佳,。

?復(fù)水和脫水時所用的梯度酒精不可混用,，要區(qū)分開。

?加抗體和顯色液時,，都要將片子甩干,，在半干半濕的狀態(tài)下再加，不然容易造成溶液的二次稀釋,。

?整個操作過程中在顯色之前,，一定不能干片,。 免疫組化公司哪家好？甘肅組織免疫組化實驗

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臨床應(yīng)用中，藥物靶點免疫組化,，英瀚斯生物專業(yè)做實驗外包服務(wù),，一站式醫(yī)學(xué)科研平臺,。免疫組化及分子病理學(xué)方法在疾病診斷中只只起輔助醫(yī)療的作用，而藥物病理學(xué)是用病理學(xué)的方法確定藥物醫(yī)療的靶點,、評價藥物醫(yī)療的療效、預(yù)測藥物醫(yī)療的反應(yīng),，因此藥物靶點免疫組化屬“單獨的診斷”,。因此對于對照的設(shè)置、質(zhì)量的控制均需要更高的要求,，如對試劑的要求，不同于一般的診斷試劑,，應(yīng)按對藥物管理的要求操作,。HER2蛋白著色3+者可作為臨床醫(yī)生建議患者接受曲妥珠單抗等藥物醫(yī)療的依據(jù)。浙江組織免疫組化