免疫組化臨床應(yīng)用對“未分化”cancer的分類。未分化cancer包括cancer或肉瘤,，在HE切片上由于cancer的“未分化”而缺少cancer細(xì)胞的起源特征不能分類,，初步區(qū)分組織學(xué)類型用非特異性抗體，在其基礎(chǔ)上再選用特異性抗體做進(jìn)一步鑒定,。如分化差的cancer可顯示Vimentin或S-100蛋白,，有時淋巴瘤可以表達(dá)上皮膜抗原，一些黑色素瘤表現(xiàn)出角蛋白,，這同時也強(qiáng)調(diào)了在cancer診斷中應(yīng)使用一組抗體而不是單個抗體,。如果您有實驗外包的需求，可以與我們南京英瀚斯生物進(jìn)行聯(lián)系，我們也有做免疫組化的服務(wù),！英瀚斯生物免疫組化,，高效高質(zhì)量出結(jié)果。新疆切片免疫組化哪家好

免疫組化的DAB顯色時間如何把握,？

1,、DAB顯色時間不是固定的，主要由顯微鏡下控制顯色時間,，到出現(xiàn)淺棕色本底時即可沖洗,；

2、DAB顯色時間很短（如幾秒或幾十秒）就出現(xiàn)很深的棕褐色,，這很可能說明你的抗體濃度過高或抗體孵育時間過長,，需要下調(diào)抗體濃度或縮短你的抗體孵育時間；

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3、此外,，若很短時間就出現(xiàn)背景很深,，還有可能你前面的封閉非特異性蛋白不全，需要延長封閉時間,；

4,、DAB顯色時間很長（如超過十幾分鐘）才出現(xiàn)陽性染色，一方面可能說明你的抗體濃度過低或孵育時間過短（比較好一抗4度過夜）,；另一方面就是封閉時間過長,。 新疆切片免疫組化哪家好免疫組化樣本如何處理？

免疫組化的抗原修復(fù)技術(shù)

抗原修復(fù)是免疫組化實驗中的重要步驟,，目的是暴露被固定過程掩蓋的抗原表位。常用的抗原修復(fù)方法有熱修復(fù)和酶消化,。免疫組化熱修復(fù)是通過加熱（如微波或高壓）使蛋白質(zhì)變性,，暴露抗原表位。常用的緩沖液有檸檬酸鹽緩沖液和EDTA緩沖液,。酶消化是通過蛋白酶（如胰蛋白酶）消化部分蛋白質(zhì),，暴露抗原表位。免疫組化實驗中不同的抗原修復(fù)方法適用于不同的抗原和抗體,，需要根據(jù)免疫組化具體實驗條件進(jìn)行優(yōu)化調(diào)整。

免疫組化應(yīng)該選擇石蠟切片還是冰凍切片,？ 

（1）要求做冰凍切片的不一定能做石蠟切片,，這是***我向一老師請教得出的結(jié)論。因為作石蠟切片時要高溫烤片，可能會破壞組織的抗原性,，如果組織的抗原性較穩(wěn)定，則可作石蠟切片,；但是要求做石蠟切片的,，可作冰凍切片。

（2）冰凍切片的優(yōu)點(diǎn)是能夠較好的保存組織的抗原免疫活性,，做免疫組化時不需抗原修復(fù)這一步,。缺點(diǎn)是細(xì)胞內(nèi)易形成冰晶而破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)，可能會使抗原彌散,；切片厚度較石蠟的厚,，做的片子沒石蠟的漂亮。當(dāng)你買一抗時,，目錄上都寫著做什么樣的切片,，如果它寫著只能做冰凍，就不能做石蠟,，如寫著兩者都可,，那就都能做。

（3）石蠟切片的優(yōu)點(diǎn)可以保持組織細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu),，且容易存放在室溫,，而冰凍切片比較麻煩，一定要存在-80度的低溫冰箱中,，尤其是用來做原位雜交的的切片,，為了防止RNA降解，保存一貫很重要,。由于石蠟切片可以切到4微米左右,，所以原位雜交探針容易滲透到組織中去，容易成功,，而且得到的顏色/形態(tài)都較冰凍切片好,。

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醫(yī)療和預(yù)后有關(guān)的免疫組化。與醫(yī)療及預(yù)后有關(guān)的標(biāo)記物主要分以下為三類:(1)cancer基因標(biāo)記物:如cancer基因C-erbB2,、c-myc,、P53蛋白等,，卵巢上皮性cancer中P53的過表達(dá)與cancer的擴(kuò)散、分化,、術(shù)后殘存cancer灶呈正相關(guān);乳腺cancer中表達(dá)C-erbB2的浸潤性cancer患者預(yù)后差;肺cancer中突變型P53基因蛋白表達(dá)增高,，PTEN基因表達(dá)減弱，提示cancer預(yù)后不良,。(2)細(xì)胞增殖性標(biāo)記物:cancer細(xì)胞增生是否活躍直接影響著臨床的醫(yī)療與預(yù)后,，如表皮生長因子受體(EGFR)、Ki-67,、PCNA,、cycling等可對cancer細(xì)胞的增生做出評價，表達(dá)指數(shù)越高,，表明其增殖指數(shù)越活躍,，惡性度增高，預(yù)后不良,，其中以惡性淋巴瘤乳腺cancer較為明顯;在對乳腺cancer的研究中發(fā)現(xiàn)Ki-67,、EGFR陽性者，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率高,，并與ji素受體的表達(dá)呈負(fù)相關(guān),。(3)類固醇ji素受體:如雌ji素受體(ER)、孕ji素受體(PR)等,，應(yīng)用更為范圍廣的的是子宮內(nèi)膜cancer及乳腺cancer,，如對乳腺cancer中ER、PR的檢測,，有助于決定臨床醫(yī)療中是否需要加入內(nèi)分泌ji素阻斷醫(yī)療,，并能判斷預(yù)后，ER及PR陽性表達(dá),、原cancer基因(C-erbB-2)陰性表達(dá)病例對三苯氧胺等ji素醫(yī)療反應(yīng)良好,，而ERPR、C-erbB-2三種抗體均陰性(TNBC)患者采用三苯氧胺可能意義不大,。免疫組化常見問題原因分析,！新疆切片免疫組化哪家好

免疫組化方法步驟是什么？新疆切片免疫組化哪家好

免疫組化結(jié)果中的假陰性是指所有抗體標(biāo)記的切片均呈陰性,，無陽性信號,，假陰性結(jié)果不是真實的反應(yīng)。導(dǎo)致假陰性結(jié)果的原因有:(1)抗原修復(fù)方法選擇不當(dāng),，根據(jù)不同的抗原特點(diǎn)采用不同的修復(fù)方法,，大多數(shù)抗體要求熱修復(fù)，熱修復(fù)又包括高壓修復(fù),、微波修復(fù)及煮沸熱修復(fù);而對某些細(xì)胞內(nèi)抗原和細(xì)胞間質(zhì)抗原需要用酶消化,，如表皮生長因子(EGFR)要求胃蛋白酶(Pepsin)消化,，而Vimentin則不用修復(fù);(2)一抗本身的問題:一抗效價降低或失效。在免疫組化中染色結(jié)果的假陰性會導(dǎo)致錯診或漏診,，進(jìn)而影響臨床診斷及延誤醫(yī)療。解決這一問題的可通過設(shè)立陽性對照,，比較兩者染色結(jié)果,。若陽性對照有表達(dá)，表明試劑和染色體系及實驗步驟均無問題;若陽性對照無表達(dá),，則檢測過程中某一試劑或某個步驟存在問題,，應(yīng)逐一查找原因。新疆切片免疫組化哪家好