HE染色堿染料染主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著色,。學(xué)上常用的一種染色方法為蘇木精 伊紅染色法,。蘇木精 伊紅染色法 （ hematoxylin-eosin staining ） ，簡(jiǎn)稱HE染色法 ,，石蠟切片技術(shù)里常用的染色法之一 ,。蘇木精染液為堿 ，主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍(lán)色 ,；伊紅為酸染料 ,，主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色 。細(xì)胞核被蘇木精染成鮮明的藍(lán)色,，軟骨基質(zhì),、鈣鹽顆粒呈深藍(lán)色,，粘液呈灰藍(lán)色。細(xì)胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色,，胞漿內(nèi)嗜酸顆粒呈強(qiáng)的鮮紅色,。膠原纖維呈淡粉紅色，力纖維呈亮粉紅色,，紅血球呈橘紅色,，蛋白液體呈粉紅色。HE染色的實(shí)驗(yàn)?zāi)康囊约皩?shí)驗(yàn)結(jié)果分析,。貴州值得信賴的HE染色公司

HE染色攻略：HE染色又稱為蘇木精-伊紅染色,，染色后組織或細(xì)胞可以借助普通光學(xué)顯微鏡觀察與鑒別細(xì)胞凋亡與細(xì)胞壞死的一種染色方法。這種方法適用范圍***,，對(duì)組織細(xì)胞的各種成分都可著色,，便于***觀察組織構(gòu)造，而且適用于各種固定液固定的材料,，染色后不易褪色可長(zhǎng)期保存,。經(jīng)過(guò)HE染色，細(xì)胞核被蘇木素染成藍(lán)紫色,，細(xì)胞質(zhì)被伊紅染色呈粉紅色,。可以觀察細(xì)胞結(jié)構(gòu),、組織層次等等,。首先切片組織是否完整，組織有無(wú)損傷,；然后看切片有無(wú)刀痕,；***細(xì)胞核是否清晰可見，胞核與包漿要對(duì)比鮮明,。貴州值得信賴的HE染色公司HE染色中固定液如何配置,。

HE染色常見問(wèn)題：Q5：細(xì)胞核呈棕紅色改變答：蘇木素染液過(guò)度氧化；或蘇木素染色后反藍(lán)不足導(dǎo)致,。應(yīng)該立即更換蘇木素染色液,。或在流動(dòng)自來(lái)水(一般自來(lái)水PH7.5-7.8),，或在稀釋的氨水溶液,，或在0.2%碳酸氫鈉中適當(dāng)浸泡，這些步驟均可一定程度地加強(qiáng)蘇木素染色后的反藍(lán)效果,。Q6：伊紅染色較淡答：伊紅的PH改變了(PH可能已大于5),；或反藍(lán)液體未漂洗干凈，殘留后影響胞漿嗜酸性染色；或者切片太薄并且在隨后的脫水步驟停留過(guò)久,。對(duì)策：檢查伊紅染色液PH,，可采用乙酸調(diào)至4.6-5.0。根據(jù)以上提示,，調(diào)整實(shí)驗(yàn)步驟,。

HE染色構(gòu)成組織內(nèi)蛋白質(zhì)的氨基酸的種類很多,，它們有不同的等電點(diǎn),。在普通染色法中，染色液的酸堿度為pH6左右,，細(xì)胞內(nèi)的酸性物質(zhì)如細(xì)胞核的染色質(zhì),、腺細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)及透明軟骨基質(zhì)等均被堿性染料染色，這些物質(zhì)稱為嗜堿性,。而細(xì)胞質(zhì)中的其它蛋白質(zhì)如紅細(xì)胞中的血紅蛋白,、嗜酸粒細(xì)胞的顆粒及膠原纖維和肌纖維等被酸性染料染色，這些物質(zhì)稱為嗜酸型,。如果改變?nèi)旧旱乃釅A度,，pH值升高時(shí)，則原來(lái)被酸性染料染色的物質(zhì)可變?yōu)槭葔A性,；pH值降低時(shí),，原來(lái)被堿性染料染色的物質(zhì)則可變?yōu)槭人嵝浴Ｋ哉f(shuō)染色液的pH值可以影響染色的反應(yīng),。HE染色是組織學(xué),、病理學(xué)教學(xué)與科研中比較基礎(chǔ)、使用比較普遍的技術(shù)方法之一,。

HE染色反藍(lán)的原理：蘇木素染液,，細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)主要是去氧核糖核酸（DNA）,DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)中,，兩條鏈上的磷酸基向外,，帶負(fù)電荷，呈酸性,，很容易與帶正電荷的蘇木素精堿性染料以離子或氫鍵結(jié)合而被染色,。蘇木精在堿性溶液中呈藍(lán)色,，所以細(xì)胞核被染成藍(lán)色。 分化：蘇木素染色之后,，用水洗去未結(jié)合在細(xì)胞上的染液,，但是在細(xì)胞核中結(jié)合過(guò)多的染料和細(xì)胞漿中吸附的染料必須用分化液1%鹽酸酒精脫去，才能保證細(xì)胞核和細(xì)胞漿染色的分明,，把這個(gè)過(guò)程稱為染色的分化作用,。因酸能破壞蘇木素的醌型結(jié)構(gòu)，使色素與組織解離,，分化不可過(guò)度,。藍(lán)化：分化之后蘇木素在酸性條件下處于紅色離子狀態(tài),，在堿性條件下處于藍(lán)色離子狀態(tài)，而呈藍(lán)色,，所以分化之后用水洗去酸而中止分化,，再用弱堿性水使蘇木精染上的細(xì)胞核變呈藍(lán)色，稱藍(lán)化作用,，一般多用自來(lái)水浸洗即可變藍(lán),，也可用溫水（50度溫水比較好）變藍(lán)。海馬組織HE染色如何觀察,。貴州值得信賴的HE染色公司

HE染色需要哪些材料及實(shí)驗(yàn)步驟,。貴州值得信賴的HE染色公司

HE染色注意事項(xiàng)：1．組織切片的脫蠟步驟應(yīng)徹底，否則無(wú)論進(jìn)行那種染色都會(huì)發(fā)生困難,。脫蠟時(shí)間要充分,，若溶蠟劑使用過(guò)久應(yīng)及時(shí)更換以免效率降低，若室溫過(guò)低,，可將溶蠟劑置于溫箱中進(jìn)行脫蠟,。  2．蘇木素染液使用一段時(shí)間后表面易出現(xiàn)亮晶狀飄浮物，這可能是液體表面的過(guò)氧化物,，必須過(guò)濾除去,，以防沉渣污染組織切片。蘇木素液一般染過(guò)三,、四百?gòu)埱衅?，著色力?huì)減弱，著色不鮮艷,，呈灰藍(lán)色時(shí)應(yīng)及時(shí)更換新液,。  3．染色的時(shí)間長(zhǎng)短需依據(jù)：染劑對(duì)組織的染色作用，室溫條件,，切片厚薄,，固定液的類別，染液的新舊而進(jìn)行調(diào)節(jié),。所以在染色時(shí)必須使用顯微鏡觀察染色程度以利掌握時(shí)間,。  4．分化十分重要。分化步驟的準(zhǔn)確也是染色成敗的關(guān)鍵,，若分化失當(dāng)則必然引起染色不勻或過(guò)淡,，過(guò)深等現(xiàn)象，因此分化后一定要鏡檢,，觀察胞核是否清晰,，胞漿呈淡白色。否則需再次分化，不然一旦復(fù)染后,，組織會(huì)呈紫藍(lán)色即“藍(lán)蓋紅”現(xiàn)象,。  5．還原液不宜過(guò)濃，若堿性太強(qiáng)易使組織脫落故以淡為宜,。  6．伊紅宜淡染,，復(fù)染過(guò)深胞核會(huì)不清晰，影響鏡檢,。 貴州值得信賴的HE染色公司