HE染色實驗步驟：（1）樣品制備：對于貼壁生長細胞，胰酶消化,，調(diào)整細胞濃度約1×105/ml,，滴加于蓋玻片上(置于6孔板中)，培養(yǎng)相應(yīng)時間后,，取出細胞爬片,，用PBS洗滌3次。（2）樣品固定：95%乙醇固定20min,，PBS洗滌2次,，每次1min。（3）染核：蘇木素染液染色2-3min,，自來水洗滌,。（4）分色：鏡下觀察，若細胞核染色過深,，用1%鹽酸酒精溶液分色數(shù)秒,，自來水洗滌。（5）染胞質(zhì)：浸入伊紅染液染色1min,，自來水洗滌,。（6）吹干或自然晾干細胞爬片后，中性樹膠封片,。若細胞用4%多聚甲醛固定,，則染色時間相應(yīng)延長，蘇木素染色12-15min,，伊紅5min即可HE染色過程中常見的問題以及應(yīng)對方法,。江蘇推薦的HE染色多少錢

HE染色不管怎么操作，始終無法染色或淡染答：這種情況一般因為組織固定時采用了酸性甲醛;或者組織在甲醛中浸泡時間太長;或者久置的甲醛變性分解為甲酸,。補救：防患于未然,，要么使用新鮮的中性甲醛固定，要么在存放的甲醛中加一點碳酸鈉中和甲酸,。對于已經(jīng)固定的組織可考慮再次固定,；對于已經(jīng)制出的片子,，染色前采用5%重鉻酸鉀溶液浸泡半小時以上,，然后自來水漂洗5min，可改善染色,。也可以將切片放入3%硫酸鐵銨溶液中,，補充染色媒介，增強蘇木素與組織的親和力(蘇木素染色必須要媒介才能染上,，單純的蘇木素與組織的親和力很弱),。陜西值得信賴的HE染色分析肝臟組織HE染色如何觀察,。

HE染色是目前國內(nèi)外病理診斷上***采用的常規(guī)染色方法。切片質(zhì)量的好壞,，可直接影響疾病診斷的及時與準(zhǔn)確性,。因此，能制作出一張高質(zhì)量的HE染色切片,，是必須掌握的技術(shù)之一,。送檢樣本經(jīng)4%多聚甲醛固定，固定狀態(tài)良好后,，嚴(yán)格按照本單位病理實驗檢測SOP程序進行修剪,、脫水、包埋,、切片,、染色、封片***鏡檢合格的樣片,。在顯微鏡下瀏覽切片或瀏覽數(shù)字切片,，在不同倍數(shù)下詳細觀察組織切片情況，對切片中基本病理改變?nèi)绯溲?、淤血,、出血、水腫,、變性,、壞死、增生,、纖維化,、機化、肉芽組織,、炎性變化等情況文字描述,，并反映出片子之間的差異。對典型病變部位成像并在word文檔中用箭頭標(biāo)識,。

HE染色等常規(guī)染色,，組化或是熒光優(yōu)先推薦做石蠟切片。原因：石蠟切片對組織的形態(tài)保存比冰凍切片好,，并且對抗原基本無影響,。脂質(zhì)染色（油紅O染**odipy染色，尼羅紅染色）必須做冰凍切片,，不能做石蠟切片,。以下染色必須要新鮮或冷凍組織冰凍切片：ROS染**-半乳糖甘酶染色，ATP染色,，膽固醇染色,。如果標(biāo)本已經(jīng)放在-80°冰箱冷凍了之后又想要做石蠟切片,，將標(biāo)本取出來千萬不要解凍直接放于固定液內(nèi)固定（在固定液內(nèi)邊解凍邊固定）。組織形態(tài)結(jié)構(gòu)保存完好順序：新鮮組織立即投入固定液內(nèi)固定石蠟切片＞組織-80°冷凍后投入固定液內(nèi)固定石蠟切片＞新鮮組織立即投入固定液內(nèi)固定冰凍切片＞組織-80°冷凍后直接冰凍切片,。骨組織HE染色的操作流程,。

HE染色細胞漿染色原理：細胞漿內(nèi)主要成分是蛋白質(zhì)，為兩性化合物,、細胞漿的染色與pH值有密切關(guān)系,，當(dāng)pH調(diào)到蛋白質(zhì)等電點4.7-5.0時，胞漿對外不顯電性,，此時酸或堿性染料不易染色,。當(dāng)pH調(diào)到6.7-6.8時，大于蛋白質(zhì)的等電點pH值,，表現(xiàn)酸性電離,，而帶負電荷的陰離子，可被帶正電荷的染料染色,，現(xiàn)時胞核也被染色,，核和胞漿難以區(qū)分。因此必須把pH調(diào)至胞漿等電點以下,，在染液中加入醋酸使胞漿帶正電荷（陽離子）,，就可被帶負電荷（陰離子）的染料染色。伊紅Y是一種化學(xué)合成的酸性染料,，在水中離解成帶負電荷的陰離子,，與蛋白質(zhì)的氨基正電荷（陽離子）結(jié)合而使細胞漿染色，細胞漿,、紅細胞,、肌肉、結(jié)締組織,，嗜伊紅顆料等被***成不同程度的紅色或粉紅色,，與藍色的細胞核形成鮮明的對比。HE染色結(jié)果如果使用計算機分析軟件分析,？四川結(jié)果客觀的HE染色報告

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HE染色原理1、細胞核染色的原理：蘇木精為堿性天然染料,，可使細胞核著色,。細胞核內(nèi)染色質(zhì)的成分主要是DNA，在DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)中,，兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外,，使DNA雙螺旋的外側(cè)帶負電荷,，呈酸性,，很容易與帶正電荷的蘇木精堿性燃料以離子鍵或氫鍵結(jié)合而被染色,。蘇木精在堿性溶液中呈藍色，所以細胞核被染成藍色,。2,、細胞漿染色的原理：伊紅是一種化學(xué)合成的酸性染料，在一定條件下可使細胞漿著色,。細胞漿的主要成分是蛋白質(zhì),，為兩性化合物，細胞漿的染色與染液的pH在胞漿蛋白質(zhì)等電點（4.7—5.0）以下時,，胞漿蛋白質(zhì)以堿式電離,，則細胞漿帶正電荷，就可被帶負電荷的酸性染料染色,。伊紅在水中離解成帶負電荷的陰離子,，與胞漿蛋白質(zhì)帶正電荷的陽離子結(jié)合，使細胞漿著色,，呈現(xiàn)紅色,。江蘇推薦的HE染色多少錢