HE染色常見(jiàn)問(wèn)題：切片染色不均勻,，有片狀的弱著**存在答：（1）取材時(shí)組織太厚,，固定過(guò)久，導(dǎo)致深部組織固定不佳,，而表淺組織過(guò)度固定,，而透明、脫水,、浸蠟均是如此,，這樣在后期染色時(shí)就會(huì)出現(xiàn)染色不均勻。應(yīng)該將厚的組織剖開(kāi)固定,。（2）制片過(guò)程有問(wèn)題,，切片厚薄不一，或者有刀痕,，或組織與玻片間存在氣泡,。同一張切片厚薄不一，一般都是在制片時(shí)，刀片固定不佳或刀片鈍或刀片與組織角度不佳（一般比較好角度為5°）（3）脫蠟前未烘烤,，脫蠟時(shí)間過(guò)短或脫蠟液使用過(guò)久,，導(dǎo)致脫蠟不徹底。（4）染色液過(guò)少,，著色不均勻,；或染色時(shí)部分組織干涸而另一部分濕潤(rùn)，這樣會(huì)導(dǎo)致組織吸附染料的能力不一,。（5）分化不當(dāng),。南京英瀚斯，專(zhuān)業(yè)的病理染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺(tái),。關(guān)于HE染色,，你不知道的實(shí)驗(yàn)技巧,。內(nèi)蒙古質(zhì)量好的HE染色服務(wù)

HE染色結(jié)果判讀：細(xì)胞核被蘇木精染成鮮明的藍(lán)色,，軟骨基質(zhì)、鈣鹽顆粒呈深藍(lán)色,，粘液呈灰藍(lán)色,。細(xì)胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色，胞漿內(nèi)嗜酸性顆粒呈反光強(qiáng)的鮮紅色,。膠原纖維呈淡粉紅色,，彈力纖維呈亮粉紅色，紅血球呈橘紅色,，蛋白性液體呈粉紅色,。著色狀況與組織或細(xì)胞的種類(lèi)有關(guān)，也隨其生活周期及病理變化而改變,。例如,，細(xì)胞在新生時(shí)期胞漿對(duì)伊紅著色較淡或輕度嗜堿，當(dāng)其衰老時(shí)或發(fā)生退行性變則呈現(xiàn)嗜伊紅濃染,。膠原纖維在老化和出現(xiàn)透明變性時(shí),，伊紅著色由淺變深。H-E染色評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)：（1）切片完整,，厚度4-6微米,，厚薄均勻，無(wú)皺褶無(wú)刀痕,；（2）染色核漿分明,，紅藍(lán)適度，透明潔凈,，封裱美觀,。吉林專(zhuān)業(yè)的HE染色分析比較常見(jiàn)的病理染色HE染色？

HE染色多聚甲醛保存組織的注意事項(xiàng)：多聚甲醛放置過(guò)久其中的醛基可能會(huì)被氧化為酸,，使溶液pH降低,，從而影響染色,。不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時(shí)間有所不同，應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類(lèi)以及組織塊的大小來(lái)調(diào)整固定時(shí)間,。多聚甲醛雖然作用溫和,，但能硬化組織，固定時(shí)間過(guò)久會(huì)導(dǎo)致組織變脆,，切片時(shí)易碎,。因此固定時(shí)間通常不宜超過(guò)24小時(shí)。多聚甲醛可長(zhǎng)期存在于固定過(guò)的細(xì)胞或組織樣品中,，固定完成后用適當(dāng)?shù)南礈煲夯蛩疀_洗數(shù)小時(shí)仍會(huì)有殘留,，因此后續(xù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果如果受醛基影響，須盡量洗去殘留的多聚甲醛,。醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,，使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或完全掩蓋某些抗原決定簇,，使之不能充分暴露,，可造成假陰性的染色，影響免疫組化結(jié)果,。因此,，4%多聚甲醛固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測(cè)時(shí)，有時(shí)需要對(duì)抗原先進(jìn)行修復(fù),，然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作,。

HE染色常見(jiàn)問(wèn)題：Q5：細(xì)胞核呈棕紅色改變答：蘇木素染液過(guò)度氧化；或蘇木素染色后反藍(lán)不足導(dǎo)致,。應(yīng)該立即更換蘇木素染色液,。或在流動(dòng)自來(lái)水(一般自來(lái)水PH7.5-7.8),，或在稀釋的氨水溶液,，或在0.2%碳酸氫鈉中適當(dāng)浸泡，這些步驟均可一定程度地加強(qiáng)蘇木素染色后的反藍(lán)效果,。Q6：伊紅染色較淡答：伊紅的PH改變了(PH可能已大于5),；或反藍(lán)液體未漂洗干凈，殘留后影響胞漿嗜酸性染色,；或者切片太薄并且在隨后的脫水步驟停留過(guò)久,。對(duì)策：檢查伊紅染色液PH，可采用乙酸調(diào)至4.6-5.0,。根據(jù)以上提示,，調(diào)整實(shí)驗(yàn)步驟。HE染色的基本原理和結(jié)果分析。

HE染色骨組織的處理方式：組織里存有鈣鹽可妨礙用常規(guī)方法制作良好切片,。骨組織及鈣化病灶,，經(jīng)過(guò)固定后，需要先將鈣鹽除去使組織軟化,，才能進(jìn)行常規(guī)切片,。如果脫鈣不全，則切片容易撕開(kāi)或碎裂,，損傷切片刀刀刃,。脫去鈣鹽的過(guò)程，稱(chēng)為脫鈣,。骨組織固定24小時(shí)后,，鋸下不超過(guò)0.5cm厚的薄骨片，以4%甲醛溶液固定后,，進(jìn)行脫鈣,。骨組織過(guò)厚則需延長(zhǎng)脫鈣時(shí)間，但長(zhǎng)時(shí)間浸于強(qiáng)酸會(huì)影響切片染色效果,。取材骨組織固定于10%甲醛溶液24小時(shí)后再鋸取厚度約0.5cm骨片固定以10%甲醛溶液固定2天脫鈣將組織置于脫鈣劑中,，每日更換新鮮液，直至組織軟化為止除酸流水沖洗24小時(shí)脫水,、浸蠟、切片進(jìn)行常規(guī)脫水,、透明,、浸蠟、切片南京英瀚斯,，專(zhuān)業(yè)的病理染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺(tái),。HE染色原理 試劑 染色步驟 注意事項(xiàng) 。寧夏HE染色報(bào)告

HE染色,，即是蘇木精-伊紅染色法,，是形態(tài)學(xué)比較常用的染色方法。內(nèi)蒙古質(zhì)量好的HE染色服務(wù)

HE染色構(gòu)成組織內(nèi)蛋白質(zhì)的氨基酸的種類(lèi)很多,，它們有不同的等電點(diǎn),。在普通染色法中，染色液的酸堿度為pH6左右,，細(xì)胞內(nèi)的酸性物質(zhì)如細(xì)胞核的染色質(zhì),、腺細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)及透明軟骨基質(zhì)等均被堿性染料染色，這些物質(zhì)稱(chēng)為嗜堿性,。而細(xì)胞質(zhì)中的其它蛋白質(zhì)如紅細(xì)胞中的血紅蛋白,、嗜酸粒細(xì)胞的顆粒及膠原纖維和肌纖維等被酸性染料染色，這些物質(zhì)稱(chēng)為嗜酸型。如果改變?nèi)旧旱乃釅A度,，pH值升高時(shí),，則原來(lái)被酸性染料染色的物質(zhì)可變?yōu)槭葔A性；pH值降低時(shí),，原來(lái)被堿性染料染色的物質(zhì)則可變?yōu)槭人嵝?。所以說(shuō)染色液的pH值可以影響染色的反應(yīng)。內(nèi)蒙古質(zhì)量好的HE染色服務(wù)