HE染色是目前國內(nèi)外病理診斷上***采用的常規(guī)染色方法,。切片質(zhì)量的好壞,可直接影響疾病診斷的及時與準(zhǔn)確性,。因此,,能制作出一張高質(zhì)量的HE染色切片,是必須掌握的技術(shù)之一,。送檢樣本經(jīng)4%多聚甲醛固定,,固定狀態(tài)良好后,嚴(yán)格按照本單位病理實驗檢測SOP程序進(jìn)行修剪,、脫水,、包埋、切片,、染色,、封片***鏡檢合格的樣片。在顯微鏡下瀏覽切片或瀏覽數(shù)字切片,,在不同倍數(shù)下詳細(xì)觀察組織切片情況,,對切片中基本病理改變?nèi)绯溲⒂傺?、出血,、水腫,、變性、壞死,、增生,、纖維化、機(jī)化,、肉芽組織,、炎性變化等情況文字描述,并反映出片子之間的差異,。對典型病變部位成像并在word文檔中用箭頭標(biāo)識,。比較常見的病理染色HE染色?天津HE染色外包
HE染色多聚甲醛保存組織的注意事項:多聚甲醛放置過久其中的醛基可能會被氧化為酸,,使溶液pH降低,,從而影響染色。不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,,應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間,。多聚甲醛雖然作用溫和,但能硬化組織,,固定時間過久會導(dǎo)致組織變脆,,切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過24小時,。多聚甲醛可長期存在于固定過的細(xì)胞或組織樣品中,,固定完成后用適當(dāng)?shù)南礈煲夯蛩疀_洗數(shù)小時仍會有殘留,因此后續(xù)實驗結(jié)果如果受醛基影響,,須盡量洗去殘留的多聚甲醛,。醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙,。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或完全掩蓋某些抗原決定簇,,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,,影響免疫組化結(jié)果,。因此,4%多聚甲醛固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測時,,有時需要對抗原先進(jìn)行修復(fù),,然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作。山西專業(yè)的HE染色多少錢HE染色是組織學(xué),、病理學(xué)教學(xué)與科研中比較基礎(chǔ)、使用比較普遍的技術(shù)方法之一,。
HE染色不管怎么操作,,始終無法染色或淡染答:這種情況一般因為組織固定時采用了酸性甲醛;或者組織在甲醛中浸泡時間太長;或者久置的甲醛變性分解為甲酸,。補救:防患于未然,要么使用新鮮的中性甲醛固定,,要么在存放的甲醛中加一點碳酸鈉中和甲酸,。對于已經(jīng)固定的組織可考慮再次固定;對于已經(jīng)制出的片子,,染色前采用5%重鉻酸鉀溶液浸泡半小時以上,,然后自來水漂洗5min,可改善染色,。也可以將切片放入3%硫酸鐵銨溶液中,,補充染色媒介,增強蘇木素與組織的親和力(蘇木素染色必須要媒介才能染上,,單純的蘇木素與組織的親和力很弱),。
HE染色法,石蠟切片技術(shù)里常用的染色法之一,。蘇木精染液為堿性,,主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍(lán)色;伊紅為酸性染料,,主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色,。去氧核糖核酸(DNA)兩條鏈上的磷酸基向外,帶負(fù)電荷,,呈酸性,,很容易與帶正電荷的蘇木精堿性染料以離子鍵結(jié)合而被染色。蘇木精在堿性溶液中稱藍(lán)色,,所以細(xì)胞核被染成藍(lán)色,。伊紅Y是一種化學(xué)合成的酸性染料,在水中離解成帶負(fù)電荷的陰離子,,與蛋白質(zhì)的氨基正電荷的陽離子結(jié)合使胞漿染色,,細(xì)胞漿、紅細(xì)胞,、肌肉,、結(jié)締組織、嗜伊紅顆粒等被染成不同程度的紅色或粉紅色,,與藍(lán)色的細(xì)胞核形成鮮明對比,。伊紅是細(xì)胞漿的良好染料。由于組織或細(xì)胞的不同成分對蘇木精的親和力不同及染色性質(zhì)不一樣,。經(jīng)蘇木精染色后,,細(xì)胞核及鈣鹽粘液等呈藍(lán)色,可用鹽酸酒精分化和弱堿性溶液顯藍(lán),如處理適宜,,可使細(xì)胞核著清楚的深藍(lán)色,,胞漿等其它成分脫色。再利用胞漿染料伊紅染胞漿,,使胞漿的各種不同成分又呈現(xiàn)出深淺不同的粉紅色,。故各種組織或細(xì)胞成分與病變的一般形態(tài)結(jié)構(gòu)特點均可顯示出來。南京英瀚斯,,專業(yè)的技術(shù)提供專業(yè)的HE染色服務(wù),。
HE染色:在組織病理學(xué)中,蘇木素-伊紅染色是一種日常使用比較普遍的常規(guī)染色方法,。常規(guī)蘇木素染色的對比染色是用伊紅,,也有采用焰紅,因為焰紅比伊紅色澤更鮮明,,還有采用橘黃G,,比布里希猩紅,波爾多紅等作為對比染色,。伊紅是比較常用的胞質(zhì)染料,,本身溶于醇而不溶于水,為磚紅色粉末狀或醬紅色結(jié)晶,。配方:伊紅Y(水溶)0.5-1g,,蒸餾水99ml。如果取用伊紅Y(醇溶性)應(yīng)當(dāng)溶于99ml 75%或95%的乙醇中,。如果在伊紅液中加入0.5ml冰醋酸,,可以加速其染色過程,使得胞質(zhì)的色澤更加艷麗,。結(jié)果是細(xì)胞核呈藍(lán)色,,胞質(zhì)、肌肉,、結(jié)締組織,、紅細(xì)胞和嗜伊紅顆粒呈不同程度的紅色。鈣鹽和各種微生物也可染成藍(lán)色或紫藍(lán)色,。石蠟組織切片的HE染色,。河北比較好的HE染色外包
HE染色結(jié)果如果使用計算機(jī)分析軟件分析?天津HE染色外包
HE染色法,,,。蘇木精染液為堿 ,主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍(lán)色 ,;伊紅為酸染料 ,,主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色,。而線粒體用HE染色不可見,活細(xì)胞通常要求活細(xì)胞近似無色線粒體需要用健那綠來染色,,再在高倍鏡下觀察,。從人或動物新鮮尸體上取下塊(一般厚度不超過0.5厘米)投入預(yù)先配好的固定液中(10%福爾馬林,Bouin氏固定液等)使,、細(xì)胞的蛋白質(zhì)變凝固,以防止細(xì)胞后的自溶或細(xì)菌的分解,,從而保持細(xì)胞本來的形態(tài)結(jié)構(gòu),。一般用由低濃度到高濃度酒精作脫水劑,逐漸脫去塊中的水份,。再將塊置于既溶于酒精,,又溶于石蠟的透明劑二甲苯中透明,以二甲苯替換出塊的中酒精,,才能浸蠟包埋,。天津HE染色外包