HE染色注意事項:1、染色時調(diào)節(jié)pH值很重要,。如果組織塊在福爾馬林中固定時間長,,組織酸化而影響細(xì)胞核著色。因此,,要在自來水中沖洗時間長一些或在飽和碳酸鋰水溶液中處理10-30min,,這樣可以使細(xì)胞核著色較深。染伊紅時胞漿著色不佳,,可在伊紅溶液中滴加1-2滴冰醋酸,。2、切片染蘇木精后,,分色這一步是關(guān)鍵,,應(yīng)在顯微鏡下控制進(jìn)行,一般以細(xì)胞核染色清楚(晰)而細(xì)胞質(zhì)基本無色為佳,。如果過分延長分色時間將導(dǎo)致染色太淺,,應(yīng)重新染色后再行分色。3,、切片經(jīng)酒精脫水后,,入二甲苯時可出現(xiàn)白色不透明狀態(tài),此為脫水不徹底,,應(yīng)將切片退回?zé)o水酒精,,更換酒精,、二甲苯,以求徹底脫水與透明,。4,、在染色過程中不要讓切片干燥,以免切片收縮,、變形,,影響神經(jīng)元形態(tài)。5,、切片從二甲苯取出或進(jìn)入二甲苯前,,切片周邊均應(yīng)擦干凈或吸干多余水分。6,、***封固時,,要用中性樹脂,防止日后褪色,,蓋片要選大于組織塊的面積,,如漏出一部分不久將會褪色,所用樹脂濃度要適當(dāng),,樹脂封固時不能有氣泡,。冰凍切片是否可以做HE染色?貴州病理HE染色公司
HE染色常見問題:成片的染色模糊不清,,灰染答:(1)組織未及時固定,,部分自溶;或固定不佳,,深部組織未處理到,。這種只能重新固定了。(2)盡管乙醇也是一種固定液,,但盡量少用或不用,,因為其會導(dǎo)致組織發(fā)硬變脆,染色效果不好,。(3)包埋時蠟的溫度過高,,或切片后烤片時間和溫度過久過高都不好,可能會導(dǎo)致無法染色,。(4)脫蠟不徹底,;染料有問題;分化過度導(dǎo)致的顏色變淡,,鏡下組織界限不清,;染完后的脫水和透明不佳,水霧殘留在組織上,。(5)通風(fēng)窗中(防止空氣中的水霧),戴口罩操作封片(減少哈氣帶來的水霧)。廣西性價比高的HE染色HE染色是病理實驗中比較用的一種基礎(chǔ)染色方法,。
HE染色組織樣本水化:將浸泡過二甲苯的待測組織樣本先放入無水乙醇中浸泡5min,,使脫蠟時用的二甲苯可以被洗脫出去,使水可以進(jìn)入組織中,;再依次置于95%,、85%、70%乙醇中各浸泡5min以達(dá)到充分水化的效果,。組織切片蘇木素染色,、分化與反藍(lán):將水化后的組織樣本的切片使用PBS溶液浸泡清洗,每次浸泡5min,,總共清洗3次,。之后用移液***吸取已經(jīng)預(yù)先配制好的蘇木素染色液,每個組織切片滴加100ul,,充分染色10min,。染色完畢后使用蒸餾水洗去多余的蘇木素染色液。然后再使用1%的鹽酸乙醇進(jìn)行分化,,使細(xì)胞核中結(jié)合過多的染液和細(xì)胞漿中的多余的染液被除去,。分化完成后,再用雙蒸水將組織切片沖洗干凈,。為了使蘇木素染藍(lán)色,,使用弱堿性的促藍(lán)液加入組織切片中,讓細(xì)胞核染藍(lán)色,。反藍(lán)結(jié)束后先用清水進(jìn)行清洗,,再用雙蒸水將組織切片沖洗干凈。
HE染色是目前國內(nèi)外病理診斷上***采用的常規(guī)染色方法,。切片質(zhì)量的好壞,,可直接影響疾病診斷的及時與準(zhǔn)確性。因此,,能制作出一張高質(zhì)量的HE染色切片,,是必須掌握的技術(shù)之一。送檢樣本經(jīng)4%多聚甲醛固定,,固定狀態(tài)良好后,,嚴(yán)格按照本單位病理實驗檢測SOP程序進(jìn)行修剪、脫水,、包埋,、切片、染色,、封片***鏡檢合格的樣片,。在顯微鏡下瀏覽切片或瀏覽數(shù)字切片,,在不同倍數(shù)下詳細(xì)觀察組織切片情況,對切片中基本病理改變?nèi)绯溲?、淤血,、出血、水腫,、變性,、壞死、增生,、纖維化,、機化、肉芽組織,、炎性變化等情況文字描述,,并反映出片子之間的差異。對典型病變部位成像并在word文檔中用箭頭標(biāo)識,。HE染色 ,石蠟切片技術(shù)里常用的染色法之一,。
HE染色法,,。蘇木精染液為堿 ,,主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍(lán)色 ;伊紅為酸染料 ,,主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色,。而線粒體用HE染色不可見,活細(xì)胞通常要求活細(xì)胞近似無色線粒體需要用健那綠來染色,,再在高倍鏡下觀察,。從人或動物新鮮尸體上取下塊(一般厚度不超過0.5厘米)投入預(yù)先配好的固定液中(10%福爾馬林,Bouin氏固定液等)使,、細(xì)胞的蛋白質(zhì)變凝固,,以防止細(xì)胞后的自溶或細(xì)菌的分解,從而保持細(xì)胞本來的形態(tài)結(jié)構(gòu),。一般用由低濃度到高濃度酒精作脫水劑,,逐漸脫去塊中的水份。再將塊置于既溶于酒精,,又溶于石蠟的透明劑二甲苯中透明,,以二甲苯替換出塊的中酒精,才能浸蠟包埋,。HE染色,,一站式實驗外包服務(wù)平臺。陜西專業(yè)的HE染色報告
HE染色是組織學(xué),、病理學(xué)教學(xué)與科研中比較基礎(chǔ),、使用比較普遍的技術(shù)方法之一,。貴州病理HE染色公司
HE染色觀察肝臟HE染色切片,首先要在顯微鏡下找到肝臟的標(biāo)志性結(jié)構(gòu)——肝小葉,。顯微鏡首先調(diào)4倍物鏡,,調(diào)準(zhǔn)焦螺旋至視野清晰,可以看到肝小葉結(jié)構(gòu),。人的肝小葉之間結(jié)締組織少,小葉分隔不明顯,,但動物如豬或小鼠,,其肝小葉分界非常明顯。肝小葉**有**靜脈,,在橫切片上顯示為空洞,。肝小葉之間為將物鏡調(diào)制10倍或20倍,就可以清楚地看到肝小葉結(jié)構(gòu),。肝細(xì)胞以**靜脈為中心向周圍放射狀排列,,稱為肝板。一般在20倍物鏡下可以清晰看到肝細(xì)胞,。20倍物鏡下,,肝細(xì)胞內(nèi)染色為藍(lán)色的是細(xì)胞核,細(xì)胞核大而圓,,居中,,異染色質(zhì)少而著色淺,能清晰看到核仁,。肝細(xì)胞胞質(zhì)豐富,,多成嗜酸性,當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)合成旺盛時,,胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)散在的嗜堿性物質(zhì),。肝細(xì)胞內(nèi)有豐富的細(xì)胞器比如溶酶體、高爾基體,、內(nèi)質(zhì)網(wǎng),,等等,但是在光鏡下是無法看到的,,需要在電鏡下才能觀察到,。當(dāng)然,肝小葉內(nèi)除了肝細(xì)胞,,還有膽小管,、肝血竇、肝巨噬細(xì)胞等組織形態(tài),,但是在HE染色時并不容易觀察到,。做肝臟HE染色切片主要目的一般都是為了觀察肝細(xì)胞形態(tài)是否完整,、胞核有無增大、肝小葉形態(tài)是否完整,,以檢測藥物等刺激因素對肝臟的損傷作用,。貴州病理HE染色公司