HE染色觀察肝臟HE染色切片,,首先要在顯微鏡下找到肝臟的標(biāo)志性結(jié)構(gòu)——肝小葉。顯微鏡首先調(diào)4倍物鏡,,調(diào)準(zhǔn)焦螺旋至視野清晰,,可以看到肝小葉結(jié)構(gòu)。人的肝小葉之間結(jié)締組織少,,小葉分隔不明顯,但動物如豬或小鼠,,其肝小葉分界非常明顯,。肝小葉**有**靜脈,在橫切片上顯示為空洞,。肝小葉之間為將物鏡調(diào)制10倍或20倍,,就可以清楚地看到肝小葉結(jié)構(gòu)。肝細(xì)胞以**靜脈為中心向周圍放射狀排列,,稱為肝板。一般在20倍物鏡下可以清晰看到肝細(xì)胞,。20倍物鏡下,,肝細(xì)胞內(nèi)染色為藍(lán)色的是細(xì)胞核,,細(xì)胞核大而圓,居中,,異染色質(zhì)少而著色淺,能清晰看到核仁,。肝細(xì)胞胞質(zhì)豐富,,多成嗜酸性,當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)合成旺盛時,,胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)散在的嗜堿性物質(zhì)。肝細(xì)胞內(nèi)有豐富的細(xì)胞器比如溶酶體,、高爾基體,、內(nèi)質(zhì)網(wǎng),等等,,但是在光鏡下是無法看到的,,需要在電鏡下才能觀察到。當(dāng)然,,肝小葉內(nèi)除了肝細(xì)胞,,還有膽小管,、肝血竇,、肝巨噬細(xì)胞等組織形態(tài),,但是在HE染色時并不容易觀察到,。做肝臟HE染色切片主要目的一般都是為了觀察肝細(xì)胞形態(tài)是否完整,、胞核有無增大,、肝小葉形態(tài)是否完整,,以檢測藥物等刺激因素對肝臟的損傷作用,。心臟組織HE染色如何觀察,。內(nèi)蒙古專業(yè)的HE染色哪家好
HE染色常見問題:Q5:細(xì)胞核呈棕紅色改變答:蘇木素染液過度氧化,;或蘇木素染色后反藍(lán)不足導(dǎo)致。應(yīng)該立即更換蘇木素染色液,。或在流動自來水(一般自來水PH7.5-7.8),,或在稀釋的氨水溶液,,或在0.2%碳酸氫鈉中適當(dāng)浸泡,,這些步驟均可一定程度地加強(qiáng)蘇木素染色后的反藍(lán)效果。Q6:伊紅染色較淡答:伊紅的PH改變了(PH可能已大于5),;或反藍(lán)液體未漂洗干凈,,殘留后影響胞漿嗜酸性染色,;或者切片太薄并且在隨后的脫水步驟停留過久。對策:檢查伊紅染色液PH,,可采用乙酸調(diào)至4.6-5.0,。根據(jù)以上提示,調(diào)整實(shí)驗(yàn)步驟,。內(nèi)蒙古專業(yè)的HE染色哪家好HE染色 ,石蠟切片技術(shù)里常用的染色法之一,。
HE染色病理技術(shù)中**常用的一種方法,,通過它可以做出病理診斷和發(fā)現(xiàn)尋求別的輔助方法,,以達(dá)到準(zhǔn)確,完整的病理診斷,。一,、染色目的 病理學(xué)的所有切片,都必須通過一種以上的染料,,通過各種不同的方法,,將切片中各種不同的物質(zhì),,在不同染液的作用下,將其顯示出來,,使之在光學(xué)顯微鏡下,,能夠完全的觀看各種結(jié)構(gòu)。例如,,HE染色,,好質(zhì)量的切片可以清晰地顯示出多不同的結(jié)構(gòu),,細(xì)胞核著藍(lán)黑色,細(xì)胞漿著粉紅色,,軟骨著藍(lán)色等,。清晰的結(jié)構(gòu)為診斷提供的依據(jù),因此,,染色技術(shù)也是病理技術(shù)中的重要組成部分,,必須不斷地總結(jié),方能提高,。
HE染色是蘇木精 — 伊紅染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ,,簡稱HE染色法 ,石蠟切片技術(shù)里常用的染色法之一 ,。蘇木精染液為堿性 ,,主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核酸著紫藍(lán)色 ;伊紅為酸性染料 ,主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色 ,。HE染色法是組織學(xué),、胚胎學(xué)、病理學(xué)教學(xué)與科研中**基本,、使用*****的技術(shù)方法,。由于組織或細(xì)胞的不同成分對蘇木精的親和力不同及染色性質(zhì)不一樣。經(jīng)蘇木精染色后,,細(xì)胞核及鈣鹽粘液等呈藍(lán)色,,可用鹽酸酒精分化和弱堿性溶液顯藍(lán),如處理適宜,,可使細(xì)胞核著清楚的深藍(lán)色,,胞漿等其它成分脫色。再利用胞漿染料伊紅染胞漿,,使胞漿的各種不同成分又呈現(xiàn)出深淺不同的粉紅色。故各種組織或細(xì)胞成分與病變的一般形態(tài)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)均可顯示出來,。石蠟組織切片的HE染色,。
HE染色全名蘇木精—伊紅染色法,屬于化學(xué)染色法,,其主要依靠蘇木精染液為堿性,,主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍(lán)色;伊紅為酸性染料,,主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色,。實(shí)驗(yàn)過程:1、石蠟切片脫蠟至水:依次將切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-無水乙醇Ⅰ5min-無水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min,,自來水洗。2,、蘇木素染色:切片入蘇木素染液染3-5min,,自來水洗,,分化液分化,自來水洗,,返藍(lán)液返藍(lán),,流水沖洗。3,、伊紅染色:切片依次入85%、95%的梯度酒精脫水各5min,,入伊紅染液中染色5min,。4、脫水封片:切片依次放入無水乙醇I5min-無水乙醇II5min-無水乙醇Ⅲ5min-二甲Ⅰ5min-二甲苯Ⅱ5min透明,,中性樹膠封片,。5、顯微鏡鏡檢,,圖像采集分析,。結(jié)果判讀:細(xì)胞核呈藍(lán)色,細(xì)胞質(zhì)呈紅色常用HE染色試劑配制方法,。浙江推薦的HE染色公司
比較基礎(chǔ)的病理染色HE染色,。內(nèi)蒙古專業(yè)的HE染色哪家好
HE染色反藍(lán)的原理:蘇木素染液,細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)主要是去氧核糖核酸(DNA),DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)中,,兩條鏈上的磷酸基向外,帶負(fù)電荷,,呈酸性,,很容易與帶正電荷的蘇木素精堿性染料以離子或氫鍵結(jié)合而被染色。蘇木精在堿性溶液中呈藍(lán)色,,所以細(xì)胞核被染成藍(lán)色,。 分化:蘇木素染色之后,用水洗去未結(jié)合在細(xì)胞上的染液,,但是在細(xì)胞核中結(jié)合過多的染料和細(xì)胞漿中吸附的染料必須用分化液1%鹽酸酒精脫去,才能保證細(xì)胞核和細(xì)胞漿染色的分明,,把這個過程稱為染色的分化作用,。因酸能破壞蘇木素的醌型結(jié)構(gòu),使色素與組織解離,,分化不可過度,。藍(lán)化:分化之后蘇木素在酸性條件下處于紅色離子狀態(tài),在堿性條件下處于藍(lán)色離子狀態(tài),,而呈藍(lán)色,,所以分化之后用水洗去酸而中止分化,再用弱堿性水使蘇木精染上的細(xì)胞核變呈藍(lán)色,,稱藍(lán)化作用,,一般多用自來水浸洗即可變藍(lán),也可用溫水(50度溫水比較好)變藍(lán),。內(nèi)蒙古專業(yè)的HE染色哪家好