HE染色常見問題:Q3:細(xì)胞核染色過淺,,顏色暗淡答:切片在蘇木素染液中停留過短,,或蘇木素過度氧化失效,或分化時(shí)間太長,。對策:重新染色,。將組織切片放入0.01%氫氧化鈉、0.5%氨水,、飽和的碳酸氫鈉溶液,、乙醇溶液,每個(gè)3-5min即可,,接著重新染色,。可以適當(dāng)?shù)亟M織的嗜堿性以增強(qiáng)核染色,,如Zenker液固定的切片可放入5%碳酸氫鈉溶液中3h,,自來水沖洗5-10min染色,或Bouin液固定的切片可放入5%碳酸氫鈉溶液中1h,,自來水沖洗10min染色,。Q4:細(xì)胞核染色過深,胞漿著藍(lán)色答:切片在蘇木素染液中停留過長,;或切片太厚,;或分化時(shí)間太短。這種情況首先鏡下看看切片厚度(比較好厚度1-2層細(xì)胞核),,要么重新染色,,要么重新制片。南京英瀚斯,,專業(yè)的病理染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺(tái),。HE染色結(jié)果如果使用計(jì)算機(jī)分析軟件分析?寧夏質(zhì)量好的HE染色公司
HE染色細(xì)胞核被蘇木精染成鮮明的藍(lán)色,,軟骨基質(zhì),、鈣鹽顆粒呈深藍(lán)色,粘液呈灰藍(lán)色,。細(xì)胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色,,胞漿內(nèi)嗜酸性顆粒呈反光強(qiáng)的鮮紅色。膠原纖維呈淡粉紅色,,彈力纖維呈亮粉紅色,,紅血球呈橘紅色,蛋白性液體呈粉紅色。著***況與組織或細(xì)胞的種類有關(guān),,也隨其生活周期及病理變化而改變,。例如,細(xì)胞在新生時(shí)期胞漿對伊紅著色較淡或輕度嗜堿,,當(dāng)其衰老時(shí)或發(fā)生退行性變則呈現(xiàn)嗜伊紅濃染,。膠原纖維在老化和出現(xiàn)透明變性時(shí),伊紅著色由淺變深,。上海HE染色哪家好HE染色試驗(yàn)技術(shù)及注意事項(xiàng),。
HE染色反藍(lán)的原理:蘇木素染液,細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)主要是去氧核糖核酸(DNA),DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)中,,兩條鏈上的磷酸基向外,,帶負(fù)電荷,呈酸性,,很容易與帶正電荷的蘇木素精堿性染料以離子或氫鍵結(jié)合而被染色,。蘇木精在堿性溶液中呈藍(lán)色,所以細(xì)胞核被染成藍(lán)色,。 分化:蘇木素染色之后,,用水洗去未結(jié)合在細(xì)胞上的染液,但是在細(xì)胞核中結(jié)合過多的染料和細(xì)胞漿中吸附的染料必須用分化液1%鹽酸酒精脫去,,才能保證細(xì)胞核和細(xì)胞漿染色的分明,,把這個(gè)過程稱為染色的分化作用。因酸能破壞蘇木素的醌型結(jié)構(gòu),,使色素與組織解離,,分化不可過度。藍(lán)化:分化之后蘇木素在酸性條件下處于紅色離子狀態(tài),,在堿性條件下處于藍(lán)色離子狀態(tài),,而呈藍(lán)色,,所以分化之后用水洗去酸而中止分化,,再用弱堿性水使蘇木精染上的細(xì)胞核變呈藍(lán)色,稱藍(lán)化作用,,一般多用自來水浸洗即可變藍(lán),,也可用溫水(50度溫水比較好)變藍(lán)。
HE染色常見問題:切片染色不均勻,,有片狀的弱著**存在答:(1)取材時(shí)組織太厚,,固定過久,導(dǎo)致深部組織固定不佳,,而表淺組織過度固定,,而透明、脫水、浸蠟均是如此,,這樣在后期染色時(shí)就會(huì)出現(xiàn)染色不均勻,。應(yīng)該將厚的組織剖開固定。(2)制片過程有問題,,切片厚薄不一,,或者有刀痕,或組織與玻片間存在氣泡,。同一張切片厚薄不一,,一般都是在制片時(shí),刀片固定不佳或刀片鈍或刀片與組織角度不佳(一般比較好角度為5°)(3)脫蠟前未烘烤,,脫蠟時(shí)間過短或脫蠟液使用過久,,導(dǎo)致脫蠟不徹底。(4)染色液過少,,著色不均勻,;或染色時(shí)部分組織干涸而另一部分濕潤,這樣會(huì)導(dǎo)致組織吸附染料的能力不一,。(5)分化不當(dāng),。南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺(tái),。什么是HE染色,,HE染色實(shí)驗(yàn)的目的。
HE 染色是病理的主要常規(guī)染色,,其命名是因?yàn)橹饕褂玫膬煞N試劑分別為Hematoxylin與Eosin Y,,藉由電荷與吸附性的差異,組織結(jié)構(gòu)對不同染料的結(jié)合程度不同,,我們可以發(fā)現(xiàn)Hematoxylin呈色在細(xì)胞核,,Eosin Y則表現(xiàn)在細(xì)胞質(zhì)與間質(zhì),染色優(yōu)良的片子可以幫助我們在顯微鏡下看到清晰的細(xì)胞型態(tài)與變化,。染色步驟依試劑提供者的建議而有所差異,,而且每個(gè)實(shí)驗(yàn)室需要的顏色深淺不一,使用者可以依自己的需求另行調(diào)整,,以下是力沛有限公司建議的HE染色步驟冰凍切片是否可以做HE染色,?寧夏質(zhì)量好的HE染色公司
腦組織HE染色如何觀察?寧夏質(zhì)量好的HE染色公司
HE染色:在組織病理學(xué)中,,蘇木素-伊紅染色是一種日常使用比較普遍的常規(guī)染色方法,。常規(guī)蘇木素染色的對比染色是用伊紅,也有采用焰紅,,因?yàn)檠婕t比伊紅色澤更鮮明,,還有采用橘黃G,,比布里希猩紅,波爾多紅等作為對比染色,。伊紅是比較常用的胞質(zhì)染料,,本身溶于醇而不溶于水,為磚紅色粉末狀或醬紅色結(jié)晶,。配方:伊紅Y(水溶)0.5-1g,,蒸餾水99ml。如果取用伊紅Y(醇溶性)應(yīng)當(dāng)溶于99ml 75%或95%的乙醇中,。如果在伊紅液中加入0.5ml冰醋酸,,可以加速其染色過程,使得胞質(zhì)的色澤更加艷麗,。結(jié)果是細(xì)胞核呈藍(lán)色,,胞質(zhì)、肌肉,、結(jié)締組織,、紅細(xì)胞和嗜伊紅顆粒呈不同程度的紅色。鈣鹽和各種微生物也可染成藍(lán)色或紫藍(lán)色,。寧夏質(zhì)量好的HE染色公司