HE染色細(xì)胞質(zhì)過染分析及應(yīng)對(duì)原因:(1)伊紅染色液濃度太高,特別是焰紅燃料,、四溴四氯熒光素鈉的存在,;(2)切片在伊紅染色時(shí)間過長(zhǎng);(3)切片在伊紅染色后經(jīng)乙醇脫水步驟時(shí)過的太快,,而使乙醇分化伊紅的作用不能產(chǎn)生,。對(duì)策:適當(dāng)稀釋伊紅染色液,減少伊紅染色時(shí)間,,或者使切片在乙醇脫水等步驟時(shí),,停留時(shí)間相對(duì)均勻。同樣,,也要檢查切片的厚度是否合適,。切片中出現(xiàn)藍(lán)黑色沉淀物分析及應(yīng)對(duì)原因:蘇木精染色液中的金屬膜,黏附在玻片上,。對(duì)策:每天染色前仔細(xì)過濾蘇木精染色液,,或建議使用半氧化蘇木精染色液,如Gill蘇木精染色液,可以避免過多的金屬膜產(chǎn)生,。常用HE染色試劑配制方法,。湖北比較好的HE染色價(jià)格
HE染色常見問題:Q5:細(xì)胞核呈棕紅色改變答:蘇木素染液過度氧化;或蘇木素染色后反藍(lán)不足導(dǎo)致,。應(yīng)該立即更換蘇木素染色液,。或在流動(dòng)自來水(一般自來水PH7.5-7.8),,或在稀釋的氨水溶液,,或在0.2%碳酸氫鈉中適當(dāng)浸泡,這些步驟均可一定程度地加強(qiáng)蘇木素染色后的反藍(lán)效果,。Q6:伊紅染色較淡答:伊紅的PH改變了(PH可能已大于5),;或反藍(lán)液體未漂洗干凈,殘留后影響胞漿嗜酸性染色,;或者切片太薄并且在隨后的脫水步驟停留過久,。對(duì)策:檢查伊紅染色液PH,可采用乙酸調(diào)至4.6-5.0,。根據(jù)以上提示,,調(diào)整實(shí)驗(yàn)步驟,。山東值得信賴的HE染色多少錢什么是HE染色,HE染色實(shí)驗(yàn)的目的,。
HE染色知識(shí)點(diǎn)1:對(duì)送檢組織標(biāo)本的要求送檢組織標(biāo)本在手術(shù)切除或活檢后應(yīng)當(dāng)立即放入4%中性緩沖甲醛溶液中固定,。尸檢標(biāo)本應(yīng)當(dāng)盡量在死亡后盡早取材固定。送檢組織需要全部取材的,,應(yīng)當(dāng)在送檢單上注明,,有特殊要求(如細(xì)菌培養(yǎng)、解釋道化學(xué)分析等)應(yīng)當(dāng)事先聯(lián)系,,并且在標(biāo)本未固定前進(jìn)行處理,。知識(shí)點(diǎn)2:組織取材要求在對(duì)送檢組織標(biāo)本進(jìn)行詳細(xì)檢查的基礎(chǔ)上,根據(jù)診斷的需要,,確定取材的部位和塊數(shù),。切取的組織應(yīng)當(dāng)按照不同的部位分別給予不同的編號(hào)或標(biāo)記,以便鏡檢時(shí)核對(duì),。另外,,盡可能在取材前對(duì)有意義的標(biāo)本的表面及剖面鏡下攝影,并編號(hào)存檔南京英瀚斯,,專業(yè)的病理染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺(tái),。
HE染色:在組織病理學(xué)中,蘇木素-伊紅染色是一種日常使用比較普遍的常規(guī)染色方法,。常規(guī)蘇木素染色的對(duì)比染色是用伊紅,,也有采用焰紅,因?yàn)檠婕t比伊紅色澤更鮮明,,還有采用橘黃G,,比布里希猩紅,波爾多紅等作為對(duì)比染色,。伊紅是比較常用的胞質(zhì)染料,,本身溶于醇而不溶于水,為磚紅色粉末狀或醬紅色結(jié)晶,。配方:伊紅Y(水溶)0.5-1g,,蒸餾水99ml。如果取用伊紅Y(醇溶性)應(yīng)當(dāng)溶于99ml 75%或95%的乙醇中,。如果在伊紅液中加入0.5ml冰醋酸,,可以加速其染色過程,使得胞質(zhì)的色澤更加艷麗,。結(jié)果是細(xì)胞核呈藍(lán)色,,胞質(zhì)、肌肉,、結(jié)締組織,、紅細(xì)胞和嗜伊紅顆粒呈不同程度的紅色。鈣鹽和各種微生物也可染成藍(lán)色或紫藍(lán)色,。HE染色技術(shù)幾種常見的染色問題,。
HE染色常見問題:成片的染色模糊不清,灰染答:(1)組織未及時(shí)固定,,部分自溶,;或固定不佳,深部組織未處理到,。這種只能重新固定了,。(2)盡管乙醇也是一種固定液,但盡量少用或不用,,因?yàn)槠鋾?huì)導(dǎo)致組織發(fā)硬變脆,,染色效果不好。(3)包埋時(shí)蠟的溫度過高,,或切片后烤片時(shí)間和溫度過久過高都不好,,可能會(huì)導(dǎo)致無(wú)法染色。(4)脫蠟不徹底,;染料有問題,;分化過度導(dǎo)致的顏色變淡,鏡下組織界限不清,;染完后的脫水和透明不佳,,水霧殘留在組織上。(5)通風(fēng)窗中(防止空氣中的水霧),,戴口罩操作封片(減少哈氣帶來的水霧),。骨組織HE染色的操作流程。湖北比較好的HE染色價(jià)格
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HE染色實(shí)驗(yàn)步驟:(1)樣品制備:對(duì)于貼壁生長(zhǎng)細(xì)胞,胰酶消化,,調(diào)整細(xì)胞濃度約1×105/ml,,滴加于蓋玻片上(置于6孔板中),培養(yǎng)相應(yīng)時(shí)間后,,取出細(xì)胞爬片,,用PBS洗滌3次。(2)樣品固定:95%乙醇固定20min,,PBS洗滌2次,,每次1min。(3)染核:蘇木素染液染色2-3min,,自來水洗滌,。(4)分色:鏡下觀察,,若細(xì)胞核染色過深,用1%鹽酸酒精溶液分色數(shù)秒,,自來水洗滌。(5)染胞質(zhì):浸入伊紅染液染色1min,,自來水洗滌,。(6)吹干或自然晾干細(xì)胞爬片后,中性樹膠封片,。若細(xì)胞用4%多聚甲醛固定,,則染色時(shí)間相應(yīng)延長(zhǎng),蘇木素染色12-15min,,伊紅5min即可湖北比較好的HE染色價(jià)格