HE染色堿染料染主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著色。學(xué)上常用的一種染色方法為蘇木精 伊紅染色法,。蘇木精 伊紅染色法 （ hematoxylin-eosin staining ） ,，簡(jiǎn)稱HE染色法 ，石蠟切片技術(shù)里常用的染色法之一 ,。蘇木精染液為堿 ,，主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍(lán)色 ；伊紅為酸染料 ,，主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色 ,。細(xì)胞核被蘇木精染成鮮明的藍(lán)色，軟骨基質(zhì),、鈣鹽顆粒呈深藍(lán)色,，粘液呈灰藍(lán)色。細(xì)胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色,，胞漿內(nèi)嗜酸顆粒呈強(qiáng)的鮮紅色,。膠原纖維呈淡粉紅色，力纖維呈亮粉紅色,，紅血球呈橘紅色,，蛋白液體呈粉紅色。HE染色需要哪些材料及實(shí)驗(yàn)步驟,。浙江推薦的HE染色檢測(cè)

HE染色切片中出現(xiàn)類似色素樣的點(diǎn)狀結(jié)晶和黑色光滑的細(xì)胞核原因：切片封片前放置在空氣中時(shí)間太長(zhǎng),，以至于二甲苯揮發(fā)切片干燥所致。對(duì)策：移去組織切片上的蓋玻片和封固劑,，重新處理,。將切片水洗數(shù)分鐘，然后重新脫水,、透明,、封固。封片過程中要保持組織切片的輕度濕潤,，盡量不要讓其干燥。細(xì)胞核呈紅,、棕色改變?cè)颍禾K木精染色液過度氧化和切片在蘇木精染液染色后返藍(lán)不足,。對(duì)策：首先，每次染色之前檢查蘇木精染色液的染色能力，發(fā)現(xiàn)氧化過度應(yīng)及時(shí)更換,。其次,，可用流水、溫水或弱堿性溶液如稀氨水,、0.2%碳酸氫鈉等,，在蘇木精染色后，給切片以足夠的藍(lán)化時(shí)間,。浙江推薦的HE染色檢測(cè)海馬組織HE染色如何觀察,。

HE染色樣本組織固定與切片：首先將組織樣本進(jìn)行常規(guī)的石蠟包埋。在模具中加入液態(tài)石蠟,，將待包埋的組織樣本放入石蠟中,，確保組織位置規(guī)整。補(bǔ)充少許液態(tài)的石蠟后,，進(jìn)行降溫冷凍,，使石蠟變?yōu)楣虘B(tài)達(dá)到組織固定的效果，然后使用石蠟切片機(jī)進(jìn)行切片,，厚度在４-８um左右,。將切完后的組織切片放入載玻片上使用40℃溫水浸泡使組織充分伸展。組織樣本脫蠟：將待測(cè)組織樣本切片放于二甲苯中,，充分浸泡10min,，浸泡完后更換二甲苯繼續(xù)浸泡10min，目的是使用二甲苯將切片中的石蠟溶解,，這樣可以在進(jìn)行染液染色的時(shí)候,，染液可以充分進(jìn)入組織種，同時(shí),，二甲苯還可以起到透明的作用,，使切片更容易觀察。

HE染色：在組織病理學(xué)中,，蘇木素-伊紅染色是一種日常使用比較普遍的常規(guī)染色方法,。常規(guī)蘇木素染色的對(duì)比染色是用伊紅，也有采用焰紅,，因?yàn)檠婕t比伊紅色澤更鮮明,，還有采用橘黃G，比布里希猩紅,，波爾多紅等作為對(duì)比染色,。伊紅是比較常用的胞質(zhì)染料，本身溶于醇而不溶于水,，為磚紅色粉末狀或醬紅色結(jié)晶,。配方：伊紅Y（水溶）0.5-1g,，蒸餾水99ml。如果取用伊紅Y（醇溶性）應(yīng)當(dāng)溶于99ml 75%或95%的乙醇中,。如果在伊紅液中加入0.5ml冰醋酸,，可以加速其染色過程，使得胞質(zhì)的色澤更加艷麗,。結(jié)果是細(xì)胞核呈藍(lán)色,，胞質(zhì)、肌肉,、結(jié)締組織,、紅細(xì)胞和嗜伊紅顆粒呈不同程度的紅色。鈣鹽和各種微生物也可染成藍(lán)色或紫藍(lán)色,。肺部組織HE染色如何觀察,。

HE染色脫蠟不凈的原因及驗(yàn)證方法：1)二甲苯使用過久，含蠟成分太高或脫蠟效果差：可更換二甲苯驗(yàn)證,。2)切片經(jīng)烤片,，冷卻后放入二甲苯脫蠟或室溫太低；延長(zhǎng)拖拉時(shí)間或用熱的切片脫蠟驗(yàn)證,。3)脫蠟時(shí)間太短或振蕩太少,，幅度太小,；可延長(zhǎng)脫蠟時(shí)間或以多振蕩來驗(yàn)證,。4)洗滌二甲苯用的乙醇使用時(shí)間過久，導(dǎo)致乙醇中二甲苯含量過高,，二甲苯殘留在切片上（由于二甲苯與水不相溶,，切片上有二甲苯的地方，蘇木精就沒有辦法滲透進(jìn)去,，在切片染色完成后留下了點(diǎn)狀的不著**域）：更換各道乙醇驗(yàn)證,。5)二甲苯、乙醇質(zhì)量不佳（偶有試劑瓶?jī)?nèi)裝的試劑與試劑名不相符）：換批號(hào)驗(yàn)證,。6)更換脫蠟液體時(shí)試劑拿錯(cuò)：需重新配置驗(yàn)證,。7)更換脫蠟液體時(shí)試劑次序放錯(cuò)：需重新配置驗(yàn)證。8)烤片時(shí)間短,，切片上水分沒有烤干,，也會(huì)導(dǎo)致著色不勻，出現(xiàn)點(diǎn)狀發(fā)白區(qū)域,。HE染色切片知識(shí)以及如何做出漂亮的切片,。浙江推薦的HE染色檢測(cè)

HE染色規(guī)范化流程以及注意事項(xiàng)。浙江推薦的HE染色檢測(cè)

HE染色原理：一,、細(xì)胞核染色原理：蘇木精為堿性天然染料,，可使細(xì)胞核著色,。細(xì)胞核內(nèi)染色質(zhì)的成分主要是DNA,，在DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)中,，兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外。使DNA雙螺旋的外側(cè)帶負(fù)電荷,，呈酸性,，很容易與帶正電荷的蘇木精堿性燃料以離子鍵或氫鍵結(jié)合而被染色。蘇木精在堿性溶液中呈藍(lán)色,，所以細(xì)胞核被染成藍(lán)色,。二、細(xì)胞漿染色原理：細(xì)胞漿內(nèi)主要成分是蛋白質(zhì),，為兩性化合物,、細(xì)胞漿的染色與pH值有密切關(guān)系，當(dāng)pH調(diào)到蛋白質(zhì)等電點(diǎn)4.7-5.0時(shí),，胞漿對(duì)外不顯電性,，此時(shí)酸或堿性染料不易染色。當(dāng)pH調(diào)到6.7-6.8時(shí),，大于蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)pH值,，表現(xiàn)酸性電離，而帶負(fù)電荷的陰離子,，可被帶正電荷的染料染色,，現(xiàn)時(shí)胞核也被染色，核和胞漿難以區(qū)分,。因此必須把pH調(diào)至胞漿等電點(diǎn)以下,，在染液中加入醋酸使胞漿帶正電荷（陽離子），就可被帶負(fù)電荷（陰離子）的染料染色,。伊紅Y是一種化學(xué)合成的酸性染料,，在水中離解成帶負(fù)電荷的陰離子，與蛋白質(zhì)的氨基正電荷（陽離子）結(jié)合而使細(xì)胞漿染色,，細(xì)胞漿,、紅細(xì)胞、肌肉,、結(jié)締組織,，嗜伊紅顆料等被***成不同程度的紅色或粉紅色，與藍(lán)色的細(xì)胞核形成鮮明的對(duì)比浙江推薦的HE染色檢測(cè)