外泌體的提取主要包括以下幾種方式。一是超速離心法,，這是目前外泌體提取較常用的方法,。此種方法得到的外泌體量多，但是純度不足,，電鏡鑒定時(shí)發(fā)現(xiàn)外泌體聚集成塊,，由于微泡和外泌體沒有非常統(tǒng)一的鑒定標(biāo)準(zhǔn)，也有一些研究認(rèn)為此種方法得到的是微泡不是外泌體,。二是過濾離心，這種操作簡(jiǎn)單,、省時(shí),，不影響外泌體的生物活性，但同樣存在純度不足的問題,。三是密度梯度離心法,，用此種方法分離到的外泌體純度高,，但是前期準(zhǔn)備工作繁雜,，耗時(shí)，量少,。膜受體的識(shí)別是外泌體細(xì)胞反應(yīng)的基礎(chǔ),，它可能活躍受體并隨后導(dǎo)致相關(guān)信號(hào)通路的活躍。外泌體顯示出了在診療各種疾?。ㄈ缧募〔『蜕窠?jīng)?。┓矫娴臐摿Α：蓖饷隗wcircRNA測(cè)序

Exosome,，中文名外泌體,，是一種能被大多數(shù)細(xì)胞分泌的微小膜泡，具有脂質(zhì)雙層膜結(jié)構(gòu)，直徑大約40-100nm,。盡管外泌體較初在1983年就被發(fā)現(xiàn),，但人們一直認(rèn)為它只是一種細(xì)胞的廢棄物。然而較近幾年,，人們發(fā)現(xiàn)這種微小膜泡中含有細(xì)胞特異的蛋白,、脂質(zhì)和核酸，能作為信號(hào)分子傳遞給其他細(xì)胞從而改變其他細(xì)胞的功能,。這些發(fā)現(xiàn)點(diǎn)燃了人們對(duì)細(xì)胞分泌膜泡的興趣。2015年,，隨著精確醫(yī)學(xué)概念的提出,，越來越多的人開始關(guān)注如何能做到疾病的精確診斷和診療。外泌體作為一個(gè)新型的研究熱點(diǎn),，由于它在體內(nèi)存在的普遍性和獲取的便捷性,，已經(jīng)成為了疾病診斷診療的潛在有效方式，在精確醫(yī)學(xué)發(fā)展上有著光明的前景,。外泌體的提取的方式：超速離心法,。細(xì)胞外泌體PKH67外泌體的提取的方式：密度梯度離心法。

流式細(xì)胞技術(shù)是細(xì)胞和小顆粒定性和定量表征的有效方法,，其用于外泌體定量檢測(cè)的準(zhǔn)確性也在不斷上升,。將外泌體表面特異性標(biāo)志物CD63、CD81等相應(yīng)抗體進(jìn)行標(biāo)記,，可用流式細(xì)胞儀檢測(cè)到陽(yáng)性表達(dá),，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)外泌體的定量。但流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)時(shí)需要單顆粒懸浮液,，當(dāng)外泌體濃度高或分離過程中發(fā)生外泌體囊泡聚集時(shí)將導(dǎo)致一次觀察到多個(gè)顆粒,，從而導(dǎo)致數(shù)據(jù)不準(zhǔn)確。因此,，為了通過流式細(xì)胞儀觀察，需要將外泌體通過免疫捕獲或共價(jià)結(jié)合固定在磁珠表面上,，從而便于將外泌體囊泡暴露于已知或者預(yù)期在外泌體表面表達(dá)的抗原的熒光偶聯(lián)抗體中,。在流式細(xì)胞術(shù)之前，可以在落射熒光顯微鏡（EPI）下觀察與磁珠和熒光抗體偶聯(lián)的外泌體囊泡,。當(dāng)樣品通過流式細(xì)胞儀時(shí)采集熒光信號(hào),，不只可以對(duì)外泌體進(jìn)行高通量分析，還可以基于抗原表達(dá)對(duì)外泌體進(jìn)行定量或分類,。

外泌體病毒傳染：外泌體可以限制或促進(jìn)病毒傳染,。如IFNα或APOBEC3G等外泌體載體可通過限制病毒復(fù)制或增強(qiáng)抗病毒免疫來阻止傳染。病毒也可以劫持外泌體的生物發(fā)生機(jī)制來促進(jìn)病毒的傳播,。外泌體可以作為一個(gè)假包膜,，通過四聚體蛋白(CD81,CD9)和PtSer相互作用增強(qiáng)病毒進(jìn)入受體細(xì)胞,，并幫助逃避抗病毒免疫。病毒組分(蛋白質(zhì)和miRNA)的共轉(zhuǎn)運(yùn)也可能增強(qiáng)傳染性,。外泌體介導(dǎo)的病毒轉(zhuǎn)移可能參與了病毒的遺傳協(xié)同和多重傳染.(CMV,巨細(xì)胞病毒,；HSV-1,1型皰疹病毒)。通過臨床數(shù)據(jù)分析顯示外泌體整合素可作為預(yù)測(cè)腫細(xì)胞轉(zhuǎn)移的部位傾向性的診斷指標(biāo),。

血漿中的外泌體蛋白既可以當(dāng)作標(biāo)志物,，也可以進(jìn)行機(jī)理研究？首先,，研究人員將慢性淋巴瘤（CLL）患者分為2個(gè)亞組：疾病進(jìn)展期和疾病慢性期,。然后利用質(zhì)譜技術(shù)分析了患者血漿外泌體蛋白組，發(fā)現(xiàn)S100-A9蛋白在進(jìn)展期CLL患者中明顯高表達(dá),，可以作為CLL進(jìn)展期診斷的輔助標(biāo)志物,。進(jìn)一步，研究人員通過生信分析發(fā)現(xiàn)進(jìn)展期CLL患者外泌體中的高表達(dá)蛋白質(zhì)主要與炎癥和氧化應(yīng)激有關(guān),，而NF-κB通路正是承接此效應(yīng)的關(guān)鍵通路,。通過從進(jìn)展期CLL患者中分離富含S100-A9蛋白的外泌體加入CLL患者的PBMC細(xì)胞中，證實(shí)了S100-A9+外泌體能夠明顯促進(jìn)進(jìn)展期CLL患者PBMC細(xì)胞中IκBα蛋白的磷酸化上調(diào),，進(jìn)一步活躍NF-κB通路,。研究證通過血漿外泌體蛋白組分析不只找到輔助診斷進(jìn)展期CLL的標(biāo)志物，并證實(shí)了S100-A9+外泌體可通過形成正向反饋調(diào)控,，不斷活躍進(jìn)展期CLL患者自身PBMC細(xì)胞中的NF-κB通路,，促進(jìn)CLL進(jìn)展的特殊機(jī)理。采用磁珠法時(shí),，外泌體生物活性易受PH和鹽濃度影響,。細(xì)胞外泌體Dil

在免疫系統(tǒng)中，據(jù)報(bào)道趨化因子受體CCR5通過外泌體在細(xì)胞之間轉(zhuǎn)移是細(xì)胞人類免疫缺陷病毒傳染的一種機(jī)制,。湖北外泌體circRNA測(cè)序

AFC自動(dòng)收集器是將qEV分離法這一過程自動(dòng)化的儀器,，將用來收集外泌體樣本的微量離心管放置在AFC的中間轉(zhuǎn)盤內(nèi)，根據(jù)稱重精確測(cè)量流體體積,，可精確的測(cè)量到樣品中每一個(gè)液滴的重量并精確測(cè)量總重量,。將在空隙體積之前從qEV柱洗脫的流體收集到AFC轉(zhuǎn)盤的單獨(dú)中心孔中并送至廢液桶，避免將不需要的空隙部分收集到微量離心管中,。在提取期間,，當(dāng)達(dá)到設(shè)定的提取體積后，轉(zhuǎn)盤會(huì)自動(dòng)旋轉(zhuǎn)到下一個(gè)微量離心管繼續(xù)收集,，到收集完成后自動(dòng)停止,。微滴式數(shù)字PCR技術(shù)不佳有效提高了核酸分子的擴(kuò)增效率，而且由于采用微滴計(jì)數(shù)的方法進(jìn)行定量,，可以不依賴與RT-PCR的熒光信號(hào)和Ct值,，對(duì)所測(cè)樣品中的核酸分子進(jìn)行一定定量,。湖北外泌體circRNA測(cè)序

上海宇玫博生物科技有限公司主營(yíng)品牌有Umibio,，發(fā)展規(guī)模團(tuán)隊(duì)不斷壯大,，該公司生產(chǎn)型的公司。是一家外商投資股份企業(yè)企業(yè),，隨著市場(chǎng)的發(fā)展和生產(chǎn)的需求,，與多家企業(yè)合作研究，在原有產(chǎn)品的基礎(chǔ)上經(jīng)過不斷改進(jìn),，追求新型,，在強(qiáng)化內(nèi)部管理，完善結(jié)構(gòu)調(diào)整的同時(shí),，良好的質(zhì)量,、合理的價(jià)格、完善的服務(wù),，在業(yè)界受到寬泛好評(píng),。公司擁有專業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊(duì)，具有外泌體提取試劑盒,，外泌體,，外泌體檢測(cè)，外泌體提取等多項(xiàng)業(yè)務(wù),。宇玫博生物自成立以來,，一直堅(jiān)持走正規(guī)化、專業(yè)化路線,，得到了廣大客戶及社會(huì)各界的普遍認(rèn)可與大力支持,。