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外泌體時(shí)光針是啥

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2023-03-26

細(xì)胞攝取診療性外泌體:從樹突狀細(xì)胞、成纖維細(xì)胞和間充質(zhì)細(xì)胞中分離出的診療性外泌體可對(duì)靶細(xì)胞產(chǎn)生特定的作用,,包括新抗原呈遞,、免疫調(diào)節(jié)和藥物有效載荷傳遞。診療性外泌體對(duì)靶細(xì)胞的影響可能是通過(guò)不同的進(jìn)入或相互作用機(jī)制來(lái)控制的,。完整的外泌體的進(jìn)入可能包括受體介導(dǎo)的內(nèi)吞作用、網(wǎng)格蛋白包被小凹,、脂筏,、吞噬作用、小凹和大胞飲作用,。外泌體內(nèi)容物的進(jìn)入或外泌體信號(hào)的誘導(dǎo)可能涉及配體受體誘導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)信號(hào)或融合,,從而將外泌體內(nèi)容物沉積到細(xì)胞質(zhì)中。外泌體膜可以與靶細(xì)胞膜直接融合,,非選擇性的釋放其所含的蛋白質(zhì),、mRNA以及microRNA。外泌體時(shí)光針是啥

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NTA技術(shù)已被作為外泌體表征手段之一,,相較于其他表征方式NTA技術(shù)的樣本處理更簡(jiǎn)單,、更能保證外泌體原始狀態(tài),、檢測(cè)速度更快。大致方法是:將分離的外泌體樣本注入納米顆粒追蹤分析儀,,用激光光束穿過(guò)樣本,,激光在腔室內(nèi)與顆粒相互作用時(shí)會(huì)發(fā)生散射,通過(guò)裝有攝像頭的顯微鏡收集散射光,,捕捉外泌體的布朗運(yùn)動(dòng),,實(shí)現(xiàn)顆粒可視化,。然后使用Stokes-Einstein方程來(lái)測(cè)量粒子的平均速度,,繼而估算粒子的大小。NTA能夠測(cè)量粒徑10-1000nm之間的顆粒,,包含了外泌體50-150nm的徑粒范圍,,但是NTA鑒定需要大于0.5毫升的樣品體積以及優(yōu)化的數(shù)據(jù)收集和分析參數(shù),另外,,NTA比較難區(qū)分與外泌體具有相似布朗運(yùn)動(dòng)的蛋白質(zhì)聚集體,,因此無(wú)法排除其他物質(zhì)的干擾。外泌體陰性標(biāo)志物外泌體可由間充質(zhì)干細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞和腫細(xì)胞細(xì)胞等多種類型細(xì)胞主動(dòng)分泌釋放,。

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外泌體研究背景:胞外囊泡是從細(xì)胞膜上脫落或者由細(xì)胞分泌的具有雙層膜結(jié)構(gòu)的囊泡狀小體,主要由微囊泡,、凋亡小體,、外泌體組成。而外泌體是其中一類小囊泡,,直徑為30~150nm,,密度1.10~1.18g/ml,可攜帶核酸,、蛋白質(zhì)質(zhì)和脂質(zhì)等,,存在于血液、唾液,、尿液等多種體液中,。越來(lái)越多的研究證實(shí),外泌體可以通過(guò)細(xì)胞間轉(zhuǎn)移核酸,、蛋白質(zhì),、脂質(zhì)等特定物質(zhì),發(fā)揮特殊的功能,。如在抗原提呈細(xì)胞中呈遞抗原程中,、腫細(xì)胞細(xì)胞發(fā)生了發(fā)展,、神經(jīng)細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程中都發(fā)揮著重要作用,。對(duì)外泌體的分析和檢測(cè)可以輔助疾病的早期診斷,、療效評(píng)價(jià)和預(yù)后分析。

Exosome,,中文名外泌體,,是一種能被大多數(shù)細(xì)胞分泌的微小膜泡,具有脂質(zhì)雙層膜結(jié)構(gòu),,直徑大約40-100nm,。盡管外泌體較初在1983年就被發(fā)現(xiàn),但人們一直認(rèn)為它只是一種細(xì)胞的廢棄物,。然而較近幾年,,人們發(fā)現(xiàn)這種微小膜泡中含有細(xì)胞特異的蛋白、脂質(zhì)和核酸,,能作為信號(hào)分子傳遞給其他細(xì)胞從而改變其他細(xì)胞的功能,。這些發(fā)現(xiàn)點(diǎn)燃了人們對(duì)細(xì)胞分泌膜泡的興趣。2015年,,隨著精確醫(yī)學(xué)概念的提出,,越來(lái)越多的人開始關(guān)注如何能做到疾病的精確診斷和診療。外泌體作為一個(gè)新型的研究熱點(diǎn),,由于它在體內(nèi)存在的普遍性和獲取的便捷性,,已經(jīng)成為了疾病診斷診療的潛在有效方式,在精確醫(yī)學(xué)發(fā)展上有著光明的前景,。外泌體的提取的方式:超速離心法,。外泌體作為核酸的藥物遞送載體。

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外泌體病毒傳染:外泌體可以限制或促進(jìn)病毒傳染,。如IFNα或APOBEC3G等外泌體載體可通過(guò)限制病毒復(fù)制或增強(qiáng)抗病毒免疫來(lái)阻止傳染,。病毒也可以劫持外泌體的生物發(fā)生機(jī)制來(lái)促進(jìn)病毒的傳播。外泌體可以作為一個(gè)假包膜,,通過(guò)四聚體蛋白(CD81,CD9)和PtSer相互作用增強(qiáng)病毒進(jìn)入受體細(xì)胞,,并幫助逃避抗病毒免疫。病毒組分(蛋白質(zhì)和miRNA)的共轉(zhuǎn)運(yùn)也可能增強(qiáng)傳染性,。外泌體介導(dǎo)的病毒轉(zhuǎn)移可能參與了病毒的遺傳協(xié)同和多重傳染.(CMV,巨細(xì)胞病毒,;HSV-1,1型皰疹病毒)。外泌體的納米球膜型結(jié)構(gòu)由雙層脂質(zhì)形成,。外泌體時(shí)光針是啥

外泌體作為小分子的藥物傳遞載體,。外泌體時(shí)光針是啥

外泌體提取在短時(shí)間(一周之內(nèi))使用,可以放在4度保存,,如果長(zhǎng)時(shí)間保存可以放在-20度或-80度保存,。也可以將外泌體進(jìn)行分裝,分別放在-20度或-80度,。外泌體檢測(cè)方法:外泌體分離之后,,需要經(jīng)過(guò)一系列鑒定才能確定分離的是外泌體,。鑒定方法從物理特征到表面分子標(biāo)志物,多角度進(jìn)行鑒定,。l,、透射電鏡鑒定法:簡(jiǎn)稱TEM,適合外泌體雙層囊膜超微結(jié)構(gòu)觀察,,即通常為茶托型或一側(cè)凹陷的半球形,。2、納米顆粒追蹤分析法:簡(jiǎn)稱NTA,,該方法能保證外泌體原始狀態(tài),、檢測(cè)速度快,檢測(cè)后能提供外泌體粒徑和濃度信息,。外泌體時(shí)光針是啥

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