外泌體的提取分離方法：1,、PEG-base沉淀法：聚乙二醇（PEG）可與疏水性蛋白和脂質(zhì)分子結(jié)合共沉淀,，早先應(yīng)用于從血清等樣本中收集病毒，現(xiàn)在也被用來沉淀外泌體,，其原理可能與競爭性結(jié)合游離水分子有關(guān),。利用PEG沉淀外泌體存在不少問題：比如純度和回收率低，雜蛋白較多（假陽性）,，顆粒大小不均一,，產(chǎn)生難以去除的聚合物，機(jī)械力或者吐溫-20等化學(xué)添加物將會破壞外泌體等，因此發(fā)表文章時(shí)易受質(zhì)疑,。2,、試劑盒提取：近幾年來,，市場上已出現(xiàn)各種商業(yè)化的外泌體提取試劑盒,，有的是通過特殊設(shè)計(jì)的過濾器過濾掉雜質(zhì)成分，有的則采用空間排阻色譜法(SEC)進(jìn)行分離純化,，也有的則利用化合物沉淀將法外泌體沉淀出來,。外泌體分離之后，需要經(jīng)過一系列鑒定才能確定分離的是外泌體,。外泌體細(xì)胞共培養(yǎng)

透射電子顯微鏡（TEM）和掃描電子顯微鏡（SEM）是用于評估外泌體形態(tài),、大小和表型的的兩種常見的電子顯微鏡。SEM和TEM均使用電子束產(chǎn)生高分辨率的亞微米顆粒放大圖像,，以區(qū)分外泌體與殘留在樣品中相似大小的非外泌體顆粒,，該方法還可用于檢查樣品的純度。TEM與SEM之間的區(qū)別在于檢測電子類別,，在SEM中,，電子與樣品中的粒子相互作用時(shí)會發(fā)生散射，捕獲并檢測散射的電子,，從而生成粒子圖像,。但是，在TEM中,，不與粒子相互作用的電子穿過樣品,，并使用熒光屏進(jìn)行檢測。電子顯微鏡下外泌體大小不一,，通常呈茶托樣的圓形或橢圓形,。采用電子顯微鏡檢測外泌體時(shí)對樣品的預(yù)處理和制備要求較高，外泌體的提取方法和品質(zhì)會對電鏡結(jié)果造成影響,；另外樣品的準(zhǔn)備階段比較復(fù)雜,，不適合進(jìn)行大量快速的測量；而且由于樣本經(jīng)過了干燥,、固定以及冷凍等預(yù)處理和制備過程,，對生物樣本的結(jié)構(gòu)會造成一定的破壞，從而影響觀察的效果,，無法準(zhǔn)確測量外泌體濃度,。腹膜透析液外泌體NTA外泌體的膜蛋白有可能與細(xì)胞膜蛋白作用，活躍細(xì)胞內(nèi)通路,。

透射電子顯微鏡（TEM）和掃描電子顯微鏡（SEM）是用于評估外泌體形態(tài),、大小和表型的的兩種常見的電子顯微鏡,。SEM和TEM均使用電子束產(chǎn)生高分辨率的亞微米顆粒放大圖像，以區(qū)分外泌體與殘留在樣品中相似大小的非外泌體顆粒,，該方法還可用于檢查樣品的純度,。TEM與SEM之間的區(qū)別在于檢測電子類別，在SEM中,，電子與樣品中的粒子相互作用時(shí)會發(fā)生散射,，捕獲并檢測散射的電子，從而生成粒子圖像,。但是,，在TEM中，不與粒子相互作用的電子穿過樣品,，并使用熒光屏進(jìn)行檢測,。電子顯微鏡下外泌體大小不一，通常呈茶托樣的圓形或橢圓形,。采用電子顯微鏡檢測外泌體時(shí)對樣品的預(yù)處理和制備要求較高,，外泌體的提取方法和品質(zhì)會對電鏡結(jié)果造成影響；另外樣品的準(zhǔn)備階段比較復(fù)雜,，不適合進(jìn)行大量快速的測量,；而且由于樣本經(jīng)過了干燥、固定以及冷凍等預(yù)處理和制備過程,，對生物樣本的結(jié)構(gòu)會造成一定的破壞,，從而影響觀察的效果，無法準(zhǔn)確測量外泌體濃度,。安徽植物外泌體鑒定磁珠免疫法分離的外泌體,，生物活性易受pH和鹽濃度影響，不利于下游實(shí)驗(yàn),，難以普遍普及。

外泌體的來源與特征：外泌體是一種存在于細(xì)胞外的多囊泡體,，通過細(xì)胞內(nèi)吞泡膜向內(nèi)凹陷形成,，其大小均一，直徑為40-100nm,，密度為1.10-1.18g/mL,。外泌體可由間充質(zhì)干細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和腫細(xì)胞細(xì)胞等多種類型細(xì)胞主動分泌釋放,。外泌體內(nèi)主要含有核酸,、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)等，可作為疾病診斷標(biāo)記物,、調(diào)控靶細(xì)胞功能,、參與細(xì)胞生物學(xué)活動等,。例如：含有miR-140-5p的滑膜間充質(zhì)干細(xì)胞來源外泌體(SMSC-Exo影響軟骨組織再生；骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞來源外泌體攜帶的miR-196a可調(diào)節(jié)成骨細(xì)胞分化促進(jìn)大鼠顱骨缺損的骨再生,。外泌體作為核酸的藥物遞送載體,。外泌體的提取的方式：密度梯度離心法。

免疫印跡或蛋白質(zhì)印跡是分析外泌體較常用的方法之一,，其原理是外泌體上特異性抗原與抗體結(jié)合,。首先對樣品進(jìn)行處理將囊泡裂解并將蛋白質(zhì)變性，變性后,，通過SDS-PAGE分離蛋白質(zhì),，然后將其轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素膜或聚偏二氟乙烯（PVDF）膜上并暴露于針對目的抗原的抗體中?？贵w特異性識別膜表面上的抗原,，然后將膜暴露于第二抗體中。通過二抗的熒光標(biāo)簽或與二抗偶聯(lián)的辣根過氧化物酶或堿性磷酸酶基團(tuán)進(jìn)行檢測,。常用的標(biāo)記蛋白為CD63,、CD81、TSG101和ALIX等,。但是此方法的特異性和重復(fù)性會受到所用抗體質(zhì)量的限制,。外泌體的直徑比微泡的要小，后者直徑為100nm-1μm,。從研究上來講并不太嚴(yán)格區(qū)分外泌體或微泡,。腹膜透析液外泌體NTA

外泌體存在于組織樣本中，如腦組織,、肌肉組織,、脂肪組織等。外泌體細(xì)胞共培養(yǎng)

外泌體遞送藥物的優(yōu)勢：許多新的候選藥物（例如蛋白質(zhì)和核酸）在體內(nèi)環(huán)境中高度不穩(wěn)定,，對診療結(jié)果的效果提出了重大挑戰(zhàn),。鑒于與許多當(dāng)前的納米微粒遞送系統(tǒng)相關(guān)的問題，外泌體作為“自然的遞送系統(tǒng)”允許遞送這些生物分子,。由于外泌體體積小和其本身就是細(xì)胞產(chǎn)物,，通過外泌體遞送藥物可以避免巨噬細(xì)胞的吞噬作用或降解，還可以在體內(nèi)長時(shí)間循環(huán),，保持效果,。其中，外泌體能夠穿過血腦屏障以將特定藥物輸送到中樞的神經(jīng)系統(tǒng)是外泌體遞送藥物的一個(gè)明顯優(yōu)勢,。外泌體細(xì)胞共培養(yǎng)

上海宇玫博生物科技有限公司公司是一家專門從事外泌體提取試劑盒,，外泌體，外泌體檢測,，外泌體提取產(chǎn)品的生產(chǎn)和銷售,，是一家生產(chǎn)型企業(yè),，公司成立于2015-10-16，位于上海市閔行區(qū)滬青平公路277號5樓,。多年來為國內(nèi)各行業(yè)用戶提供各種產(chǎn)品支持,。主要經(jīng)營外泌體提取試劑盒，外泌體,，外泌體檢測,，外泌體提取等產(chǎn)品服務(wù)，現(xiàn)在公司擁有一支經(jīng)驗(yàn)豐富的研發(fā)設(shè)計(jì)團(tuán)隊(duì),，對于產(chǎn)品研發(fā)和生產(chǎn)要求極為嚴(yán)格,，完全按照行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)研發(fā)和生產(chǎn)。上海宇玫博生物科技有限公司每年將部分收入投入到外泌體提取試劑盒,，外泌體,，外泌體檢測，外泌體提取產(chǎn)品開發(fā)工作中,，也為公司的技術(shù)創(chuàng)新和人材培養(yǎng)起到了很好的推動作用,。公司在長期的生產(chǎn)運(yùn)營中形成了一套完善的科技激勵政策，以激勵在技術(shù)研發(fā),、產(chǎn)品改進(jìn)等,。上海宇玫博生物科技有限公司注重以人為本、團(tuán)隊(duì)合作的企業(yè)文化,，通過保證外泌體提取試劑盒,，外泌體，外泌體檢測,，外泌體提取產(chǎn)品質(zhì)量合格,，以誠信經(jīng)營、用戶至上,、價(jià)格合理來服務(wù)客戶,。建立一切以客戶需求為前提的工作目標(biāo)，真誠歡迎新老客戶前來洽談業(yè)務(wù),。