外泌體的提取主要包括以下幾種方式,。一是超速離心法,，這是目前外泌體提取較常用的方法,。此種方法得到的外泌體量多,，但是純度不足,，電鏡鑒定時(shí)發(fā)現(xiàn)外泌體聚集成塊,，由于微泡和外泌體沒(méi)有非常統(tǒng)一的鑒定標(biāo)準(zhǔn),，也有一些研究認(rèn)為此種方法得到的是微泡不是外泌體,。二是過(guò)濾離心,，這種操作簡(jiǎn)單,、省時(shí)，不影響外泌體的生物活性,，但同樣存在純度不足的問(wèn)題,。三是密度梯度離心法，用此種方法分離到的外泌體純度高,，但是前期準(zhǔn)備工作繁雜,，耗時(shí)，量少,。超速離心是目前分離外泌體的主要技術(shù),。江蘇唾液外泌體

為什么超速離心提取外泌體看不到沉淀？答：這種問(wèn)題通常有三種可能性,，其一：使用的細(xì)胞上清或者血清量太低,，從而造成了這樣的結(jié)果,。其二：使用了不透明的超速離心管，一般來(lái)說(shuō)外泌體產(chǎn)量都比較小,，所以凡是不透明的管子,，基本都是比較難見(jiàn)到明顯沉淀的，可以當(dāng)做有沉淀,，然后操作下去即可,。其三：使用了角轉(zhuǎn)。部分品牌離心機(jī)的角轉(zhuǎn)管壁粘附性比較低,，超離結(jié)束沒(méi)多久沉淀就會(huì)滑落下去,，所以請(qǐng)?jiān)陔x心結(jié)束時(shí)趕緊去收樣。外泌體的角色：1,、外泌體發(fā)揮功能并一定需要受體細(xì)胞攝入外泌體：外泌體的膜蛋白有可能與細(xì)胞膜蛋白作用,，活躍細(xì)胞內(nèi)通路。2,、外泌體的角色之一：細(xì)胞-細(xì)胞通訊,，比如抗原遞呈。腹膜透析液外泌體lncRNA芯片外泌體能夠穿過(guò)血腦屏障以將特定藥物輸送到中樞的神經(jīng)系統(tǒng)是外泌體遞送藥物的一個(gè)明顯優(yōu)勢(shì),。

外泌體的提取分離方法：1,、PEG-base沉淀法：聚乙二醇（PEG）可與疏水性蛋白和脂質(zhì)分子結(jié)合共沉淀，早先應(yīng)用于從血清等樣本中收集病毒,，現(xiàn)在也被用來(lái)沉淀外泌體,，其原理可能與競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合游離水分子有關(guān)。利用PEG沉淀外泌體存在不少問(wèn)題：比如純度和回收率低,，雜蛋白較多（假陽(yáng)性）,，顆粒大小不均一，產(chǎn)生難以去除的聚合物,，機(jī)械力或者吐溫-20等化學(xué)添加物將會(huì)破壞外泌體等,，因此發(fā)表文章時(shí)易受質(zhì)疑,。2,、試劑盒提取：近幾年來(lái),，市場(chǎng)上已出現(xiàn)各種商業(yè)化的外泌體提取試劑盒,，有的是通過(guò)特殊設(shè)計(jì)的過(guò)濾器過(guò)濾掉雜質(zhì)成分，有的則采用空間排阻色譜法(SEC)進(jìn)行分離純化,，也有的則利用化合物沉淀將法外泌體沉淀出來(lái),。

外泌體（Exosomes）是細(xì)胞分泌到胞外的一種囊泡（ExtracellularVesicles，EVs）,，其大小為30-150nm,，具有雙層膜結(jié)構(gòu)和茶托狀形態(tài),，含有豐富的內(nèi)含物（包括核酸、蛋白和脂質(zhì)等）,，參與細(xì)胞間的分子傳遞,。外泌體普遍存在于細(xì)胞培養(yǎng)上清以及各種體液中，包括血液,、唾液,、尿液、乳汁等,，同時(shí)也存在于組織樣本中,，如腦組織、肌肉組織,、脂肪組織等,。腦組織分離方法簡(jiǎn)述：將腦組織剪成薄片，放入離心管中加上消化液進(jìn)行消化,，經(jīng)水浴,、反復(fù)輕輕上下顛倒，再用移液間斷緩慢吹吸至消化結(jié)束,。隨后加入培養(yǎng)基于消化液中,，混勻，置于冰上,。再進(jìn)行一系列的差速超速離心過(guò)程,，包括除雜、濾膜過(guò)濾,、超離等,。結(jié)尾用PBS重懸外泌體，用重懸后的外泌體進(jìn)行下面的透射電鏡（TEM）,、納米粒徑追蹤分子（NTA）和markerWB鑒定,。外泌體可以通過(guò)多種方法給藥，靜脈內(nèi)給藥是較常用的途徑,。

外泌體的相關(guān)成分：1,、外泌體的膜同細(xì)胞一樣，是磷脂雙分子層,。2,、外泌體膜含有MHC-1/2蛋白，能綁定特異性的肽鏈,。3,、外泌體膜中有跨膜蛋白PGRL、LAMP1、LAMP2,。4,、外泌體膜中有膜轉(zhuǎn)運(yùn)融合蛋白annexins、RAN,、GTPases,。5、外泌體膜上有脂質(zhì)筏Chol,、ceramide,、SM、PC,，限制膜流動(dòng),，參與包括跨膜信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、物質(zhì)內(nèi)吞,、脂質(zhì)及蛋白定向分選的多種功能,。6、外泌體中含有核酸,，包括miRNA,、DNA、lncRNA,、mRNA,；同時(shí)還有一些蛋白、脂類(lèi)也能被包裹到外泌體中,。7,、與外泌體產(chǎn)生相關(guān)的重要分子：Ral、ARF6,、PLD2,、RAB家族。8,、一些物質(zhì)進(jìn)行外泌體中是特異性的：如hnRNPA2B1能結(jié)合lncRNA或miRNA特異性的序列（GGAG/CCCU）,，進(jìn)行主動(dòng)包埋。外泌體發(fā)揮功能方式：細(xì)胞-細(xì)胞之間的通訊,，譬如抗原遞呈,，這是發(fā)揮功能的主要方式。河南外泌體miRNA測(cè)序

外泌體是指包含了復(fù)雜 RNA 和蛋白質(zhì)的小膜泡 (30-150nm),。江蘇唾液外泌體

外泌體的提取,、純化和鑒定：每一個(gè)外泌體研究者較初都要為外泌體的分離提取而煩惱,。選擇的分離方式是利用超速離心的方式分離外泌體,，并且可以選用梯度密度離心法得到純度更高的外泌體。另外利用外泌體自身的物理化學(xué)性質(zhì)所研發(fā)的各種市售的外泌體分離提取試劑盒也能達(dá)到分離效果,。提取的外泌體的鑒定方式主要是通過(guò)形態(tài)學(xué)（電子顯微鏡技術(shù)）,、粒子大小以及標(biāo)志蛋白等方式實(shí)現(xiàn)的,。近來(lái)的研究發(fā)現(xiàn)外泌體在比較多生理病理上起著重要的作用，如免疫中抗原呈遞,、瘤子的生長(zhǎng)與遷移,、組織損傷的修復(fù)等。不同細(xì)胞分泌的外泌體具有不用的組成成分和功能,，可作為疾病診斷的生物標(biāo)志物,。外泌體具有脂質(zhì)雙層膜結(jié)構(gòu)，能比較好的保護(hù)其包被的物質(zhì),，且能靶向特定細(xì)胞或組織,，因此是一種比較好靶向給藥系統(tǒng)。江蘇唾液外泌體

上海宇玫博生物科技有限公司屬于醫(yī)藥健康的高新企業(yè),，技術(shù)力量雄厚,。公司是一家外商投資股份企業(yè)企業(yè)，以誠(chéng)信務(wù)實(shí)的創(chuàng)業(yè)精神,、專(zhuān)業(yè)的管理團(tuán)隊(duì),、踏實(shí)的職工隊(duì)伍，努力為廣大用戶(hù)提供***的產(chǎn)品,。以滿(mǎn)足顧客要求為己任,；以顧客永遠(yuǎn)滿(mǎn)意為標(biāo)準(zhǔn)；以保持行業(yè)優(yōu)先為目標(biāo),，提供***的外泌體提取試劑盒,，外泌體，外泌體檢測(cè),，外泌體提取,。宇玫博生物將以真誠(chéng)的服務(wù)、創(chuàng)新的理念,、***的產(chǎn)品,，為彼此贏得全新的未來(lái)！