磁珠免疫法分離外泌體：將針對目的抗原的抗體通過生物素-鏈霉親和素連接到磁珠表面，然后將磁珠與樣品共孵育,，使外泌體特異性結(jié)合到磁珠上形成磁珠-外泌體復(fù)合物,，再用蒸餾水或者PBS沖洗，結(jié)尾用甘氨酸-Tris-HCl溶液洗脫獲得外泌體,。該方法相對于ELISA的好處主要是,，珠粒提供了更大的表面積來捕獲外泌體，從而提高了分離效率,。此外,，使用磁珠時，樣品起始體積沒有上限,，而基于微孔板的ELISA分析的較大樣品體積為100μL,，且ELISA洗脫雜質(zhì)時容易造成孔間交叉污染。當(dāng)將磁珠法與金標(biāo)準外泌體分離方法進行比較時,，磁珠法可分離出更純凈的外泌體,，特異性高、速度更快,，并且不需要昂貴的儀器,。另外，與其他分離方法（如超速離心或超濾）相比,，磁珠法不影響外泌體形態(tài),。但是采用磁珠法時，外泌體生物活性易受PH和鹽濃度影響,。外泌體膜含有MHC-1/2蛋白,，能綁定特異性的肽鏈。成都CD81外泌體慢病毒包裝

外泌體作為細胞間信使較早發(fā)現(xiàn)于體外培養(yǎng)的綿羊紅細胞上清液中,，是直徑為30~150nm,，密度為1.10~1.18g/ml的細胞外囊泡，攜帶豐富的遺傳信息,，參與細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo),、細胞遷移、瘤子新生血管生長和瘤子微環(huán)境形成等過程,。由于現(xiàn)存的分離技術(shù)是基于外泌體的大小,、結(jié)構(gòu)和膜蛋白的親和捕獲，比較難完全將其與其他囊泡和大分子蛋白質(zhì)復(fù)合體區(qū)分開，分離出的外泌體蛋白濃度通常會被高估,，并且不同亞型外泌體之間可能會有不同蛋白質(zhì)特征,，所以對分離的外泌體進行鑒定對于后期研究至關(guān)重要。血漿外泌體和血清外泌體的區(qū)別外泌體的納米球膜型結(jié)構(gòu)由雙層脂質(zhì)形成,。

磁珠免疫法分離外泌體：將針對目的抗原的抗體通過生物素-鏈霉親和素連接到磁珠表面,，然后將磁珠與樣品共孵育，使外泌體特異性結(jié)合到磁珠上形成磁珠-外泌體復(fù)合物,，再用蒸餾水或者PBS沖洗,，結(jié)尾用甘氨酸-Tris-HCl溶液洗脫獲得外泌體。該方法相對于ELISA的好處主要是,，珠粒提供了更大的表面積來捕獲外泌體,，從而提高了分離效率。此外,，使用磁珠時,，樣品起始體積沒有上限，而基于微孔板的ELISA分析的較大樣品體積為100μL,，且ELISA洗脫雜質(zhì)時容易造成孔間交叉污染,。當(dāng)將磁珠法與金標(biāo)準外泌體分離方法進行比較時，磁珠法可分離出更純凈的外泌體,，特異性高,、速度更快，并且不需要昂貴的儀器,。另外,，與其他分離方法相比，磁珠法不影響外泌體形態(tài),。但是采用磁珠法時,，外泌體生物活性易受PH和鹽濃度影響。

外泌體的提取主要包括以下幾種方式：1,、免疫磁珠法,，這種方法可以保證外泌體形態(tài)的完整，特異性高,、操作簡單,、不需要昂貴的儀器設(shè)備，但是非中性pH和非生理性鹽濃度會影響外泌體生物活性,，不便進行下一步的實驗。2,、PS親和法,，該方法將PS（磷脂酰絲氨酸）與磁珠結(jié)合，利用親和原理捕獲外泌體囊泡外的PS。該方法與免疫磁珠法相似,，獲得的外泌體形態(tài)完整,，純度較高。由于不使用變性劑,，不影響外泌體的生物活性,，外泌體可用于細胞共培養(yǎng)和體內(nèi)注射。3,、色譜法,，這種方法分離到的外泌體在電鏡下大小均一，但是需要特殊的設(shè)備,，應(yīng)用不普遍,。外泌體作為核酸的藥物遞送載體。需要開發(fā)大規(guī)模生產(chǎn)質(zhì)量可控的外泌體并快速純化外泌體的技術(shù)和策略,。

流式細胞技術(shù)是細胞和小顆粒定性和定量表征的有效方法,，其用于外泌體定量檢測的準確性也在不斷上升。將外泌體表面特異性標(biāo)志物CD63,、CD81等相應(yīng)抗體進行標(biāo)記,，可用流式細胞儀檢測到陽性表達，從而實現(xiàn)對外泌體的定量,。但流式細胞技術(shù)檢測時需要單顆粒懸浮液,，當(dāng)外泌體濃度高或分離過程中發(fā)生外泌體囊泡聚集時將導(dǎo)致一次觀察到多個顆粒，從而導(dǎo)致數(shù)據(jù)不準確,。因此,，為了通過流式細胞儀觀察，需要將外泌體通過免疫捕獲或共價結(jié)合固定在磁珠表面上,，從而便于將外泌體囊泡暴露于已知或者預(yù)期在外泌體表面表達的抗原的熒光偶聯(lián)抗體中,。在流式細胞術(shù)之前，可以在落射熒光顯微鏡（EPI）下觀察與磁珠和熒光抗體偶聯(lián)的外泌體囊泡,。當(dāng)樣品通過流式細胞儀時采集熒光信號,，不只可以對外泌體進行高通量分析，還可以基于抗原表達對外泌體進行定量或分類,。外泌體中常見的細胞質(zhì)蛋白是Rabs蛋白,，是鳥苷酸三磷酸酶家族的一種。超速離心法,，這是目前外泌體提取較常用的方法,。安徽唾液外泌體

外泌體中常見的細胞質(zhì)蛋白是Rabs蛋白，是鳥苷酸三磷酸酶家族的一種,。成都CD81外泌體慢病毒包裝

NTA技術(shù)已被作為外泌體表征手段之一,，相較于其他表征方式NTA技術(shù)的樣本處理更簡單、更能保證外泌體原始狀態(tài)、檢測速度更快,。大致方法是：將分離的外泌體樣本注入納米顆粒追蹤分析儀,，用激光光束穿過樣本，激光在腔室內(nèi)與顆粒相互作用時會發(fā)生散射,，通過裝有攝像頭的顯微鏡收集散射光,，捕捉外泌體的布朗運動，實現(xiàn)顆?？梢暬?。然后使用Stokes-Einstein方程來測量粒子的平均速度，繼而估算粒子的大小,。NTA能夠測量粒徑10-1000nm之間的顆粒,，包含了外泌體50-150nm的徑粒范圍，但是NTA鑒定需要大于0.5毫升的樣品體積以及優(yōu)化的數(shù)據(jù)收集和分析參數(shù),，另外,，NTA比較難區(qū)分與外泌體具有相似布朗運動的蛋白質(zhì)聚集體，因此無法排除其他物質(zhì)的干擾,。成都CD81外泌體慢病毒包裝

上海宇玫博生物科技有限公司成立于2015-10-16,，位于上海市閔行區(qū)滬青平公路277號5樓，公司自成立以來通過規(guī)范化運營和高質(zhì)量服務(wù),，贏得了客戶及社會的一致認可和好評,。公司主要產(chǎn)品有外泌體提取試劑盒，外泌體,，外泌體檢測,，外泌體提取等，公司工程技術(shù)人員,、行政管理人員,、產(chǎn)品制造及售后服務(wù)人員均有多年行業(yè)經(jīng)驗。并與上下游企業(yè)保持密切的合作關(guān)系,。Umibio以符合行業(yè)標(biāo)準的產(chǎn)品質(zhì)量為目標(biāo),，并始終如一地堅守這一原則，正是這種高標(biāo)準的自我要求,，產(chǎn)品獲得市場及消費者的高度認可,。上海宇玫博生物科技有限公司以先進工藝為基礎(chǔ)、以產(chǎn)品質(zhì)量為根本,、以技術(shù)創(chuàng)新為動力,，開發(fā)并推出多項具有競爭力的外泌體提取試劑盒，外泌體,，外泌體檢測,，外泌體提取產(chǎn)品,，確保了在外泌體提取試劑盒，外泌體,，外泌體檢測，外泌體提取市場的優(yōu)勢,。