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福建外泌體lncRNA芯片

來源: 發(fā)布時間:2023-07-10

外泌體可以由體內(nèi)或體外培養(yǎng)的幾乎所有類型的細(xì)胞分泌,并廣fan存在于血漿,、膽汁,、尿液、母乳,、唾液,、胸腔積液、淋巴、胃酸,、支氣管肺泡灌洗液,、腦脊液、眼淚,、滑膜液,、羊水、腹水,、鼻分泌物和子宮抽吸物液體等體液中,。目前,基于不同的分離原理,研究者建立了五種主要的提取純化技術(shù),分別為基于質(zhì)量密度的超速離心技術(shù)、基于粒徑大小的分離技術(shù),、基于溶解性質(zhì)的聚合物沉淀技術(shù),、基于免疫親和原理的分離技術(shù)和基于流體性質(zhì)的微流控技術(shù)。外泌體功能在研究初期階段發(fā)現(xiàn)是參與細(xì)胞成熟過程中去除不必要的蛋白質(zhì),。福建外泌體lncRNA芯片

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卵巢ai患者與良性卵巢疾病患者血清外泌體中的miRNA表達(dá)譜有明顯差異,,表明血清外泌體中的miRNA可以作為卵巢ai活檢的替代診斷標(biāo)志物。多項研究表明外泌體中的miR-21在包括大多數(shù)ai癥的多種病理條件下過度表達(dá),。尿液外泌體來源于泌尿系統(tǒng)相關(guān)的各種細(xì)胞,,包括腎小球足細(xì)胞、腎小管細(xì)胞和膀胱等,,因此尿液外泌體數(shù)目,、形態(tài)和生化性質(zhì)的改變往往反映泌尿系統(tǒng)疾病。通過對前列腺ai癥患者尿液中的外泌體進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組分析,,鑒定到兩種已知的前列腺ai癥標(biāo)志物PCA-3(prostatecanceranti[1]gen3,,前列腺ai抗原3)和TMPRSS2:ERG(thefusiongeneoftransmembraneproteaseserinestoERG,跨膜蛋白酶絲氨酸與ERG的融合基因),,表明尿液外泌體具有診斷和監(jiān)測ai癥患者狀態(tài)的潛力,。山東外泌體Dil外泌體中含有豐富的蛋白質(zhì)和遺傳物質(zhì)DNA以及RNA等。

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人體內(nèi)多種細(xì)胞及體液均可分泌外泌體,,包括內(nèi)皮細(xì)胞,、免疫細(xì)胞、血小板,、平滑肌細(xì)胞等,。當(dāng)其由宿主細(xì)胞被分泌到受體細(xì)胞中時,外泌體可通過其攜帶的蛋白質(zhì),、核酸,、脂類等來調(diào)節(jié)受體細(xì)胞的生物學(xué)活性。外泌體介導(dǎo)的細(xì)胞間通訊主要通過以下三種方式:一是外泌體膜蛋白可以與靶細(xì)胞膜蛋白結(jié)合,,進(jìn)而喚醒靶細(xì)胞細(xì)胞內(nèi)的信號通路,。二是在細(xì)胞外基質(zhì)中,,外泌體膜蛋白可以被蛋白酶剪切,剪切的碎片可以作為配體與細(xì)胞膜上的受體結(jié)合,,從而喚醒細(xì)胞內(nèi)的信號通路,。有報道稱一些外泌體膜上蛋白在其來源細(xì)胞膜上未能檢測出。三是外泌體膜可以與靶細(xì)胞膜直接融合,,非選擇性的釋放其所含的蛋白質(zhì),、mRNA以及microRNA。

所有真核細(xì)胞類型包括造血細(xì)胞,、上皮細(xì)胞,、神經(jīng)細(xì)胞,、干細(xì)胞,、脂肪細(xì)胞和病癥細(xì)胞均可在培養(yǎng)條件下分泌外泌體。體內(nèi)所有體液,,包括血液,、唾液、腦脊液,、腹水,,甚至尿液中都可以分離得到外泌體。這些外泌體傳輸多種信號分子,,包括蛋白質(zhì),、信使核糖核酸(mRNA)和非編碼核糖核酸(RNA),其攜帶的分子可以被其他細(xì)胞吸收,。因此,,外泌體可以將生物信息轉(zhuǎn)移到相鄰細(xì)胞。這種細(xì)胞間通信不只涉及生理功能,,還涉及一些疾病的發(fā)病機理,,包括瘤、心血管疾病和神經(jīng)退行性疾病等,。外泌體的功能取決于其所來源的細(xì)胞類型,。

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circZKSCAN1在肝ai細(xì)胞中低表達(dá)且抑制肝ai細(xì)胞的增殖,ciRS-7則被認(rèn)為是非小細(xì)胞肺ai,、結(jié)腸ai和胃ai等中流的預(yù)后指標(biāo),,其高表達(dá)與較高的臨床分期和較差的總體生存期相關(guān)。目前已發(fā)現(xiàn)組織,、血液和外泌體中的circRNA分子表達(dá)失調(diào),,而多種circRNA的聯(lián)合檢測會提高外泌體標(biāo)志物的敏感性和特異性,甚至可達(dá)到90%左右,。外泌體可作為納米載體來介導(dǎo)細(xì)胞間的信息傳遞,,發(fā)揮信息傳遞作用的方式主要有:在細(xì)胞間轉(zhuǎn)移受體,通過配體受體介導(dǎo)的方式作用于受體細(xì)胞,向受體細(xì)胞轉(zhuǎn)移功能蛋白,,通過膜融合方式向受體細(xì)胞傳遞mRNA,、miRNAs或轉(zhuǎn)錄因子等信息。這些方式為中流靶向zhiliao開辟了新的途徑,。外泌體的復(fù)雜性,,為疾病檢測和監(jiān)測提供了一個多指標(biāo)的診斷窗口。提取試劑盒分類

在從體液中提取外泌體后,,體液可長期穩(wěn)定保存,。福建外泌體lncRNA芯片

為了解決外泌體實驗遇到的上述的各種問題,Wako研發(fā)出MagCapture?外泌體提取試劑盒PS(MagCapture?ExosomeIsolationKitPS)提取高純度細(xì)胞外囊泡。外泌體膜含有分泌細(xì)胞源的蛋白和脂質(zhì),,眾所周知磷脂酰絲氨酸(PS)在活細(xì)胞通過翻轉(zhuǎn)酶作用導(dǎo)向細(xì)胞膜內(nèi)側(cè),,暴露在外泌體膜外側(cè)3)。另外,,T-cellimmunoglobulindomainandmucindomain-containingprotein4(Tim4通過巨噬細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞凋亡的吞噬受體)蛋白通過細(xì)胞外域IgV域與含有鈣離子的PS結(jié)合4),。基于上述知識,,我們利用Tim4固化磁珠,,在鈣離子存在下捕捉培養(yǎng)上清和血清等樣品中的外泌體,再添加螯合劑洗脫外泌體,,這種外泌體純化方法是和金澤大學(xué)醫(yī)學(xué)系免疫學(xué)華山教授共同開發(fā),,并取得了成功。5)這是迄今為止取代黃金標(biāo)準(zhǔn)超速離心法的新型外泌體純化方法,。福建外泌體lncRNA芯片

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